תמיסות רותחות של אנזימים היא ביטול ביוכימיה שלהם. ביטול אנזימים בהשפעת חמצן

כמות האנזים הקיים ברקמות בכל זמן נתון נקבעת לפי הקצב היחסי של הסינתזה והדעיכה שלו, כמו גם ריכוזים של מעכבים ומפעילים שונים. ככלל, פירוק האנזימים וירידתם במדיום איטיים. עיכוב והפעלה של אנזימים יכולים להתבצע די מהר - תוך שניות.

קיימות שיטות רבות לקביעה ולביטוי הפעילות של אנזימים בודדים. הדבר נובע ממגוון האנזימים, נוכחות ושימוש במצעים שונים לקביעת פעילותם.

האיגוד הביוכימי הבינלאומי הציע את ההגדרה הבאה של יחידת האנזים: " היחידה של כל אנזים היא הכמות המזרזת את ההמרה של מיקרומול אחד של מצע לדקה בתנאים סטנדרטיים נתונים. ». מספר המיקרומולים ויהיה שווה למספר היחידות הסטנדרטיות . הוועדה הבינלאומית הציעה, במידת האפשר, לבצע את קביעת פעילות האנזים ב-30 מעלות צלזיוס ובערכי pH וריכוזי מצע האופטימליים לפעילות אנזימטית.

כללי תכונות האנזים לזרום החוצה מהטבע החלבון שלהם . אנזימים תרמי, פעילותם תלויה ב-pH של המדיום ובלחות שבו הם פועלים, כמו גם מתוך השפעות של מפעילים ומעכבים .

כאשר הטמפרטורה עולה לגבולות מסוימים, פעילות האנזימים עולה.. כאשר מגיעים לטמפרטורה האופטימלית עבור האנזים, הפעילות הקטליטית שלו היא הגבוהה ביותר. הטמפרטורה האופטימלית עבור אנזימים רבים טמונה לרוב ב בטווח שבין 40 ל-50 מעלות צלזיוס (אופטימלי עבור אנזימים צמחיים - 50 - 60 מעלות צלזיוס, ולאנזימים ממקור בעלי חיים - 40 - 50 מעלות צלזיוס). עם זאת, הטמפרטורה האופטימלית אינה קבועה לחלוטין ותלויה בגורמים רבים, ובפרט במשך החימום. ככל שפעולת האנזים ארוכה יותר, כך הטמפרטורה האופטימלית צריכה להיות נמוכה יותר. .

בטווח הטמפרטורות שבין 0 ל-50 מעלות צלזיוס, עם עלייה או ירידה בטמפרטורה עבור כל 10 מעלות צלזיוס, פעילות האנזימים עולה או יורדת, בהתאמה, פי 1.4-2. עם חימום נוסף, פעילות האנזימים פוחתת, ו ב-80 - 100 מעלות צלזיוס, אנזימים בדרך כלל מאבדים לחלוטין את תכונותיהם הקטליטיות עקב דנטורציה של חלבון .

טמפרטורת האינאקטיבציה (אובדן הפעילות) משתנה עבור אנזימים שונים.. לפיכך, השבתה של האנזים עמילאז בתמיסה מתרחשת ב-70 מעלות צלזיוס, סוכראז - ב-59 מעלות צלזיוס, טריפסין ופפסין - ב-65 מעלות צלזיוס. במצב יבש, אנזימים יכולים לסבול חימום לטמפרטורות גבוהות יותר. אבל בטמפרטורות גבוהות מאוד, השבתת האנזים מתרחשת באופן מיידי. במהלך הפסטור, העיקור, הלבנה והרתחה, אנזימים נהרסים .

לאחר השבתת החום, חלק מהאנזימים משחזרים את הפעילות הקטליטית שלהם. דוגמה לכך היא פרוקסידאז, שגם בחימום במשך 60 שניות ל-150 מעלות צלזיוס, אינו מאבד לחלוטין את תכונותיו הקטליטיות. לכן, פרוקסידאז נחשב לאנזים התרמו-יציב ביותר.

בטמפרטורות מתחת ל-0 מעלות צלזיוס, הפעילות הקטליטית של אנזימים מופחתת בחדות, אך עדיין נשארת גם כשהמוצרים מוקפאים.

לתגובה של המדיום יש השפעה משמעותית על הפעילות הקטליטית של אנזימים. אנזימים משנים את מסיסותם, הלחץ האוסמוטי, הצמיגות ותכונות אחרות בהשפעת ה-pH של המדיום. הם מאמינים בזה השינוי בפעילות האנזימטית בהתאם ל-pH של המדיום קשור לשינוי יינוןאנזימים, מצע או מתחם אנזים-מצע .

אנזימים מפגינים פעילות מיטבית רק בטווחי pH מסוימים האופייניים להם.. לפיכך, לפפסין, המשתחרר לסביבה החומצית החזקה של הקיבה, יש פעילות אופטימלית ב-pH 1.5 ו-2.5. יחד עם זאת, לפרוטאזות המופרשות מהלבלב לתריסריון פעילות אופטימלית באזור ה-pH הבסיסי, והפעולה האופטימלית של טריפסין נמצאת ב-pH 8-9. בערך pH מעל או מתחת לאופטימום, פעילות האנזים יורדת. .

רוב האנזימים פעילים ביותר בסביבות ניטרליות, מעט בסיסיות או מעט חומציות. כאשר ערך ה-pH עובר מאופטימלי לסביבה חומצית או בסיסית, פעילות האנזים פוחתת.

מפעילים ומעכבים(משתקים) של אנזימים יכולים בהתאמה לחזק או להחליש ואף להפסיק את פעילותם. מפעילים אנזימים הם יוני מתכת: Na + , K + , Rb + , Mg 2+ , Ca 2+ , Cu 2+ , Fe 2+ ותרכובות המכילות קבוצות sulfhydryl: SH, HCN, H 2 S . הנוכחות בתמיסה של מתכות או תרכובות אלו בריכוז מסוים תורמת לביטוי הפעילות המלאה של כמה אנזימים.

כל האנזימים נתונים לעיכוב כתוצאה מדנטורציה או פירוק של חלבון האנזים..

מהות פעולתם של מעכבים ברוב המקרים היא שהם משתלבים עם קבוצות פעילות או מרכזים פעילים של מולקולת האנזים. לְהַבחִין מעכבים כלליים וספציפיים . ל מעכבים כלליים, איזה מעכב את פעולת כל האנזימים , מתייחס מלחים של מתכות כבדות (עופרת, כסף, כספית), חומצה טריכלורואצטית וטאנין . לעתים קרובות העיכוב או הפסקת פעולתם של אנזימים בהשפעת מתכות כבדות הוא הפיך, ואם מוסיפים למדיום חומרים היוצרים תרכובות עם מתכות אלו, אזי הפעילות של האנזימים משוחזרת.

מעכבים ספציפייםמשפיע רק על אנזימים מסוימים. לפיכך, חומצה הידרוציאנית פועלת רק על אנזימים חמצוניים המכילים ברזל או נחושת במרכז הפעיל. חומצה הידרוציאנית מתחברת עם מתכות, והאנזים מאבד את פעילותו.

בתא חי, ויסות פעולת האנזימים מתבצע לא רק בעזרת מפעילים ומעכבים ספציפיים, אלא גם על ידי קשירת אנזימים למבנים קולואידים שונים של הפרוטופלזמה. קשירה כזו של אנזימים מובילה לאובדן פעילותם. שחרור האנזים מהתרכובת משחזר את פעילותו הקטליטית שוב.

אנזימים מושבת בלחצים גבוהים מאוד . עם זאת, לאחר הסרת הלחץ, האנזימים משחזרים את הפעילות הקטליטית שלהם.

פעולת האנזימים מואטת מאוד במוצרים יבשים, אך אינה נעצרת לחלוטין. תוצאות פעילות האנזים יכולות לבוא לידי ביטוי בשינוי באיכות המוצר - התכהותו, הידרדרות בארומה, בטעם, במרקם וכו'.

קצב רוב התגובות האנזימטיות הוא פרופורציונלי לריכוז האנזים, לפחות בשלבים המוקדמים ביותר. מעבר לשלבים הראשוניים, קצב התגובות האנזימטיות יורד.

האנזים יוצר קומפלקס עם הסובסטרט, שמתפרק לאנזים חופשי ולתוצר הסופי של התגובה:

כאשר E הוא אנזים; S - מצע; ES, אנזים-סובסטרט קומפלקס; R הוא התוצר הסופי.

כמות הסובסטרט גדולה מאוד בהשוואה לכמות האנזים, ולכן ריכוז המצע משפיע מאוד על קצב התגובות האנזימטיות. אם המצע כלול בעודף משמעותי, אזי כמות המוצר שנוצרה היא פרופורציונלית לזמן. ככל שריכוז המצע יורד, כמות התוצר הסופי (P) שנוצר ביחידת זמן פוחתת.

נוכחות של אנזים בתמיסה נשפטת לפי פעולתו. אז, נוכחות של עמילאז ברוק ניתן לשפוט לפי יכולתו של רוק להסוכר עמילן, נוכחות של פפסין קיבה - לפי יכולתו להמיס חלבון ביצה או פיברין במהירות מספקת.

על ידי וויסות פעילות האנזימים על ידי יצירת תגובה מתאימה של הסביבה, ניתן לשלוט בקצב התגובות המזורזות על ידם וכן בפעילות האנזימים הכלולים במוצרי מזון, המאפשרת לבצע פעילות עבור אחסון תבואה, תפוחי אדמה, פירות וירקות, ייצור של מספר מוצרים (יין, תה וכו') ..).

מינוח וסיווג אנזימים

בתקופה הראשונית של התפתחות תורת האנזימים ניתנו להם שמות ללא מערכת מוגדרת, לפי סימנים אקראיים, לפי שם המצע או סוג התגובה המזוזת. אז האנזים פפסין קיבל את שמו מהמילה היוונית "פפסיס" - אני מעכל, פפאין - מהמיץ של צמח הפפאיה, העשיר באנזים. קרה שמחברים בודדים נתנו שמות שונים לאותו אנזים.

בקשר להתפתחות המהירה של מדע האנזימים - פרמנטולוגיה בשנת 1961, הוועדה המתמדת לאנזימים באיגוד הביוכימי הבינלאומי פיתחה מינוח וסיווג אנזימים מודרניים. בהתאם לסיווג זה, שם האנזים הורכב מהשם הכימי של המצע ומשם התגובה שבוצעה על ידי האנזים. לשם הלטיני של שורש המצע עליו פועל האנזים (סוכרוז - סוכרוז), או לשם התהליך המזרז על ידי אנזים זה (הידרוליזה - הידרולאזות), סיום נוסף"אזה". לצד השמות החדשים של אנזימים רבים, נשתמרו הישנים שהתבססו היטב בספרות המדעית (פפסין, טריפסין, פפאין וכו').

על פי הסיווג המודרני, כל האנזימים מחולקים ל שֵׁשׁ שיעורים: oxidoreductases; העברות; הידרולאזים; ליאזות; איזומראזים; ליגזות (סינטטאזות) . סיווג האנזימים מבוסס על אופי פעולתם.

כל מחלקה מחולקת לתת-מחלקות וכל תת-מחלקה לקבוצות..

אוקסידורדוקטאז

אלו אנזימים המזרזים תגובות חיזור שמתרחשים באורגניזמים חיים. תגובות חמצון של חומרים באורגניזמים מלוות תמיד בתגובות הפחתה. Oxidoreductases מחולקים ל 14 כיתות משנה (המחלקה הנרחבת ביותר של אנזימים).

החמצון ממשיך כתהליך של הוצאת מימן (אלקטרונים) מהמצע, וההפחתה ממשיכה כתוספת של אטומי מימן (אלקטרונים) למקבל. תגובה זו יכולה להיות מיוצגת באופן סכמטי באופן הבא:

AN 2 + B \u003d A + BH 2,

כאשר AN 2 הוא חומר התורם את המימן שלו ונקרא תורם; B הוא חומר שלוקח מימן ונקרא מקבל.

ניתן לחמצן מגוון חומרים - פחמימות, שומנים, חלבונים, חומצות אמינו, ויטמינים וכו'.

תפקידם של oxidoreductases ברקמות חיות מבוצע על ידי קבוצות נרחבות דהידרוגנאזות ו אוקסידאז , אשר נקראים בהתאם למצע שהם מחמצנים. אז, האנזים שמייבש חומצה מאלית נקרא דהידרוגנאז מאלאט, אלכוהול אתילי המייבש נקרא אלכוהול דהידרוגנאז וכו'.

בקבוצת ה-oxidoreductases, יש חשיבות עיקרית ל-dehydrogenases המבצעים את תגובת הדה-hydrogenation. כל הדהידרוגנאזות מחולקות לשתי קבוצות : אנאירובי ואירובי, הנקראים אוקסידאזים .

דהידרוגנאז אנאירוביהם אנזימים ספציפיים המזרזים פיצול מימן מכימיקלים מסוימים ומעבירים אותו לאנזימים אחרים - נשאים של מימן. דהידרוגנזים אלו הם אנזימים דו-רכיביים שבהם הקואנזים מופרד בקלות מחלק החלבון. בתור קו-אנזים דהידרוגנאז אנאירובי יכול לכלול שני חומרים - ניקוטין-אמיד-אדנין-נוקלאוטיד ( מֵעַל ) או ניקוטין אמיד אדלין נוקלאוטיד פוספט ( NADP ). לשני החומרים הללו תגובת חיזור גבוהה במיוחד.

ידועים רבים של דהידרוגנאז אנאירוביים המזרזים את החמצון של תרכובות אורגניות שונות. אז, דהידרוגנאז לקטט מזרז את החמצון של חומצה לקטית לחומצה פירובית, isocitrate dehydrogenase מזרז את החמצון של חומצה איזוציטרית לאוקסלו-סוקסין.

לקבוצה דהידרוגנאז אירובי (אוקסידאזות)כוללים אנזימים ש בתור קו-אנזים כלול ויטמין B 2 , (ריבופלבין ), כך נקראים אנזימים אלה פלבין . אנזימי פלבין מסוגלים לקחת מימן מהחומר המחומצן ולהעבירו לתרכובות אחרות או לחמצן אטמוספרי:

2H 2 O 2 → 2H 2 O + O 2.

נטילת מימן מהחומר המחומצן והעברתו לחמצן באוויר, אוקסידאז יכול ליצור בו זמנית מים או מי חמצן (H 2 O או H 2 O 2). קבוצת אנזימים זו כוללת פוליפנול אוקסידאז, אסקורבט אוקסידאז וגלוקוז אוקסידאז.

פוליפנול אוקסידאזהוא דהידרוגנאז אירובי שעבורו קולט מימן הוא חמצן גזי .

הוא פועל על או-דיפנולים, פוליפנולים, טאנינים וטירוזין. פוליפנול אוקסידאז מופץ באופן נרחב בפטריות ובצמחים גבוהים יותר, במיוחד בעלי תה ירוק. פעולתו של פוליפנול אוקסידאז מסבירה את ההתכהות על החתך של עיסת הפירות והירקות, תפוחי אדמה, כמו גם את ההתכהות של עלה תה טרי כאשר הוא מסובב. פוליפנול אוקסידאז ממלא תפקיד חשוב כתוצר ביניים בנשימה הצמחית.

אֶנזִים פרוקסידאז יחד עם פוליפנול אוקסידאז וציטוכרום אוקסידאז, הוא מעורב באופן פעיל בתהליכי הנשימה של הצמח ותגובות ההגנה הצמחיות נגד מיקרואורגניזמים צמחיים פיטו-פתוגניים.

הקבוצה הפעילה של פרוקסידאז מכילה בַּרזֶל . בעזרת האנזים פרוקסידאז עם מי חמצן וכמה פרוקסידים אורגניים אחרים, תרכובות אורגניות מחומצנות. פרוקסידאז יוצר תרכובת אורגנית מורכבת, וכתוצאה מכך הפרוקסיד מופעל ורוכש את היכולת לפעול כמקבל מימן:

תרכובות אורגניות רבות מגיבות עם חמצן אטמוספרי ויוצרות פרוקסידים. פרוקסידים נוצרים בקלות במיוחד כאשר תרכובות עם קשרים בלתי רוויים מתחמצנות עם חמצן אוויר: קרוטנואידים, חומצות שומן בלתי רוויות וכמה פחמימנים.

אֶנזִים קטלאז מזרז את תהליך פיצול מי חמצן למים וחמצן:

ההרכב של מולקולת הקטלאז, כמו פרוקסידאז, כולל בַּרזֶל . המטרה העיקרית של הקטלאז בגוף היא שהוא הורס מי חמצן, המזיק לתאים, ונוצר בזמן הנשימה.

אֶנזִים ליפוקסיגנאז מזרז היווצרות של פרוקסידים והידרופרוקסידים במהלך הידרדרות חמצונית של שומנים.

כפי שניתן לראות מאיור. 46, עבור רוב המערכות, ניתן להבחין בפרק זמן שבמהלכו שיעור הכשלים קבוע:

λ(t) = λ = const.

אם שיעור הכשל במרווח זמן נתון הוא קבוע ואינו פונקציה של זמן, אזי לפי משוואה (3.64), לפונקציית המהימנות יש את הצורה

P(t) = e-λt . (3.70)

חוק אקספוננציאלי זה נמצא בשימוש נרחב מאוד בתורת המהימנות.

ברור שלסיכון לכישלון λ במקרה זה יש משמעות של קבוע קצב השבתת האנזים k והוא קשור לתהליך פיזיקוכימי מסוים באתר הפעיל של האנזים, המוביל לאובדן פעילות קטליטית.

לפיכך, המעריך במשוואה (3.70) מאפשר שתי פירושים. מנקודת מבט של קינטיקה כימית, זהו קבוע הקצב של התגובה המונומולקולרית של הפיכת האנזים E לצורה לא פעילה E i, מבחינת תורת המהימנות, זהו שיעור הכשל. ברור שמושגים אלו מקבילים במובן הפיזי ומייצגים את תדירות הפעולות היסודיות של אי הפעלה של מולקולות אנזים.

זמן הפעולה הממוצע של כל מולקולות הזרז, המושבת על פי החוק האקספוננציאלי, שווה ל

T 0 = 1/k. (3.71)

היישום של תורת המהימנות מקל מאוד להסיק מספר מסקנות איכותיות חשובות לגבי הדפוסים הקינטיים של אי-אקטיבציה של מערכות פוליאנזימטיות מורכבות. המאמרים בוחנים את הדפוסים הקינטיים של השבתת מערכות פוליאנזים בהנחה שכל אחד מהאנזימים מושבת על פי חוק אקספוננציאלי.

הבה נבחן מערכת פוליאנזימטית בהשתתפות n אנזימים המושבתים על פי חוק אקספוננציאלי. עבור מערכות פוליאנזימטיות הממירות את המצע הראשוני לתוצר התגובה הסופי, אי הפעלה של כל אחד מהאנזימים מובילה לאובדן התפקוד הקטליטי של המערכת כולה. אם אנזימים מושבתים ללא תלות זה בזה, ההסתברות לפעולה ללא כשל של המערכת כולה תהיה שווה למכפלת ההסתברויות לפעולה ללא כשל של כל אנזים בשרשרת בנפרד. לפונקציית המהימנות יש את הצורה

P(t) = P 1 (t) ... P i ... P n (t). (3.72)

אם השבתת כל אנזים מתרחשת בקצב

P i (t) = e -λ i t , (3.73)

החלפה של משוואה (3.73) למשוואה (3.72) מובילה לפונקציה

זמן הריצה הממוצע ייראה כך

(3.75)

התרומה הגדולה ביותר לסכום (המכנה של משוואה זו) נעשית על ידי תהליכי האינאקטיבציה הקינטית המהירים ביותר, ולפיכך הזמן הממוצע של פעולה נטולת תקלות של מערכות פוליאנזים נקבע על ידי היציבות של החלבונים הכי לאביליים. אם בשרשרת האנזימים קיים חלבון לאבילי המושבת מהר יותר מחלבונים אחרים של המערכת הפולי-אנזימטית, ביטול ההפעלה של האנזים המסוים הזה יתבטא בקינטיקה של השבתת המערכת כולה.

הבה ניקח בחשבון מערכת של אנזימים הפועלים במקביל, המזרזים את אותה תגובה ומנטרלים בקצבים שונים. במקרה של מספר שרירותי של שברי אנזים שונים בפעילות וביציבות, ניתוח של פונקציית המהימנות המתאימה מוביל למשוואה

(3.76)

כאשר a j , λ j - פעילויות ראשוניות וקבועי קצב של אי הפעלה של כל חלק מהאנזים, בהתאמה; 0 הוא סכום הפעילויות הראשוניות או הפעילות הקטליטית הרשומה של המערכת ברגע הזמן הראשוני.

חשוב לציין שהזמן הממוצע של פעולה ללא תקלות של מערכת אנזימים הפועלת במקביל נקבע על ידי חלק האנזים הפעיל ביותר (הגדול a j) או היציב ביותר (הנמוך ביותר λ j). זה מבדיל את המערכת הזו ממערכת של זרזים הפועלים ברצף, שבה האמינות נקבעת על ידי החלבון הכי לאבילי.

לאנזימים המשולבים למערכות ומבצעים שרשרת של טרנספורמציות עוקבות של מצעים, במקרה הכללי, יש עמידות שונה להשפעות מנטרלות. בשל כך, בתהליך של נטרול המערכת הפוליאנזימטית, יכול להתרחש שינוי בשלב המגביל. תארו לעצמכם שהאנזים הפועל האיטי ביותר, שקצב התגובה איתו קובע את הפעילות של המערכת כולה, יציב מספיק. במקרה זה, אם אחד האנזימים בשרשרת מאבד במהירות את פעילותו, נוצר מצב שקצב התהליך נקבע לפי הפעילות של האנזים המסוים והלאבילי ביותר הזה. לפיכך, כשהמערכת הופכת ללא הפעלה, שלב הגבלת הקצב משתנה. זה אמור להשפיע על הקינטיקה של חוסר הפעלה.

שקול שרשרת פוליאנזימטית ליניארית. על פי הניתוח, בתנאים מסוימים, הקצב הנייח של התהליך הכולל n אנזימים מתואר על ידי המשוואה

(3.77)

כאשר [S] 0 - ריכוז ראשוני של המצע הראשון; υ i , K i - מהירות מרבית וקבוע מיכאליס של כל חלק בשרשרת. הבה נבחן את המקרה כאשר ישנם שני אנזימים בשרשרת שיש להם פרמטרים קינטיים מקסימליים ובהשוואה K i /υ i. אם הערך של הפרמטר K i /υ i עבור האנזימים הנותרים של השרשרת נמוך משמעותית מערכו של פרמטר זה עבור שני אנזימים, משוואת הקצב הנייח תהיה בצורה

(3.78)

כאשר המדדים i ו-j מאפיינים את הפרמטרים של כל אנזים.

הבה נניח שהשבתת שני האנזימים מתרחשת על פי חוק מעריכי, כלומר, כל אנזים מושבת עם שיעור כשל קבוע λ i ו- λ j . לפונקציית המהימנות יש את הצורה

(3.79)

כאשר A i = k cat, i 0 .

ההתנהגות הקינטית של המערכת בזמן השבתה נקבעת על ידי היחס בין הפרמטרים הקינטיים

(3.80)

וההבדל בשיעורי הכישלון של שני האנזימים. הבה נבחן את שלושת המקרים המיוחדים החשובים ביותר:

1. שיעורי הכשל של שני האנזימים בשרשרת שווים

λi = λj (3.81)

לפונקציית המהימנות יש את הצורה

P(t) = e -λ i t .(3.82)

הקינטיקה של התהליך נקבעת לפי שיעור הכשל של כל אחד מהאנזימים, ללא קשר לאיזה אנזים מגביל את קצב התגובה הפולי-אנזימטית. זהו המקרה הפשוט ביותר.

2. התהליך מוגבל על ידי אנזים j של השרשרת, אשר מושבת הרבה יותר מהר מהאחרים. זה עומד בתנאים

α = (A i /K i)/(A j /K j) >> 1; λi

פונקציית המהימנות ניתנת על ידי המשוואה

P(t) \u003d e -λ j t. (3.84)

הקינטיקה של אי הפעלה של המערכת היא אקספוננציאלית. האמינות וזמן הפעולה הממוצע של המערכת נקבעים לפי שיעור הכשל של האנזים מגביל הקצב.

תוצאות החיפוש

תוצאות נמצאו: 25841 (0.82 שניות)

גישה חופשית

גישה מוגבלת

חידוש הרישיון מצויין

1

מעכבי חלבון של אנזימים פרוטאוליטיים אבסטרקט DIS. ... רופאים למדעי הביולוגיה

מטרת עבודה זו היא לחקור את המנגנונים העדינים של תגובת מעכבי הפרוטאזות. חשוב ביותר הן מבחינה תיאורטית והן מבחינה מעשית לחקור את התפקודים הביולוגיים של מעכבי פרוטאוליזה, במיוחד בצמחים גבוהים יותר, וכן לחקור את האפשרויות של שימוש במעכבי חלבון מקובעים כחומרי ספיגה ביו-ספציפיים לבידוד של אנזימים פרוטאוליטיים ממגוון אובייקטים על ידי כרומטוגרפיה זיקה.

עם זאת, טיפול חוזר באנזים עם אנהידריד אצטי מביא לביטול מלא.<...>ערכם של שיירים היוצרים את המרכז הקטליטי של אנזימים.<...>אנזים חופשי 2. אנזים + תמצית 3. אנזים * pH 7.6 4.<...>תהליך הניהול או האחסון עלול: להוביל ליצירת צורות שונה של אנזימים או להשבתתם.<...>(Oteuka, Price, I974; Prlngle . . 1975) בפרקטיקה במעבדה: להשבית פרוטאזות קשורות

2

פפטידים והאינטראקציה שלהם עם AMINOACIL-RNA SYNTHETASES ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: אוניברסיטת מוסקבה על שם M. V. LOMONOSOV

מסקנות. 1. להידרוליזטים אנזימטיים של חלבונים שונים יש השפעה מעוררת על צמיחת המיקרואורגניזם Z. cassi. גודל האפקט המעורר תלוי הן בסוג החלבון והן באופי האנזים המבצע הידרוליזה.

התגובה ממשיכה לפי הסכימה הבאה. אנזים + AT9*I0OC-CH(III)-R ^ * אנזים -AMP-OS-CHM)-/?<...>JpH-5-enzyme j deucine/md 1 j לפני אינקובוס; לאחר in; הידרוליזה I !<...>זוגות T2 של אנזימים מפעילים.<...>/השפעת ריכוז המצע, אנזים, AT$ ו-Mch, ספציפיות המצע/.<...>"אופי הפפטידאזים הכלולים בתכשירים של אנזימים pH-5 מכבד חולדה".

3

בידוד ומאפיינים של ENDONUCLEASE מגבלה ספציפית לאתר מ-CYANOBACTERIA ב- NORM וב-VIRAL INFECTION ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מסדר לנין ומסדר החברות של העם האקדמיה למדעים של ה-SSR האוקראיני

מטרת עבודתנו הייתה לחקור כמה היבטים של האינטראקציה של הציאנופג' N-2 הארס עם תאים של הציאנובקטריה החוטית ההטרוציסטית Nortoclinckia, pcs. Rlenk 387/7. במקביל, תשומת הלב העיקרית ניתנה לחקר אנזימי הגבלה הנגרמות על ידי תאים ונגיפים והידרוליזה אנזימטית של DNA המארח במהלך הדבקה.

עם זאת, הבעיה של חיפוש אנזימים חדשים לא איבדה את הרלוונטיות שלה.<...>קבע את אתרי הזיהוי ונקודת החיתוך של אנזימי ההגבלה המטוהרים. ארבע.<...>הוקמו אתרי זיהוי, ולאנזים Nil 387/7 I, נקודת חיתוך.<...>ו-0.7-0.82 M NaCl עבור אנזים אחר.<...>"שיטות להכנה, ניתוח ושימוש באנזימים". Jurmala, 1990. S. 4 2. 5 . מלניק.א.י.

4

T-לימפוציטים בשיקום תפקוד רבייה בפרות לאחר המלטה אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מחקר מדעי ממלכתי כל-רוסי

מטרת עבודה זו הייתה לקבוע את קיומה האפשרי של פעילות אנטיבקטריאלית ישירה בלימפוציטים T של בקר כנגד פתוגנים חוץ-תאיים; מחקר על התפקיד המגן על מערכת החיסון של לימפוציטים T בשיקום תפקוד הרבייה בפרות לאחר ההמלטה, כמו גם בירור האפשרות להפחית את זמן ההחלמה של פונקציה זו על ידי הפעלת חסינות מקומית של רקמות הרחם.

מספר ההזרעה הראשונה 7 6% 50.0±13.3 40.1±12.6 ל-90 ימים. מספר 12 11% 85.8±9.3 73.3111.4 אינאקטיבציה<...>מספר ההזרעה הראשונה 23 16% 53.5±7.6 42.1±8.0 ל-90 ימים. מספר 39 23% 90.7±4.4* 71.1±7.4* ביטול

5

פיתוח שיטות חדשות לייצוב ובקרה של יינות ABSTRACT DIS. ... דוקטורים למדעים טכניים

מכון מחקר מדעי לייצור יין וגפנים "מגרך" מסדר העבודה האדום באנר של כל האיגוד

מַטָרָה. מבחינה מתודולוגית, הפתרון לבעיית ייצוב היין התבסס על גישה שיטתית להערכת פוטנציאל חוסר היציבות של יינות לסוגים מסוימים של עכירות וביטוים המורכב, ולאחר מכן פיתוח שיטות ייצוב יין חדשות ממאגר זה.

1967), ב-All-Union Sozetsanip על הביוסינתזה של אנזימים על ידי מיקרואורגניזמים והשימוש בהם בעם<...>כאשר תכולת הקאלים במדיום היא 20-30 מ"ג ליום, פעילות האנזים מופחתת בחצי.<...>אנזימים.<...>במהלך 21 יום של פעילות רציפה של הכור, פעילות האנזים ירדה בחצי.<...>כפי ש. 536192 (ברית המועצות) שיטת אימוביליזציה של אנזים (Pavlenko H.

6

B-GLUCOSIDASE פטריות GEETRIOHWIS CAADIDNE 3C ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: האקדמיה למדעים של ברית המועצות המסדר של לנין מכון לביוכימיה על שם א.נ. באך

מטרת המחקר ומטרותיו. מטרת עבודה זו הייתה לחקור צורות מרובות של b-glucosidase בתכשיר האנזים התעשייתי "Cellocandin I 10x", המתקבל מהתסנין של נוזל התרבות של פטריית התאית המתפרקת Geotrichura oandidum 3C.

מולקולת אנזים, הרכב מרכיב הפחמימה של המולקולה.<...>התשואה של האנזים הייתה כ-9% מבחינת פעילות ו-0.13? לפי חלבון.<...>האנזים המבודד הוא צופן /3-gdg.osidazo£: האנזים לא ניתק את הפוליסכריד (arabogdEzuroEoxylan<...>Vtsroo Bseseyazn. com. lo אנזימים גקרואורגניזמים. מינסק, 1978, אוקטובר, תקציר. דוח, עמ'. 76.4.<...>"שיטות להשגת אנזימים מטוהרים מאוד". - וילנה, 1973, בוהן. דוקל, עמ' 94-95. 5.

7

יעילות השימוש באינדיקטורים ביוכימיים של דם בהערכת איכויות הרבייה של RAM מ-KARAKUL BREED ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעי החקלאות

מכון המחקר המדעי של כל האיגוד לגידול בעלי חיים

מטרת מחקר זה היא לפתח שיטה מבוססת מדעית להערכת איכות הצאצאים של כבשי קרקול על ידי בחירת בעלי חיים בהתאם לאישיותם הביוכימית.

לפני קביעת פעילות האנזימים<...>מתוכם, 6 ראשים בעלי פעילות גבוהה של האנזים אספרטאט aminotransferase, 6 ראשים עם בינוני ו-6 ראשים.<...>פעילותם של אנזימי דם האיל הייתה תלויה גם בגיל המפהקים.<...>פעילות אנזים<...>סימני טרייר להתפתחות כבשי קרקול, אשר ניתן לייחס לאינטיקנסג של אנזימים אספרטאט

8

תאימות של הגנומים של כמה סוגים של חיטה טטרפלואיד וטקספלואיד עם הציטופלזמה של T. T. TIMOPHEEVI ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: צו מוסקבה של לנין ומסדר העבודה האקדמיה החקלאית האדום באנר על שם ק.א. טימירייזב

מטרות: 1. לחקור את התאימות של הגנום של כמה מינים של חיטה הקספלואידית וטטרפלואידית עם הציטופלזמה של T. timopheevi ובמקביל לנסות לבודד את השפעת האינטראקציות של הגנום עצמם; 2. לחקור מיוזה ומיקרו-ספורוגנזה בצורות פוריות ובצורות המתקבלות מהצלבה; תצוגת קו X של CMS. 3. בצעו מחקר ציטוכימי של איברים יצירתיים של צורות פוריות והאנלוגים הסטריליים שלהם (במקרה של השפעת העיקור של הציטופלזמה T. timopheevi) בכמה מיני חיטה.

1.0 1.5 2.0 1.0. 1.5 1.2 1.1 זכויות יוצרים JSC "Central Design Bureau "BIBCOM" & LLC "Agency Book-Service" פעילות אנזים<...>אנזימים.<...>אנזימים.<...>פעילות האנזים נקבעה באבקה, בשחלה ובסטיגמה. פרוקסידאז.<...>ירידה בתכולת מספר חומרים ואנזימים בשחלות ובסטיגמות של הבודים של צורות סטריליות של חיטה היא

9

נתונים השוואתיים על הפעילות של כמה אנזימים גליקוליטיים בזרע שור וחזיר אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

LVIV מכון זוווטרינרי

מאמר זה מציג את התוצאות של מחקר השוואתי של פעילות אדנוזין טריפוספטאז, פוספוהקסואיזומראז, פוספוגלוקומוטאז, אלדולאז ופרוקטוז-1,6-דיפוספטאז בזרע בקר וחזירים, וכן את ההשפעה של אופן הניצול המיני של יצרנים. פעילות האנזימים שנחקרו.

גם התפלגות האנזימים בין תאי נבט לפלסמה אינה זהה.<...>אנזים זה נמצא בזרע בשני מיני בעלי החיים.<...>(P של האנזים ירד.<...>התוכן הגבוה של האנזים ATP-ase ב-10.<...>השפעת האינסולין על פעילותם של כמה אנזימים בזרע שור.

10

זיהוי וכמה תכונות של הקומפלקס הפרוטאוליטי של ACTINOMYCETES ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מטרות עבודה. עבודה זו מוקדשת לחקר כמה תכונות של המכלול הפרוטאוליטי של אקטינומיציטים

.; :," אנזימים אלו ממלאים את התפקיד הרגולטורי החשוב ביותר בתיאום מחזור הדם (סינתזה של פירוק £r=5<...>";. "מקורות האנזימים הם ""v7;>^ ".;"." -" .<...>טיהור ראשוני של מתחם האנזים לבישול החלב בוצע על פי השיטה המקובלת<...>ערך ה-pH האופטימלי לביטוי של ".-.: פעילות האנזים..." "" """.<...>לסדנאות אקטינומיה, כמו אנזימים דומים של מיקרואורגניזמים אחרים, היו מרווחים רחבים יותר

11

הפעילות הביולוגית של קרקעות סודי-פודזוליות ושינוייה בהשפעת תערובות כבול-מינרלי אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעי החקלאות

האקדמיה החקלאית באקדמיה החקלאית באדום האדום של צו העבודה בלארוס

פעילות ביולוגית של קרקעות סודי-פודזוליות ושינוייה בהשפעת תערובות כבול-מינרליות

התלות של פעילות אנזימי הקרקע בתנאי הסביבה פעילות האנזימים תלויה במספר גורמים<...>בכך מתבטאת אחת התכונות האופייניות של אנזימים, לאיכות.<...>עם זאת, אם עבור אנזימים של האורגניזם התלות הללו הובהרו לחלוטין, אז עבור אנזימי קרקע<...>לתנאי הסביבה השפעה משמעותית על פעילות האנזימים בקרקע.<...>להיפך, ירידה בלחות הקרקע מביאה לירידה בפעילות האנזימים שלה.

12

ביסוס פיזיולוגי של השילוב של דישון פולי של צמחים חקלאיים עם עישוב כימי שלהם (לפי דוגמה של תירס ודוחן) אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

עשינו ניסיון לחקור את הבסיס הפיזיולוגי של השילוב של האכלת עלים של צמחים חקלאיים עם העשבים הכימיים שלהם בקשר הדוק עם נושאי ביוכימיה, ביופיזיקה וייצור יבולים. עבודת גמר זו מוקדשת לתיאוריה ולפרקטיקה של שימוש משותף במינרלים (דשנים וקוטלי עשבים בגידולי תירס ודוחן.

13.9 14.8 100 135.1 143.3 152.6 ניסויים הראו גם עלייה בפעילות של אנזימי נשימה אחרים<...>בניסויים שלנו, עוצמת הנשימה התאימה, ככלל, לפעילותם של אנזימים חמצוניים<...>בעתיד, פעילותם של אנזימים אלו עולה: הוספת דשן חנקן לתמיסת קוטל העשבים<...>מרכך את ההשפעה ההתחלתית של חומצה 2,4-דיכלורופנוקסיאצטית על פעילותם של אנזימים חמצוניים<...>צמחים: "חילופי מים, פוטוסינתזה, סינתזה של פיטוכרומים, נשימה ופעילות של כמה אנזימים חמצוניים

13

כמה אינדיקטורים לחילוף חומרים של פחמימות בסנטרים בהתאם לגיל ולמצב הפיזיולוגי של אבסטרקט האורגניזם DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

המכון הזווטרינרי של חרקוב

מאמר זה מציג את התוצאות של מחקרים על כמה היבטים של חילוף חומרים של פחמימות בתרנגולות לבנות רוסיות בסוף העובר ובמהלך תקופה ארוכה יחסית של האנטוגנזה לאחר הלידה שלהן.

דינמיקת גיל של התוכן, מטבוליטי הפחמימות העיקריים ופעילות אנזימי הפחמימות<...>חילופי הפחמימות באבידוקט, כמו גם הפעילות של האנזימים המתאימים ב<...>פעילות האנזים התבטאה כמיקרוגרם של זרחן לכל 100 מ"ג של רקמה.<...>לפיכך, במהלך תקופת העובר, פעילות האנזים נמוכה יחסית.<...>זה ידוע. שהאנזים הזה גם ממלא תפקיד בסינתזה של גליקוגן./. .

14

שיטות של חיסון כימי של טבק ל-Black Root ROT ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

המוסד החקלאי של פקודת העבודה של חרקיב באדום אדום על שם V. V. DOKUCHAEV

שיטות של חיסון כימי של טבק לריקבון שורש שחור

טיפול לפני זריעה מפעיל אנזימים VV בצמחים, "אשר" משפיע באופן חיובי על "הקורס<...>כאשר מושפעים מריקבון שורש שחור, חל שינוי בפעילות של אנזימי הנשימה בצמחים.

15

GLYCOGENPHOSPHORILASE של שריר ארנבת - מבנה רבעוני ומאפיינים רגולטוריים תקציר DIS. ... רופאים למדעי הביולוגיה

מ.: מסדר מכון לנין לביוכימיה על שם א.נ. באך

במחקר הנוכחי, המשימות העיקריות הוגדרו כדלקמן. 1. לימוד התנאים לניתוק של פוספורילאזות B ו-A משרירי ארנבת לתתי יחידות על מנת לקבל מידע נוסף על המבנה הרבעוני של האנזים, תכונות תת-היחידות ואופי הקשרים ביניהן. 2. בירור סוגיית השתתפותו של פירידוקסל-5-פוספט בשמירה על המבנה הרבעוני של פוספורילאז.

פוספורילאז שייך לקבוצת האנזימים הרגולטוריים בעלי "... מבנה רבעוני.<...>ניתן להסביר זאת על ידי ההשפעה הספציפית של ציסטאין על מבנה האנזים.<...>הסוג השלישי של השכבות נצפה בעיקר על תכשירי נרות של האנזים.<...>פעילות אופטית מושרה של כמה אנזימים פירידוקסלים.<...>שינוי כימי של אנזימים כאחת הדרכים לווסת את פעילותם.

16

נעשה מחקר על הקינטיקה של אי-אקטיבציה תרמית של גלוטתיון פרוקסידאז מסוג I, אנזים הממלא תפקיד מפתח במערכת ההגנה נוגדת החמצון של הגוף. הוכח שבטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס אוליגומרי גלוטתיון פרוקסידאז מושבת על ידי מנגנון מונומולקולרי. הוצעה שיטה יעילה לייצוב האנזים באמצעות פוליאלקטרוליטים בעלי אופי שונה.

בערך ה-pH הזה נחקרו הדפוסים הקינטיים של השבתת האנזים, אשר<...> <...>נמצא כי בנוכחות עודפים של פי 1, 10 ו-100 של הפולימרים הנ"ל, נטרול אנזימים<...> <...>

17

מחקר של מנגנון השבתה פוטודינמית של אנזימים אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מטרת מחקר זה הייתה לאמת הנחה זו באופן ניסיוני, להוכיח את קיומו של נזק נסתר למצע החלבון במהלך PDE, לחקור את טיבם ותרומתם לנזק הכולל, וכן לחקור את היעילות של נזק פוטודינמי לחלבונים ( תשואה קוונטית), בעיה שעדיין לא פותחה מעשית חשובה בכל זאת. כדי להבהיר הן את מנגנון התגובה הפוטודינמית של התא והן את התכונות המבניות של מצע החלבון

<...>KONDAKOVA מחקר של מנגנון השבתה פוטודינמית של אנזימים תקציר של עבודת הגמר<...>הארה של תמיסות מיוזין עם מתילן כחול באוויר מובילה להשבתת אנזימים על פי החוק<...>שיקום הצבע מלווה בהשבתה חלקית של האנזים ("השפעת חמצן") ב<...>לצורך כך, חקרנו את התלות של נטרול אנזימים בטווח רחב של ריכוזים שלהם:

18

מחקר של מנגנון השבתת קרינה של אנזימים ABSTRACT DIS. ... רופאים למדעי הביולוגיה

מוסקבה: המכון לפיזיקה ביולוגית של האקדמיה למדעים של ברית המועצות

מתוך השוואה וניתוח התוצאות המוצגות בעבודת הגמר, התהליך הדו-שלבי של נטרול קרינה של אנזימים מוצג באופן הבא (פרק 13). בשלב הראשון של האינאקטיבציה, המטען האלקטרוני מופץ מחדש במולקולת החלבון עם היווצרות ולוקליזציה של פנוי אלקטרוני.

E AND D U S לימוד המנגנון של נטרול קרינה של אנזים תקציר של עבודת הגמר לתחרות המדעית<...>E Y D U S מחקר של מנגנון השבתת קרינה של אנזימים תקציר של עבודת הגמר לתחרות מדעית<...>לפיכך, להשבתת אנזימים תחת פעולה "עקיפה" ו"ישירה" של קרינה<...>(נזק נסתר במהלך נטרול קרינה של אנזימים).<...>השתתפות חמצן בהשבתת קרינה של אנזימים יבשים. רדיוביולוגיה. 4, 44. Eidus L. X. 1964.

19

סיכום. עמידות לאנטיביוטיקה בקרב מיקרואורגניזמים ממשפחת ה-Enterobacteriaceae נובעת משילוב של מספר מנגנונים, למשל, ייצור יתר של בטא-לקטמאסות, ירידה בחדירות של הממברנה החיצונית של התא המיקרוביאלי (בדרך כלל עקב אובדן חלבוני פורין), ונוכחות של מערכת ספיגה. Metallo-beta-lactamases (MBLs) ראויים לתשומת לב מיוחדת, שנוכחותם גורמת לעמידותם של מיקרואורגניזמים גרם שליליים לכל האנטיביוטיקה של בטא-לקטם (במקרים מסוימים, למעט אזטריונם). נכון לעכשיו, אין מעכבי MBL של מיקרואורגניזמים עמידים לקרבפנם המאושרים לשימוש קליני. החיפוש אחר מעכבי MBL יעילים של מיקרואורגניזמים עמידים לקרבפנם, המאושרים לשימוש קליני ומשפרים את פעולת הקרבפנמים, שימשו כבסיס למחקר זה. העבודה בוצעה ב-3 שלבים: 1) יצירת מערכת מודל באמצעות ריאגנט סטנדרטי של האנזים P. aeruginosa metallo-beta-lactamase רקומביננטי, המתבטא ב-E. coli, כדי להעריך את העלייה בריכוזי המעכבים המינימליים (MICs) ) של קרבפנמים ביחס לזנים גרם שליליים שהיו רגישים אליהם בעבר. מיקרואורגניזמים במבחנה; 2) הערכת היעילות של מעכבי MBL מבטיחים בנוכחות אותו מגיב אנזים סטנדרטי; 3) הערכת יכולתם של המעכבים שזוהו להגביר את ההשפעה של קרבפנמים כנגד בידודים קליניים של מיקרואורגניזמים גרם שליליים המייצרים MBL, במונחים של MIC ומדד ריכוז מעכב חלקי (FIC). שיטת הדמקה הסטנדרטית שונתה כדי להעריך את השימוש המשולב באנטיביוטיקה של קרבפנם ובמעכב MBL פוטנציאלי, תרופת ביספוספונט, חומצה אטידרונית. באמצעות ריאגנט סטנדרטי לאנזים P. aeruginosa metallo-beta-lactamase הרקומביננטי המתבטא ב-E. coli, יצרנו מערכת מודל המאפשרת לנו להעריך את הסיכויים של מעכבי MBL חדשים של מיקרואורגניזמים גרם שליליים. השפעה תלוית מינון של עלייה ברמת ה-MIC של meropenem על כמות מגיב ה-MBL במערכת המודל התגלתה ביחס לזני ייחוס של מיקרואורגניזמים שהיו רגישים בעבר לאנטיביוטיקה. נצפתה נטרול של האנזים MBL אפילו במינונים נמוכים של ביספוספונט; המחקרים הראו עיכוב בהופעת שלב הצמיחה הלוגריתמי של תרבית הבדיקה P. aeruginosa ATCC 27853 עד 12 שעות בהשוואה לביקורת. במקביל, המינונים המקסימליים של חומצה אטידרונית 50,000-100,000 מיקרוגרם/מ"ל עיכבו לחלוטין את MBL, והעדר שלב גדילה מיקרוביאלי לוגריתמי נצפה עקב פעולת המרופנם ברמת ערך הרגישות הייחוס (2 מיקרוגרם/ מ"ל). נחשף אפקט סינרגטי (מדד FIK

נטרול של האנזים MBL צוין אפילו עם מינונים נמוכים של ביספוספונט, מחקרים הראו עיכוב<...>החל מהשורה הרביעית ירדה עוצמת האינאקטיבציה על ידי האנזים, ובשורה ה-8 היעדר<...>החל מהשורה החמישית ירדה עוצמת השבתת האנזים, ובשורה ה-8 צוין היעדר צמיחה<...>בתאים ללא חומצה אטידרונית, צמיחת זן הבדיקה נצפתה עקב השבתת האנטיביוטיקה על ידי האנזים<...>השבתת האנזים MBL התגלתה אפילו במינונים קטנים של ביספוספונט.

20

נבט זרעי חיטה ליפאז: השגת הכנה, מאפיינים, הסדרת פעילות תקציר DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

אוניברסיטת וורונז'

מטרת עבודת הדוקטורט הייתה להשיג ליפאז נבט חיטה במצב הומוגני, ללמוד את המאפיינים הפיזיקליים-כימיים שלו, לווסת את הפעילות וכן לפתח ולהצדיק אופנים רציונליים של אחסון ושימוש בנבט חיטה בתעשיית המזון, תוך התחשבות בקטליטי. תכונות של ליפאז.

קביעת פעילות האנזים.<...>אי-אקטיבציה של חומצה ותרמית נחקרו בטווח של pH 4-8.5 וטמפרטורות של 20-60 מעלות צלזיוס.<...>הגדלת הטמפרטורה ל-60 מעלות צלזיוס הובילה להשבתה חדה יותר של האנזים: לאחר 1 שעה של דגירה בשעה<...>חקר הקינטיקה של השבתת חומצה אפשרה לחשב את קבועי הקצב של אי הפעלה במחקר הנחקר<...>על איור. 3 מראה חלקות Arrhenius המציגות אי-אקטיבציה תרמית של ליפאז.

21

הפעילות הליפוליטית של תרופות לציפוי חלב ותפקידה ביצירת האיכות של CHEESE ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים טכניים

המכון הטכנולוגי לנינגרד לתעשיית הקירור

חידוש מדעי של העבודה. לראשונה פותחה מערכת קריטריונים להערכת התאמתם של תכשירי קרישת חלב לייצור גבינות על סמך תכונותיהם הליפוליטיות (AS מס' 1040702 ברית המועצות). פעילות הליפאז של תכשירים ממקורות שונים והתלות שלו ב-pH ובטמפרטורה נחקרה. נחקרה הקינטיקה של אי הפעלה של קרישה ופעילות ליפוליטית בתרופות מסוימות תחת השפעת טמפרטורה והקרנה אולטרה סגולה. הספציפיות של ליפאזות של תכשירים לקרישת חלב נקבעה. נחשף הקשר בין מדדי הליפוליזה לאיכות הגבינות.

הקינטיקה של אי-אקטיבציה של קרישה ופעילויות אינ-פוליטיות בתרופות מסוימות תחת<...>קינטיקה של אינאקטיבציה - על ידי מדידת הפעילות השיורית של אנזימים (I.B. Berezin, L.L.<...>קומפלקס) ואי-אקטיבציה תרמית משופרת של האנזים בטמפרטורות גבוהות מספיק.<...>האם השבתת אנזימים תחת פעולת הקרנת UV (טבלה 4).<...>לא זוהה אי הפעלה בולטת של אנזימים ליפוליטים על ידי קרינה אולטרה סגולה.

22

חקירת תפקידו של גורם הקונפורמציה בפוטואינאקטיבציה של חלבונים אבסטרקט דיס. ... מועמד למדעים ביולוגיים

המכון לבוטניקה נסיונית של האקדמיה למדעים של הבש"ר

מטרת עבודה זו הייתה 1) מחקר שיטתי של הקשר בין המצב הקונפורמטיבי של מולקולות חלבון לבין רמת הרגישות שלהן לאור; 2) אימות ניסיוני של האפשרות להשתמש באנרגיית עירור אלקטרונית לפוטו-אינאקטיבציה של חלבונים, אשר מושבתת לאורך נתיב לא קרינה.

ככלל, התשואה הקוונטית של אי הפעלה של החלבונים שנחקרו ירדה כאשר נוספו מלחים.<...>מחברים רבים מציינים את היציבות המוגברת של אנזימים בהרכב מתחמי האנזים-סובסטרט על פי<...>אינאקטיבציה על רקע הגנה והפעלה.<...>השבתת Y-6 באה לידי ביטוי רק במינונים משמעותיים למדי של Y-light.<...>על ההשפעה המגנה של מצע על ביטול אולטרה סגול של אנזימים מסוימים.

23

מוצע ביו-קטליזטור הטרוגני המבוסס על אינולינאז המשוקע על חומר סופג לא יוניוני Styrosorb. בוצעה השבתה תרמית וחומצה של אינולינאז חופשי ומקובע. הערכים התואמים של קבועי חוסר ההפעלה חושבו. התגלתה עלייה ביציבות התרמית של האנזים המשוקע בהשוואה לחופשי. בשיטה של ​​ספקטרוסקופיה IR, נשקלה השפעת אי-אקטיבציה תרמית על מבנה האנזים.

השבתה תרמית וחומצה של אנזימים מקומיים ומקובעים בוצעה על ידי תרמוסטט<...>איור 1 מציג את הדינמיקה של תהליך השבתת אנזימים חופשיים ומשוממים בטמפרטורות<...>אי הפעלה של אנזימים ברוב המקרים היא תגובה מסדר ראשון ומתוארת על ידי המשוואה<...>עבור האנזים המשובש, נרשמה ירידה בקבוע האינאקטיבציה בהשוואה לאנזים המקומי.<...>הספקטרוגרמות של האנזים במהלך השבתה (70 מעלות צלזיוס) למשך 30 דקות הראו עלייה משמעותית ב

24

מס' 3 [עלון אוניברסיטת מוסקבה. סדרה 2. כימיה, 2014]

כתב העת מפרסם מאמרים הן של סגל האוניברסיטה והן של מחברים מארגונים אחרים ברוסיה וברחבי העולם. נושאי הפרסומים מכסים את כל ענפי הכימיה.

בהתבסס על הנתונים על מנגנון השבתת האנזים, פותחו קומפוזיציות מחומרי שטח לא-יוניים.<...>בהתבסס על הנתונים על מנגנון השבתת האנזים האנטי-סטפילוקוקלי LysK, גישות ל<...>ת' 55. מס' 3 שממנו ברור שהאי-אקטיבציה של האנזים מתנהלת בסדר ראשון עם קבוע ה-inactivation<...>הערכים של קבועי האינאקטיבציה עולים באופן משמעותי עם הגדלת היחסים המולאריים של PLPEG: אנזים<...>הערך של קבוע אינאקטיבציה של האנזים בנוכחות חומצה פוליאקרילית יורד בערך

25

התפקיד של קבוצת האימידאזול של היסטידין, קבוצות ה-w-carboxyl של חומצות אספרטיות וגלוטמיות וקבוצות הסולפהדריל של ציסטאין בהידרוליזה של טריגליצרידים נחשף באמצעות שיטות דיקסון ושינוי כימי. הוכח כי אתילנדיאמין-טטראאצטט הוא מעכב ליפאז לא תחרותי

כחול אמור להוביל להשבתת אנזימים, מה שנצפה בניסויים שלנו.<...>טיפול בליפאז עם dithionitrobenzene מוביל לשינוי של קבוצות ה-SH של האנזים והשבתתו.<...>חסימה של קבוצות SH עם p-chloromercuribenzoate הביאה לביטול חלקי של ליפאז.<...>אי הפעלה חלקית של האנזים עם חסימת קבוצות sulfhydryl מעידה על תרומתם ל<...>תפקידן של קבוצות פונקציונליות חלבון באנזימים // אנזימים. מ.: מדע. 1964, עמ' 101–118.

26

האינאקטיבציה התרמית של גלוקואמילאז נחקרה בשיטה הספקטרופוטומטרית, אנליזה תרמית דיפרנציאלית (DTA) וכו'. היציבות התרמית של אנזים זה הוצגה בטווח טמפרטורות רחב. נוכחות של מבנה רבעוני של גלוקואמילאז, המיוצג על ידי שתי יחידות משנה, אושרה

חקירה של תהליך השבתה תרמית של GLUCOAMILASE VESTNIK VSU.<...>סדרה כימיה, ביולוגיה, רוקחות 2003. מס' 1. עמ'. 57 – 60 UDC 577.154.31 מחקר של תהליך השבתה תרמית<...>חקרנו את ההשבתה התרמית של גלוקואמילאז בטמפרטורות של 50, 60, 70 0C.<...>קצב השבתת האנזים בתמיסה עולה במהירות עם עליית הטמפרטורה מ-500 מעלות צלזיוס ל-700 מעלות צלזיוס.<...>נתונים אלה מצביעים על כך שהשבתה תרמית של גלוקואמילאז היא תופעה אופיינית

27

השפעת ההחלפה של שאריות מט בשאריות ליאו על המאפיינים הקטליטיים, החמצון ויציבות הטמפרטורה של שמרים D-AMINO AID OXIDASE [משאב אלקטרוני] / Atroshenko [וחב'] Bulletin Moscow University. סדרה 2. כימיה.- 2016 .- מס' 4 .- עמ' 47-57 .- מצב גישה: https://site/efd/373180

היציבות החמצונית של אנזימים נקבעת בעיקר על ידי שיירי Cys ו-Met. במקרה של חומצת אמינו אוקסידאז D (DAAO, EC 1.4.3.3) מהשמרים Trigonopsis variabilis (TvDAAO), שלושה מוטינים התקבלו על ידי מוטגנזה מכוונת-אתר עם החלפות נקודתיות של שארית Met עבור שארית Leu. בחירת העמדות להכנסת ההחלפה נעשתה על בסיס יישור מרובה של רצפי חומצות אמינו DAAO ממקורות שונים, כמו גם ניתוח של המבנה התלת מימדי של TvDAAO. עבור המוטנטים שהתקבלו, נחקרו התכונות הקטליטיות, כמו גם הטמפרטורה והיציבות החמצונית. בכל המקרים, ההחלפה הובילה לשינוי בפרופיל סגוליות המצע של האנזימים המוטנטים. ישנה עלייה ניכרת בקבועי Michaelis עבור מצעים קטנים וירידה ב-KM עבור חומצות אמינו D עם רדיקל צדדי מגושם. אחד התחליפים הוכח כמגביר את יציבות הטמפרטורה של TvDAAO בפקטור של 2-3 בהשוואה לאנזים הפראי. פותח נוהל לקביעת היציבות של TvDAAO לפעולת מי חמצן. נחקרה היציבות החמצונית של האנזים הבר וה-TvDAAOs המוטנטיים שהתקבלו. נמצא שבכל המקרים החלפה של שארית Met בשארית Leu השפיעה מעט על היציבות החמצונית של האנזים.

ביטול ההפעלה של TvDAAO מוטנטי ואנזים פרא בנוכחות מי חמצן נחקרה ב-0.05 M<...>שתי פונקציות אקספוננציאליות, וקצב השבתת האנזים תלוי בריכוזו

המגזין המדעי-טכני והמידע-אנליטי היחיד ברוסיה ובמדינות חבר העמים על התפתחויות מדעיות וטכניות בכל תחומי הקירור, ציוד וטכנולוגיה קריוגני, מיזוג אוויר ואוורור, אוטומציה ובקרה, הובלה בקירור, תהליכי ייצור ומכשור של מזון , חומרי עבודה, בעיות של אקולוגיה וחיסכון באנרגיה. במשך יותר מ-100 שנים, כתב העת מהווה את המקור העיקרי למידע על עבודתם היסודית והיישומית של מדענים מובילים מבית וחוץ, וכן פרסום לפרסום תוצאות עבודת גמר לתואר מועמד ודוקטור למדעים. כתב העת נכלל במסד הנתונים הבינלאומי של אבסטרקטים Agris, הרשום במדד הציטוט המדע הרוסי (RSCI).

מילות מפתח: טיפול במיקרוגל, השבתת פרוקסידאז ואוקסידאז, תפוחי אדמה טריים חתוכים, מצבים<...>במקרה זה, רצוי להגדיר את הזמן האופטימלי לעיבוד שדה המיקרוגל כך שתהליך האינאקטיבציה<...>אנזימים לא הובילו לריכוך יתר של הבד של המוצר.<...>השבתת פרוקסידאז על פני השטח ובתוך החלקים התרחשה רק לאחר 3 דקות (איור 3, D), עם<...>לפיכך, על פי תוצאות מחקרים של נטרול אנזימים ומיקרואורגניזמים על ידי המשטר האופטימלי

32

"בעיה של" "זיהוי"": סינתטאות AMINOACIL-tRNA והאינטראקציה שלהן עם tRNA" אבסטרקט DIS. ... רופאים למדעי הביולוגיה

מ.: מסדר מכון לנין לביוכימיה על שם א.נ.באך מהאקדמיה למדעים של ברית המועצות

מסקנות עיקריות 1. נקודת המוצא למחקר הניסיוני של בעיית ההכרה היא פיתוח יסודות מתודולוגיים לחקר סינתזות aminoacyl-tRNA ו-tRNA.

טבלה השפעת, של מצעים על קצב הטריו והפוטו, אי-אקטיבציה של APCases מהכבד של חולדות, אינאקטיבציה תרמית<...>עם זאת, כאשר הם נוכחים יחד, בתנאים שבהם נוצר va .... liladunilag, "השבתת אנזים<...>השיפור של "אי-אקטיבציה" שנצפה בנוכחות "!<...>השפעת tRNA על סינתזה פוטוכימית של APCae f מכבד חולדה. אינאקטיבציה בהיעדר tRNA<...>: בהתאם לאופי המצע ו-ARSase, עלייה באינאקטיבציה, אפקט מגן או

33

הוראות כלליות אי ספיקת לבלב אקסוקרינית (PZH) נמצאת לעתים קרובות בתרגול של רופא, הן מטפל והן רופא ילדים. סיווג לפי מוצא: ראשוני (מולדת), משני (נרכש). לפי המנגנון: מוחלט ויחסי. אי ספיקת לבלב אקסוקרינית ראשונית (מולדת) נוצרת בתקופה שלפני הלידה ונגרמת על ידי הפרות של עובריות ו/או פגמים גנטיים. EPI משני (נרכש) קשור למחלות המתפתחות בתקופה שלאחר הלידה.

34

ביוסינתזה ומאפיינים של GLUCOAMILASE ASPERGILUFS AWAMORI ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: מסדר מכון לנין לביוכימיה על שם א.נ.באך מהאקדמיה למדעים של ברית המועצות

מסקנות 1. מבין המספר הגדול של זנים של הפטריות שנחקרו, לפטריית ASPERGILUFS AWAMORI, איתה בוצעה עבודה זו, יש יכולת גבוהה ליצור גלוקואמילאז. הפעילות של אנזימים עמילוליטים בתרבית שקועה בפיספ נקבעה. אנון בגילאים שונים. במקביל, נמצא כי על מצע עם נתרן חנקתי, היווצרות גלוקואמילאז מגיעה למקסימום בתרבית של 5 ימים בטיפוח הפטרייה בתנאי מעבדה, בצלוחיות על שייקר ובתרבית של 3 ימים - כאשר מטפחים בתסיסים.

השבתה של c-עמילאז וגליקוסילטרנספראז כדי לבודד תכשיר גלוקואמילאז מטוהר מאוד<...>שימוש בעמידות לגלוקואמילאז #sp. awna-t במדיום חומצי ואי-אקטיבציה מוחלטת של *-עמילאז ב<...>להשבתה מוחלטת של גליקוזילטרנספראז, Solea דרשה הזדקנות ממושכת למשך 24 שעות לפחות.<...>פותחה שיטה להשבתת גלוקוזילטרנספראז ו-c-עמילאז בתסנין תרבית אספרגילוס<...>טרנסגליקוזילאז שנוצר בתרבית העומק של הפטרייה מס' ab/olup ושיטות להשבתתה.

35

חלבוני הלבלב והמעכבים שלהם (לומד את האינטראקציה של חלבונים עם מעכבי דם. מחקרים ביוכימיים של מנגנון הפעולה האנטי-דלקתית. שימוש בקליניקה) אבסטרקט DIS. ... רופאים למדעי הביולוגיה

האקדמיה למדעים של ה-SSR האוקראיני

1. בהתבסס על הסכימה הקלאסית לבידוד פרוטאינזים, לפתח שיטה להשגת תכשירים רפואיים של טריפסין גבישי וכימוטריפסין לזריקות תוך שריריות ולתת להם הערכה פיזיקוכימית ותרופתית. 2. בניסוי בבעלי חיים, לחקור את הפעולה האנטי-דלקתית, בפרט אנטי-בצקתית, של טריפסין איכנמוטריסין במתן פרנטרלי, וכן נושאים הקשורים להבהרת כמה היבטים של מנגנון הפעולה הזו.

הוכח כי אי-אקטיבציה של טריפסין על ידי סרום מתרחשת במהירות ובדרך כלל מתבצעת לחלוטין.<...>כפי שהתברר, טריפסין מוגן מפני השבתה ספונטנית על ידי מעכב סרום.<...>לא ניתן לייחס זאת להשבתה ספונטנית של האנזים; זה כנראה מתעכב על ידי הרקמות.<...>מעכב II גורם לנטרול כללי של האנזים.<...>בעיקר עם מעכב II, השולט באופן כמותי על מעכב I וגורם לאי-אקטיבציה כללית

36

מאפיינים של AMINOATION-RNA-SYNTHETASES הקיימים בשברי PH5-Enzyme E. COLI B. ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מוסקבה: המכון לכימיה ביולוגית ורפואית, האקדמיה למדעי הרפואה של ברית המועצות

מאפיינים של סינתטזות AMINOACIN-RNA הקיימות בשברי האנזים PH5 של E. COLI B.

התברר שהזמן הנדרש להשבתה תרמית של האנזימים המפעילים שנחקרו ב-50 פאונד,<...>זמן ההשבתה התרמית ל-50 פאונד של tyrosyl-RNA synthetase היה 30 שניות.<...>שהירידה בפעילות באזור החומצי (לפי יחס x pH אופטימלי) נגרמת על ידי חוסר הפעלה בלתי הפיך<...>יציבות שונה של סינתזות amineacyl-GNA במהלך הדגירה של תכשיר האנזים ב-20°. 1" השבתה תרמית<...>ירידה בפעילות כאשר ה-pH מועבר לחומצי, ביחס ל-pH האופטימלי, האזור נובע מחוסר הפעלה בלתי הפיך

37

לימוד התלות בין שינויים פיסיקו-כימיים של חלבוני אנזים מקוריים לבין הפעילות הקטליטית שלהם אבסטרקט DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

המכון לביוכימיה כ-UkrSSR

מסקנות 1. נוכחות אוריאה בתערובת הדגירה בריכוז של עד 0.166 M אינה משפיעה על פעילות האלדולאז. עלייה בתכולתו גורמת לירידה בפעילות האנזים, התלויה ישירות בריכוז האוריאה. 2. הפעילות של אלדולאז, השמור בתמיסת אוריאה של 0.5 M למשך שעה, עולה ב-14.2% ...

נשאלת השאלה: האם מתרחשת כאן השבתה חלקית בלתי הפיכה של אנזימים, או שהיא מתרחשת רק<...>אוריאה לריכוז של 1 M, אנו מאמינים שבתמיסה מימית מתרחשת לא דנטורציה של האנזים, אלא אי-אקטיבציה<...>ניתן להניח ששילוב זה של מולקולות לקומפלקסים מגן על האנזים מפני חוסר הפעלה בלתי הפיך.<...>היווצרות של אגרגטים, מתרחשת נטרול בלתי הפיך של glycerophosphate dehydrogenase, הקשורה<...>תכונות אנזימטיות ופיזיקוכימיות.

38

יסודות הכימיה והטכנולוגיה לייצור ועיבוד שומנים. חלק 1. טכנולוגיה להשגת שמנים צמחיים

האוניברסיטה הממלכתית של איבנובו לטכנולוגיה כימית

חוברת ההדרכה מתארת ​​את פעולות ההכנה לאחסון ועיבוד חומרי גלם של זרעי שמן, פעולות טכנולוגיות להכנת זרעים להפקת שמן, מתווה את היסודות התיאורטיים והטכנולוגיים להשגת שמנים צמחיים בשיטות כבישה והפקה, ומתחשבת בסוגיות של טיהור ראשוני של השמן המופק. מיועד לתלמידי התמחות 260401 טכנולוגיה של שומנים, שמנים אתריים ומוצרי בישום וקוסמטיקה.

התנאים צריכים להבטיח את המינימום דנטורציה של חלבונים והשבתת אנזימים, ניקוי רעלים של עוגות<...>הוא מכיל את כל סט האנזימים האופייניים לזרע חי.<...>במקרה זה, האנזימים מקבוצת הפוספוליפאז והאנזים ליפאז מושבתים.<...>לנטרל חומרים לא רצויים ולנטרל אנזימים המזרזים את היווצרותם של<...>קשה יותר להשיג ביטול של אנזימים וחומרים לא רצויים אחרים הכלולים בזרעי סויה

39

מחקרים ביוכימיים של מוצרי יין שמרים אוטוליזה תקציר DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: מסדר מכון לנין לביוכימיה על שם א.נ.באך מהאקדמיה למדעים של ברית המועצות

מטרה ומטרות המחקר. - לחקור את השינוי בפעילות האנזימים בשמרים וביין במהלך האוטוליזה; - לחקור את תוצרי האוטוליזה, חומרים חנקן,

חשיפה לאחר מכן מובילה להשבתה קלה של האנזים.<...>אנזימים אלו מופרשים בעיקר ליין.<...>בתהליך של טיפול בחום, יחד עם בידוד, מתרחשת נטרול של אנזימים.<...>תהליכים ב. ותופעות של פירוק תרמי של חומרים כימיים, דנטורציה תרמית של חלבונים, אי הפעלה<...>במהלך טיפול בחום, יחד עם העברת חומרים משמרים ליין, נצפית אי הפעלה של אנזימים.

40

העבודה מוקדשת לחקר מגיב ATP המכיל לוציפראז גחליליות מוטנטי, Luciola mingrelica, luciferin, MgS0_4, רכיבים של תמיסת חיץ ומייצבים, והוא נמצא בשימוש נרחב לקביעת ריכוזים ננו-ופיקומולריים של אדנוזין-5'-פוספט. (ATP) בדגימות ביולוגיות שונות הערכת הפעילות, היציבות והמאפיינים האנליטיים של מגיב ה-ATP בתמיסה בנוכחות ובהיעדר 5% ג'לטין ובג'לטין ג'ל בריכוז ג'לטין של 5% וטמפרטורה > = 30 מעלות צלזיוס, התקבלה תמיסת מגיב ATP, והג'לציה מתרחשת מתחת ל-30 מעלות צלזיוס פתרונות של מגיב ה-ATP נבדקו ב-30 מעלות צלזיוס, וסרטי ג'לטין דקים עם מגיב ATP נחקרו ב-22 מעלות צלזיוס. תוספי ג'לטין מפחיתים מעט את פעילות ויציבות של לוציפראז. הרגישות של קביעת ATP (מעל 0.96) לא הייתה תלויה בנוכחות ג'לטין ומצב הצבירה של גבולות הגילוי המפוזר היו 2*10 (-12), 7*10 (-13) ), 7 * 10 (-14) M ATP בעת שימוש במגיב ATP ב סרטי ג'לטין ובתמיסה בנוכחות 5% ג'לטין ובהעדרו, בהתאמה. הוכח שאחסון מגיב ה-ATP ב-22 מעלות צלזיוס בג'לטין לא רק משמר את הפעילות האנזימטית, אלא גם מגן על האנזים מפני זיהום חיידקי, שגורם לאובדן פעילות הלוציפראז.

במהלך תקופה זו, חוסר ההפעלה של מגיב ה-ATP במאגר היה רק ​​8%.<...>העקומות הקינטיות של אינאקטיבציה מראים (איור 2) שבכל המקרים התהליך ממשיך לפי הראשון<...>השבתה נוספת מתבצעת בסדר הראשון.<...>השבתת האנזים ב-4° התנהלה לפי הסדר הראשון ולא הייתה תלויה בשאלה אם האנזים נמצא במאגר.<...>Berezin I.V., Klyachko N.L., Levashov A.V. ואחרים // אנזימים משותקים. מ', 1987.

41

№1 [תעשיית המזון והעיבוד. כתב עת מופשט, 2002]

בשנת 1999 יצא לאור הגיליון הראשון של כתב העת המופשט "תעשיית המזון והעיבוד". מאז שנת 2000 הוא מתפרסם מדי רבעון על ידי TsNShB. כתב העת הוא גוף של מידע עדכני על ספרות מקומית וזרה על תעשיית המזון. הפרסום מיועד למדענים, מומחים ועוסקים בתעשיית המזון ויכול לשמש כלי עזר לספרנים ועובדי גופי מידע מדעי וטכני. ההיקף השנתי של RJ הוא כ-1200 פרסומים. הפרסום כולל מידע על המאמרים המשמעותיים ביותר מכתבי עת ואוספים מדעיים ומדעיים-מעשיים הנכנסים לאיגוד המדעי והמעשי המרכזי של החקלאות ומשקפים את הזרימה התיעודית העולמית בכל מגזרי תעשיית המזון.

C, האנזים יציב בין 4 ל-30 מעלות צלזיוס, לאחר מכן היציבות ירדה, ואחרי 60 מעלות צלזיוס חלה השבתה מהירה<...>לאי הפעלה לא מלאה של PPO.<...>צוין כי 1 ו-2 אינם משביתים אנזימים, 3 באופן מינימלי, ו-4a ו-4b משביתים באופן סלקטיבי<...>ביטול מהיר של PPO.<...>צוין ש-1 ו-2 אינם גורמים לאי-אקטיבציה של אנזימים, 3 הוא מינימלי, ו-4a ו-4b הם סלקטיביים.

42

בסיסים ביוטכנולוגיים לשימוש בתכשירי סינתזה מיקרוביולוגיים לעיבוד חומרי גלם בשר בעלי תכונות פונקציונליות וטכנולוגיות מופחתות מונוגרפיה

המאמר מסכם את התוצאות של שנים רבות של מחקר ומסדר מידע המאפיין את הסיכויים והפוטנציאלים של שימוש בתכשירי אנזימים פרוטאוליטיים מורכבים לתיקון תכונותיהם של חומרי גלם בשר בדרגה נמוכה, וכן עבור בשר עם סטיות באופי מהלך טרנספורמציות אוטוליטיות. המונוגרפיה הוכנה במחלקה לטכנולוגיית ייצור מזון של האוניברסיטה הטכנולוגית של מדינת קאזאן.

למצע, ומצד שני - תוצאה של השבתת האנזים.<...>בתעשיית המזון אפשרי רק אם הוא מושבת לחלוטין במוצר המוגמר, כי<...>כפי שניתן לראות מהתוצאות שהתקבלו (איור 2.4), השבתת האנזים מתחילה ב-pH 8.0 ובאופן אינטנסיבי<...>עלייה נוספת בטמפרטורת הדגירה ל-600C הובילה להשלמה

מטרת מחקר זה הייתה לחקור את ההשפעה של חומר צמחי המוכנס לאדמת היער האפורה ותנאי ההרטבה שלו על פעילותם של אנזימי חיזור.

אדמה עיקור דגימות קרקע בתוספת חומר אורגני \-קרינה הובילה לחוסר הפעלה מוחלט<...>בדגימות אדמה והשבתה מוחלטת של תכשיר האנזים בחול קוורץ.<...>אי-אקטיבציה משמעותית של האנזים התרחשה בחול קוורץ.<...>עיקור קרקע על ידי קרינת y וטמפרטורה גבוהה מוביל לביטול מוחלט של דהידרוגנאז,<...>הוכח כי השבתת תכשירי אנזימים קטלאז ופרוקסידאז המוכנסים לאדמת יער אפורה

לפיכך, מטרת ההלבנה היא להשבית אנזימים לא רצויים הקיימים בירקות,<...>זכויות יוצרים JSC "Central Design Bureau "BIBCOM" & LLC "Agency Kniga-Service" 61 מס' 10/2015 בין הטמפרטורה לזמן השבתה<...>צורתו, גודלו, מבנהו, מידת הבשלות שלו, ובמיוחד על סוג מערכות האנזים הנתונות לאי-אקטיבציה<...>בטמפרטורות נמוכות משתמשים לעיתים לשיפור מרקם המוצר באמצעות ביטול סלקטיבי<...>פרוקסידאז הוא אחד האנזימים התרמיים היציבים ביותר.

45

ARGINASE SEEDS VIKI MOKHNATOY ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: המוסד הפדגוגי של מדינת מוסקבה על שם וי.אי. לנין

מסקנות 1. ההידרוליזה של ארגינין בנוכחות תכשירי ארגינאז מזרעי בקיה רק ​​בשלבים הראשונים של הדגירה כפופה לתנאים של תהליך מונומולקולרי. עם מהלך התגובה הנוסף, השיעורים האמפיריים מפגרים אחרי אלה שחושבו עבור מצב התגובה מסדר ראשון.

לחשב את הקבועים של עיכוב האנזים על ידי תוצר התגובה (אורנטין).<...>המצע והבליעה של תוצרי התגובה; 2) השבתה תרמית של האנזים במהלך התגובה.<...>כל מערך הנקודות מגדיר עקומה אחת, ולכן ניתן להניח שההשבתה התרמית של האנזים<...>מכיוון שהוכח כי אין השבתה תרמית של תרופות במהלך התגובה, יש להניח<...>נטרול ארגינאז צמחי במהלך הידרוליזה אנזימטית של ארגינין.

46

רדיקלים חופשיים, הכוללים מטבוליטים חמצן פעילים ותחמוצת חנקן, עם היווצרות מוגזמת יכולים לשחק תפקיד משמעותי בהתרחשות של מצבים פתולוגיים של מערכת הרבייה: אנדומטריוזיס, מסטופתיה מפוזרת, אינדוקציה של קרצינוגנזה של לוקליזציה שונות. ישנן עדויות התומכות בתפקיד של עקה חמצונית באי פוריות נשית. תוצאות מחקרים פרה-קליניים וקליניים מאשרות את כדאיות השימוש בנוגדי חמצון למניעה וטיפול במחלות אלו. ויטמינים A, C, E, בשל זמינותם, שכיחותם בטבע, ידע וזיקה טובים יותר לגוף האדם, נכללים לרוב בטיפול מורכב. קיים בסיס ראיות משמעותי ליעילות השימוש בוויטמינים נוגדי חמצון לטיפול במחלות של מערכת הרבייה. היעילות הגבוהה יותר של טיפול תרופתי מורכב עם שימוש בנוגדי חמצון מוסברת לא רק על ידי ההשפעה על חמצון שומנים כאחד מהחוליות בפתוגנזה של המחלה, אלא גם על ידי שינוי בעוצמת חילוף החומרים של תרופות שנרשמו בו זמנית עם נוגדי חמצון. לשיקום ציטוכרום P450 3A4. ניתוח אלקטרוכימי של הפעילות הקטליטית של ציטוכרום P450 3A4 הראה שוויטמינים A, C ו-E משפיעים על הפחתת הציטוכרום P450 3A4 עקב ההשפעה נוגדת החמצון.

תהליכים אלה נמצאים בשליטה של ​​אנזימים, אשר אינם כוללים דליפה של מוצרים תגובתיים.<...>מאחורי הפרה של הפונקציות הרגולטוריות שלו ביחס לתהליכים החשובים ביותר של מטבוליזם תאי: באינאקטיבציה<...>ROS יכול לקיים אינטראקציה עם ציטוכרום P450, ולגרום להשבתת האנזים.<...>ויטמינים C, E ובטא-קרוטן מספקים AOD לא אנזימטי של הגוף עקב אי הפעלה ב<...>בטא-קרוטן, יחד עם אי-אקטיבציה ברמות שונות של מיני חמצן תגובתיים, מסוגלים לשחזר

47

רגולציה ומאפיינים של מערכת VITROGENASE RODOBACTER CAPSULATUS ABSTRACT DIS. ... מועמד למדעים ביולוגיים

מ.: המכון למיקרוביולוגיה של האקדמיה למדעים של ברית המועצות

מטרת עבודה זו הייתה לחקור את המאפיינים בוויסות מערכת הניטרוגקאז של חיידק הלא גופרית הסגול Rhodobaoter сapaulatua זן BIO

לכן, המעבר של הניטרוגבאז של חיידק זה ל-NGr-fory הוא השבתת האנזים ככזה.<...>תפקיד משמעותי ממלא את השבתת הניטרוגנאז; ו-Fd I R. capaula "אי הפעלה של אנזים זה / שכן הוא שומר על פעילותו. in vivo ו-inviSiw כאשר משתמשים בהם<...>B. capeulatua nitrate reductase הוא אנזים מסוג דיוזימולטור. שמונה.<...>תפקיד משמעותי באינאקטיבציה של nschrogenase ו-ferredoxin I הוא

48

התוכן של הפרין חופשי בפלסמת הדם של חולים עם פוליציטמיה ורה ותדירות הסימפטומים המוחיים הנוירולוגיים [משאב אלקטרוני] / Gaidukova, Tkachenko, Bubliy // המטולוגיה. טרנספוזיולוגיה. מזרח אירופה.- 2016 .- №1 .- ש' 47-57 .- מצב גישה: https://site/efd/478925

רלוונטיות. פוליציטמיה ורה (PV) היא מחלה מקבוצת הניאופלזיות המיאלופרוליפרטיביות, שביטוייה הקליניים מאופיינים בנטייה לדימומים ולפקקת מטרה: לחקור את תכולת ההפרין החופשי בפלסמת הדם של חולים עם PV ולקבוע את מבנה של תסמינים מוחיים במחלה זו. חומרים ושיטות. נבדקו 32 חולים עם PV. בין החולים שנבדקו היו 18 גברים ו-14 נשים. הגיל הממוצע של המטופלים שנבדקו היה 57.2±1.2 שנים. קבוצת התצפית השנייה כללה 52 חולים שנבדקו בקשר עם חשד למחלות דם מיאלופרוליפרטיביות, אך לאחר בדיקה קלינית והמטולוגית מעמיקה, מחלות כאלה לא נכללו מהם, ומצב הדם ההיקפי נחשב כ-SE מוחלט עקב נוכחותם של מחלות סומטיות מסוימות. בין החולים שנבדקו היו 30 גברים ו-22 נשים. הגיל הממוצע של החולים בקבוצה השנייה היה 55.7±3.6 שנים. קבוצת הביקורת כללה 35 אנשים בריאים כמעט באותו גיל. קביעה כמותית של תכולת החלק החופשי של הפרין בוצעה על ידי ניתוח אלקטרופורטי לפי שיטת B.V. Mikhailichenko, S.V. וידיבורצה (2000). תוצאות ומסקנות. בחולי PV, נצפה חוסר איזון בחילוף החומרים של הפרין חופשי, המתבטא בעלייה בתכולתו בפלסמת הדם. הדיון מציג נתונים על התפקיד הפיזיולוגי של הפרין. הוכח כי פעולתו אינה רק בוויסות המוסטזיס, אלא גם בבקרת אנגיוגנזה, תגובות חיסוניות, ויסות חילוף החומרים של שומן ופחמימות, פעילות אנטיבקטריאלית, אנטי ויראלית ואנטי דלקתית. נדונים מנגנונים אפשריים להתרחשות ההפרות שזוהו.

ראשית, השאלות הבאות נבחנות בעבודה: 1. האם התכונות של RNA פולימראז משתנות כאשר הוא משולב עם DNA עוד לפני תחילת סינתזת ה-RNA. 2. מה הסיבה לייצוב הפולימראז בנוכחות DNA ו-NTP: עם פעולת החניכה, כלומר. חיבור של NTPs הראשונים, עם תהליך סינתזה של שרשראות ארוכות של פולינוקלאוטידים או עם ההשפעה המייצבת של NTPs על RNA פולימראז, לא קשור לחיבור של נוקלאוטידים זה לזה. 3. האם חשוב לייצוב פולימראז במהלך סינתזת RNA לשמר את הגודל והמבנה הטבעי הדו-גדילי של תבנית ה-DNA?

תנאי דגירה d I אנזים חופשי; 2 אנזים + DNA) 3 אנזים + DNA + NTF.<...>טבלה 7 השבתה של טריפסין RNA פולימראז בהתאם לתנאי קדם הדגירה שלו במהלך קדם הדגירה<...>תוצאה זו, כמו גם נתונים על אִיוּן פְּעוּלָה

השפעת טמפרטורה מזיקה גבוהה (45 מעלות צלזיוס) במשך שעתיים ושתים עשרה שעות על צמחי G. max ו- G. soja על שינויים בספקטרום האלקטרופורטי של פרוקסידאז וקטלאז נחקרה בעבודה זו. שינויים כמותיים ואיכותיים בספקטרום האלקטרופורטי של עלים שנגרמו כתוצאה מפעולת לחץ חום היו תלויים בגנוטיפ, שלב התפתחות פולי הסויה ומשך גורם הלחץ. הוכח שלחץ טמפרטורה לטווח קצר אינו מוביל לשינויים כמותיים בספקטרום האלקטרופורטי של פרוקסידאז וקטלאז בעלי סויה. חשיפה ממושכת לטמפרטורה מזיקה גבוהה גורמת לאי-אקטיבציה בעיקר של צורות פרוקסידאז וקטלאז עם ניידות אלקטרופורטית בינונית. צורות יציבות של פרוקסידאז עם Rf 0.02; 0.10; 0.21 (G.max) ו-Rf 0.02; 0.10; 0.40 (G. soja), קטלאז עם Rf 0…0.04 (G. max) ו-Rf 0…0.04; 0.22 ... 0.24 (G. soja), כמו גם צורות בישיבה המופעלות בטמפרטורות גבוהות, מבטיחות את תפקודם של צמחים תחת לחץ

חשיפה ממושכת לטמפרטורה מזיקה גבוהה גורמת לחוסר הפעלה בעיקר של צורות פרוקסידאז.<...>חשיפה ממושכת להלם חום גורמת להשבתת האנזים.<...>צורות מולקולריות רבות של אנזימים ממלאות תפקיד חשוב במנגנוני הסתגלות תרמית של פולי סויה.<...>חשיפה לטמפרטורה מזיקה גבוהה במשך שתים עשרה שעות גורמת לאי-אקטיבציה בעיקר<...>תפקידם של אנזימים בעמידות צמחית / K.N. Sarsenbaev, F.A. Polimbetova / / האקדמיה למדעים של ה-SSR הקזחית, Chief Bot. גן.

קצב התגובה האנזימטית, כלומר פעילותו של אנזים, נקבע גם על פי נוכחותם של מפעילים ומעכבים במדיום: הראשונים מגבירים את קצב התגובה ולעיתים משנים אותה, האחרונים מעכבים את התגובה. בין התרכובות הכימיות המשפיעות על פעילות האנזימים, ישנם חומרים שונים. אז, HC1 מפעיל את הפעולה של פפסין, חומצות מרה - ליפאז לבלב; חלק מאנזימי הרקמות (אוקסידודורדוקטאזים, קתפסינים, ארגינאז), פפאין צמחי פרוטאינז וכו' מופעלים ברובם על ידי תרכובות המכילות קבוצות SH חופשיות (גלוטתיון, ציסטאין), וחלקם גם על ידי ויטמין C. לעתים קרובות במיוחד יונים משמשים (פועלים כמפעילים). מתכות דו ערכיות ולעיתים חד ערכיות. אנזימים רבים אינם פעילים כלל בהיעדר מתכות. אז, כאשר אבץ מוסר, אנהידראז פחמני כמעט חסר פעילות אנזימטית; יתר על כן, תחת פעולתו של אנזים זה, אבץ לא יכול להיות מוחלף בשום מתכת אחרת. ידועים אנזימים אשר פעולתם מופעלת על ידי מספר מתכות, בפרט, אנולאז (ראה מטבוליזם של פחמימות) מופעל על ידי Mg 2+ , Mn 2+ , K + . בשולחן. 18 מציג דוגמאות להשתתפות של מתכות בפעולה של כמה אנזימים.

לגבי תפקידן של מתכות בפעולת ההפעלה של אנזימים, הנתונים הזמינים מצביעים על כך שבמקרים מסוימים יוני מתכת (Co 2+, Mg 2+, Zn 2+, Fe 2+) מתפקדים כקבוצות תותבות של אנזימים. במקרים אחרים הם תורמים להצמדת המצע לאתר הפעיל וליצירת קומפלקס אנזים-סובסטרט. לדוגמה, יוני Mg 2+, דרך קבוצת פוספטים בעלי מטען שלילי, מבטיחים התקשרות של אסטרים מונו-פוספוריים של חומרים אורגניים למרכז הפעיל של פוספטאזות המזרזות את ההידרוליזה של תרכובות אלו. במקרים מסוימים, המתכת מתאחדת עם המצע, ויוצרת מצע אמיתי, עליו פועל האנזים. בפרט, יוני Mg 2+ מפעילים קריאטין פוספוקינאז עקב היווצרות מצע אמיתי ומלח המגנזיום של ATP. לבסוף, ישנן עדויות ניסיוניות להשתתפות ישירה של מתכות (למשל יוני Ca 2+ במולקולת עמילאז הרוק) ביצירת ובייצוב המרכז הפעיל וכל המבנה השלישוני של מולקולת האנזים. יש לציין גם את התפקיד התכוף של מתכות כמאפננים אלוסטריים (ראה איור 59). באינטראקציה עם המרכז האלוסטרי, מתכת כזו (מאפנן) מקדמת את היווצרות התצורה המרחבית הטובה ביותר של האנזים ושל קומפלקס האנזים-סובסטרט הפעיל.

אניונים בריכוזים פיזיולוגיים בדרך כלל אינם יעילים או בעלי השפעה מפעילה מועטה על אנזימים. יוצאי הדופן הם פפסין, כמה oxidoreductases המופעלים על ידי אניונים, וכן עמילאז רוק, המזרז את ההידרוליזה של עמילן, שפעילותו מוגברת על ידי יוני כלוריד, ו-adenylate cyclase, המופעל על ידי אניוני הלוגן.

מעכבים נהוג לקרוא לחומרים הגורמים לעיכוב חלקי או מלא של תגובות המזוזות על ידי אנזימים. מכיוון שאנזימים הם חלבונים, כל גורם הגורם לדנטורציה של חלבון (חום, חומצות, אלקליות, מלחי מתכות כבדות) מוביל להשבתת האנזים. עם זאת, ביטול כזה הוא יחסית לא ספציפי. זה לא קשור למנגנון הפעולה של אנזימים. קבוצה גדולה בהרבה מורכבת ממה שנקרא מעכבים ספציפיים, אשר השפעתם על אנזים מסוים אחד או על קבוצה של אנזימים קשורים. המחקר של מעכבים אלה חשוב ממספר סיבות.

ראשית, מעכבים יכולים לספק מידע רב ערך על אופי האתר הפעיל של האנזים, כמו גם הקבוצות הפונקציונליות והקשרים הכימיים שלו המבטיחים את היווצרות קומפלקס האנזים-סובסטרט. ידועים חומרים הקושרים באופן ספציפי קבוצה כזו או אחרת במולקולת אנזים, חוץ ממנה מתחום התגובה הכימית. בפרט, יודואצטט ICH 2 -COOH, האמיד והאתיל שלו, parachloromercury benzoate ClHg - C 6 H 4 -COOH וריאגנטים אחרים נכנסים בקלות יחסית לקשר כימי עם כמה קבוצות SH של אנזימים. אם קבוצות כאלה חיוניות לפעולת הקטליזה, אז תוספת של מעכבים כאלה מובילה לאובדן מוחלט של פעילות האנזים:

R-SH + ICH 2 -COOH --> HI + R-S-CH 2 -COOH

מספר אנזימים אחרים (כולינאסטראז, טריפסין וכימוטריפסין) מעוכבים מאוד על ידי כמה תרכובות זרחן אורגניות, במיוחד דיאיזופרופילפלואורופוספט (DFP), עקב חסימה של קבוצת ההידרוקסיל המרכזית של סרין במרכז הפעיל (ראה לעיל).

שנית, מעכבים מצאו יישום רחב באנזימולוגיה בחקר טבעם של צורות מרובות של אנזימים ואיזואנזימים, אשר נבדלים לא כל כך בתנועתיות אלקטרופורטית, אלא בהבדל בתגובות לאותו מעכב.

בעזרת מעכבים המכבים באופן סלקטיבי שלבים בודדים של תהליך מטבולי רב-שלבי, ניתן לקבוע במדויק את רצף התגובות הכימיות ואת אופי האנזימים המעורבים. בפרט, בדרך זו, עם שימוש ביודואצטט, פלואוריד ומעכבים אחרים, פוענח המסלול הגליקוליטי של טרנספורמציות חיזור של גלוקוז לחומצה לקטית ברקמת השריר (ראה מטבוליזם של פחמימות), הכולל 11 שלבים הכוללים 11 אנזימים ו-10 ביניים מטבוליטים.

מנגנון הפעולה של רעלים ורעלים רבים על הגוף מבוסס על עיכוב אנזימים. לפיכך, ידוע שבמקרה של הרעלת חומצה הידרוציאנית, מוות מתרחש עקב עיכוב מוחלט של אנזימי הנשימה (ציטוכרום אוקסידאז), במיוחד תאי מוח. ההשפעה הרעילה על גוף האדם ובעלי החיים של כמה קוטלי חרקים נובעת מעיכוב הפעילות של כולינסטראז, אנזים הממלא תפקיד ראשוני בפעילות מערכת העצבים.

כימותרפיה רציונלית - שימוש מודע בתרופות ברפואה, צריך להתבסס על ידע מדויק על מנגנון פעולתן, על הביוסינתזה של אנזימים או על עבודתם בגוף. לפעמים שיטה לטיפול במחלות אנושיות כרוכה בשימוש במעכבים סלקטיביים. לפיכך, מעכבי טריפסין, כימוטריפסין וקאליקריין טרסילול נמצא בשימוש נרחב בטיפול בדלקת לבלב חריפה. ההשפעה המעכבת הסלקטיבית על אנזימים של כמה תרכובות טבעיות וסינתטיות (מה שנקרא אנטי-מטבוליטים) משמשת כיום כבסיס לפיתוח שיטות יעילות לסינתזה של תרופות כימותרפיות. נתיב זה פותח אפשרויות רחבות לוויסות הן את סינתזה של אנזימים והן את עוצמת המטבוליזם.

סוגי עיכוב.למרות שמנגנון הפעולה של רוב המעכבים לא הובהר, בדרך כלל מבחינים בין עיכוב הפיך לבלתי הפיך. אם מולקולת מעכב גורמת לשינויים מתמשכים או שינוי של הקבוצות הפונקציונליות של האנזים, אז סוג זה של עיכוב נקרא בלתי הפיך. אולם לעתים קרובות יותר קיימת עיכוב הפיך שניתן לחקור כמותית על בסיס משוואת מיכאליס-מנטן. עיכוב הפיך, בתורו, מתחלק לתחרות ולא תחרותי, תלוי אם ניתן להתגבר על עיכוב התגובה האנזימטית על ידי הגדלת ריכוז הסובסטרט או לא. במקרה השני, עלייה בריכוז הסובסטרט אינה משנה את מידת עיכוב האנזים.

עיכוב תחרותי יכול להיגרם מחומרים בעלי מבנה דומה למצע, אך שונה מעט ממבנה המצע האמיתי. דוגמה קלאסית לסוג זה של עיכוב היא עיכוב פעילות succinate dehydrogenase על ידי חומצה מאלונית. אנזים זה מזרז את החמצון על ידי דהידרוגנרציה של חומצה סוקסינית לחומצה פומארית לפי הסכימה:

אם מתווספת לחומצה מלונית (מעכב) למדיום, אזי, בשל הדמיון המבני שלה עם הסובסטרט האמיתי של חומצה סוקסינית (נוכחות של שתי קבוצות קרבוקסיל מייננות דומות), היא תגיב עם האתר הפעיל ליצירת מעכב אנזים קומפלקס (ראה תרשים), לעומת זאת, כאשר אין העברה של מימן ממלונט. מאחר שמבני המצע - חומצה סוקסינית והמעכב - מלונט שונים במקצת, הם מתחרים על הקישור למרכז הפעיל, ומידת העיכוב תיקבע לפי היחס בין ריכוזי המלונט והסוקסינאט, ולא לפי ריכוז מוחלט של המעכב. סוג זה של עיכוב מכונה לפעמים עיכוב אנטגוניזם מטבולי (איור 56).

באופן כללי, התגובה של האינטראקציה של מעכב עם אנזים יכולה להיות מיוצגת על ידי המשוואה הבאה:

הקומפלקס המתקבל, הנקרא קומפלקס מעכבי האנזים (EI), בניגוד ל-ES, אינו מתפרק ליצירת תוצרי תגובה. ניתן להגדיר את קבוע הדיסוציאציה של קומפלקס EI או הקבוע המעכב (K 1) בהתאם לתיאוריית מיכאליס-מנטן כיחס בין הקבועים של התגובות ההפוכות והישירות:

כלומר, הקבוע המעכב עומד ביחס ישר לתוצר של ריכוזי האנזים והמעכבים וביחס הפוך לריכוז הקומפלקס EI.

השיטה של ​​עיכוב תחרותי מצאה יישום נרחב בפרקטיקה הרפואית. ידוע, למשל, שתרופות סולפה משמשות לטיפול במחלות זיהומיות מסוימות הנגרמות על ידי חיידקים. התברר שלתרופות אלו יש דמיון מבני לחומצה פארא-אמינו-בנזואית, שבה משתמש תא החיידק לסנתז חומצה פולית, שהיא חלק בלתי נפרד מאנזימי חיידקים. בשל הדמיון המבני הזה, סולפנילאמיד, למשל, חוסם את פעולת האנזים על ידי עקירת חומצה פארא-אמינו-בנזואית מהקומפלקס עם האנזים המסנתז חומצה פולית, מה שמוביל לעיכוב צמיחת חיידקים.

כמה אנלוגים של ויטמין B 6 וחומצה פולית, בפרט דאוקסיפירידוקסין ואמינופטרין (ראה ויטמינים), פועלים כמעכבי קו-אנזים תחרותיים (או אנטי-ויטמינים), המעכבים תהליכים ביוכימיים רבים בגוף.

עיכוב לא תחרותי נגרמת על ידי חומרים שאין להם קווי דמיון מבניים עם סובסטרטים ולעיתים קרובות נקשרים לא למרכז הפעיל, אלא במקום אחר במולקולת האנזים. מידת העיכוב במקרים רבים נקבעת לפי משך פעולת המעכב על האנזים. עם סוג זה של עיכוב, עקב היווצרות של קשר קוולנטי יציב, האנזים עובר לעיתים קרובות אי-אקטיבציה מוחלטת, ואז העיכוב הופך לבלתי הפיך. דוגמאות לעיכוב לא תחרותי (אינאקטיבציה) הן הפעולה של יודואצטט, דיאיזופרופיל פלואורפוספט, וכן דיאתיל-p-ניטרופניל פוספט וחומצה הידרוציאנית, המורכבת מקישור וכיבוי של קבוצות פונקציונליות או יוני מתכת במולקולת האנזים.

כדי להבהיר את שאלת סוג העיכוב, נעשה שימוש במשוואת Michaelis-Menten, עלילת Lineweaver-Burke ועוד משוואות מתקדמות יותר, כגון משוואת אדי-הופסטי:

v = - K m (0/[S]) + V מקסימום

וגרפים מתאימים בקואורדינטות ישרות. בגרפים להלן, הבנויים בקואורדינטות v ו-[S], כמו גם בקואורדינטות 1/v ו-1/[S], ​​V הוא קצב התגובה המקסימלי, V 1 הוא הקצב המרבי בנוכחות מעכב , K 1 הוא הקבוע המעכב; כל שאר הסמלים הוצגו למעלה.

ניתן לראות שעם סוג העיכוב התחרותי (איור 57), המעכב מעלה את ערך Km (בערך השווה להפרש באורך הקטעים המנותקים מציר האבססיס), מבלי להשפיע על המהירות המרבית. . משמעות הדבר היא שבריכוז מצע גבוה מספיק [S], המעכב נעקר על ידי מולקולות סובסטרט מקומפלקס EI. עם עיכוב לא תחרותי (איור 58), המעכב מפחית את ערך המהירות המרבית. אם במקביל הערך של K m לא יורד, אז מדברים על עיכוב לא תחרותי לחלוטין. סוג דומה של עיכוב מתרחש במהלך היווצרות של קומפלקסים לא פעילים, קשים לניתוק EI ו(או) EIS. עם זאת, לעתים קרובות יש סוג מעורב של עיכוב (המכונה לעתים סוג לא תחרותי חלקית), שבו ירידה ב-V max משולבת עם עלייה ב-K m . משמעות הדבר היא כי קומפלקס EI שומר על פעילות חלקית, כלומר, היכולת ליצור קומפלקס טרינרי EIS ביניים שבו המצע עובר המרה קטליטית מושהית. במקרים נדירים, מידת העיכוב של פעילות האנזים עלולה לעלות עם עלייה בריכוז הסובסטרט; עבור סוג זה של עיכוב, הוצע מונח די לא מדוייק uncompetitive (מהאנגלית uncompetitive). אחד המנגנונים של עיכוב כזה נובע מהאפשרות של המעכב לשלב עם קומפלקס ES ליצירת קומפלקס ESI טריני שאינו פעיל או מגיב באיטיות.

לפיכך, ניתוח גרפי של שיעורי התגובות האנזימטיות כפונקציה של ריכוזי המצע יכול לספק מידע רב ערך על הקינטיקה של תגובות אנזימטיות, ולהאיר את המנגנון האפשרי של קטליזה אנזימטית.

ויסות פעילות האנזים

הוזכר לעיל שאחת התכונות הייחודיות של אורגניזמים חיים היא היכולת המדהימה לאזן תהליכים קטבוליים (ביולוגיים) ואנבוליים (ביוסינתטיים). למרות שתאים עוברים בו זמנית תהליכים של סינתזה, ריקבון והמרה הדדית של מאות ואלפי חומרים שונים, ישנם מנגנוני ויסות רבים המבטיחים את קביעות הסביבה הפנימית של הגוף. חלק ממנגנוני הוויסות הללו, שביניהם תפקיד חשוב שייך למנגנוני ויסות פעילות האנזים, יידונו להלן.

השפעת חוק הפעולה ההמונית.בתגובה כימית הפיכה המזרזת על ידי אנזים, למשל A+B C+D, ריכוז מרכיבי התגובה ובהתאם לכך כיוון התגובה ינוהל על ידי השפעת חוק הפעולה המונית. בפרט, ניתן להראות זאת בתגובת טרנסאמינציה הפיכה המזרזת על ידי אלנין אמינוטרנספראז:

אלנין + α-Ketoglutarate Pyruvate + Glutamate.

סוג זה של ויסות ממלא כמובן תפקיד מוגבל בלבד, שכן בתנאים אמיתיים התגובה ממשיכה בדרך כלל בכיוון אחד, שכן התוצרים המתקבלים יכולים להיות מצעים לפעולת אנזימים אחרים ולהוציאם מכדור התגובה; במקרים אלה נוצר מצב יציב (נייח) ולא שיווי משקל אמיתי.

שינוי בכמות האנזים.בחיידקים, התופעה של סינתזה מושרה של אנזימים נחקרת היטב כאשר הם גדלים על מצע שבו מקור הפחמן והאנרגיה היחיד הוא פחמימה כזו או אחרת, למשל, גלוקוז. החלפת הגלוקוז במדיום בלקטוז מובילה לסינתזה מושרה או מותאמת (לאחר תקופה קצרה של שלב פיגור) של האנזים גלקטוזידאז (מתוכנת על ידי הגן ללקטוז, ראה סינתזת חלבון), המפרק את הלקטוז לגלוקוז וגלקטוז. ברקמות של בעלי חיים, סינתזה מהירה כזו של אנזימים נצפית בתדירות נמוכה יחסית, והמנגנון הגורם לסינתזה נחקר רק עבור מספר קטן של אנזימים (טירוזין טרנסמינאז, סרין וטרונין דיידדראז, טריפטופן פירולאז וכו'). עם זאת, כאשר רעלים מסוימים, חומרים מסרטנים, אלקלואידים, קוטלי חרקים וכו' נכנסים לגוף, נצפית לאחר מספר ימים עלייה חדה בפעילות (בהתאמה, כמות) האנזימים - הידרוקסילאזים של הרשת האנדופלזמית החלקה של תאי הכבד; חמצון חומרים זרים למוצרים לא רעילים לגוף. מצד שני, מתוארים מקרים שבהם, תחת פעולתם של הידרוקסילאזים כאלה, חומרים זרים הופכים בגוף לתרכובות רעילות יותר. תופעה זו, ההפך מניקוי רעלים, נקראת סינתזה קטלנית.

פרו-אנזימים.אנזימים פרוטאוליטיים של מערכת העיכול והלבלב מסונתזים בצורה לא פעילה, בצורה של פרו-אנזימים (זימוגנים). הרגולציה במקרים אלו מצטמצמת להמרה של פרו-אנזימים לאנזימים פעילים בהשפעת גורמים ספציפיים. לפיכך, טריפסין מסונתז בלבלב בצורה של טריפסינוגן. האחרון הופך לטריפסין פעיל במעי בפעולת אנזים חלבוני אחר - אנטרוקינאז, שהתגלה לראשונה במעבדה של IP Pavlov. הוכח כי השפעת ההפעלה של אנטרוקינאז מצטמצמת לביקוע של הקספפטיד מטריפסינוגן, מה שמוביל ליצירת מבנה שלישוני מקומי של טריפסין והמרכז הפעיל שלו (ראה לעיל); אוטוקטליזה נצפה גם. הטרנספורמציה של פפסינוגן לא פעיל לפפסין פעיל מתבצעת באופן אוטוקטליטי כתוצאה מפרוטוליזה מוגבלת בנוכחות HC1 וקשורה גם לביקוע מהמעכב הספציפי הראשון בעל אופי פוליפפטיד (ראה החלפת חלבון פשוטה). לסינתזה של פרוטאנזים בצורה לא פעילה ושל מספר חלבוני קדם לא פעילים אחרים יש כמובן משמעות ביולוגית מסוימת, המונעת הרס של תאי איברים שבהם נוצרים פרו-אנזימים.

שינוי כימי של האנזים.צוין לעיל (ראה כימיה של חלבונים) שמספר חלבונים עוברים שינוי פוסט-סינתטי במהלך היווצרות המבנה השלישוני. התברר שאנזימי המפתח של חילוף החומרים באנרגיה - פוספורילאז, גליקוגן סינתטאז וכו' - נשלטים גם על ידי זרחון ודפוספורילציה, המתבצעת על ידי אנזימים ספציפיים - חלבון קינאז ופרוספאטאז חלבון, שרמת הפעילות שלהם, בתורם, היא מווסת על ידי הורמונים (ראה חילוף חומרים של פחמימות). רמת הפעילות של אנזימים מרכזיים, ובהתאם, עוצמת התהליכים המטבוליים ייקבעו על פי היחס בין צורות זרחן ודפוספורילציה של אנזימים אלו.

ויסות פעילות האנזים על ידי עקרון המשוב.בתגובות ביוסינתטיות רבות, הסוג העיקרי של ויסות קצב תהליך אנזימטי רב-שלבי הוא עיכוב משוב, כאשר התוצר הסופי של השרשרת הביוסינתטית מדכא את פעילות האנזים המזרז את השלב הראשון.

הבה נניח שתהליך ביו-סינתטי רב-שלבי מתבצע בתאים, שכל שלב בהם מזורז על ידי האנזים שלו:

קצב הרצף הכולל של תגובות כזה נקבע במידה רבה על ידי ריכוז התוצר הסופי (P), שלצבירתו מעל רמה מקובלת יש השפעה מעכבת חזקה על השלב הראשון של התהליך, בהתאמה, על האנזים E. 1 .

לראשונה, קיומו של מנגנון כזה לשליטה בפעילות האנזימים על ידי מטבוליטים הוכח ב-E. coli במחקר של סינתזה של איזולאוצין וציטידין טריפוספט (CTP). התברר שאיזולאוצין, שהוא התוצר הסופי, מעכב באופן סלקטיבי את הפעילות של ת'רונין דהידראז, המזרז את החוליה הראשונה בתהליך המרת ת'רונין לאיזולאוצין, הכולל חמש תגובות אנזימטיות. באופן דומה, כתוצר סופי של המסלול הביוסינתטי, ל-CTP יש השפעה מעכבת על האנזים הראשון (אספרטאט טרנסקרבמוילאז), ובכך מווסת את הסינתזה שלו. סוג זה של עיכוב נקרא עיכוב משוב או רטרו-אינהיביציה. קיומו הוכח בכל האורגניזמים החיים, והוא נחשב כיום לאחד מסוגי הוויסות המובילים של פעילות האנזים ומטבוליזם תאי באופן כללי 1 . (אחד יש לציין שקצב התגובה (כמו גם פעילות האנזים) בתהליכים ביולוגיים (קטבוליים) גרידא מוסדר על ידי תוצרי ביניים המהווים אינדיקטורים למצב האנרגיה של התא (נוקלאוטידים פורין, פירופוספט, פוספט אנאורגני וכו').)

לעומת זאת, בתהליכים אמפיבוליים (ראה מבוא למטבוליזם ואנרגיה), המבצעים בו-זמנית פונקציות ביוסינתטיות ופירוקות ביולוגיות 2, קיומו של ויסות הן על ידי סוג העיכוב הרטרו והן על ידי macroergs, אינדיקטורים למצב האנרגיה של התא, יש הוכח. (2 תהליכים אמפיבוליים כוללים מסלולים כגון גליקוליזה, גליקוגנוליזה, מחזור חומצה טריקרבוקסילית, מסלול מונופוספט של הקסוז, טרנסאמינציה של חומצות אמינו (ראה מטבוליזם)). עבור תהליכים אמפיבוליים, סוג ייחודי של ויסות, המאפיין רק אותם, הוא, בנוסף, הפעלה על ידי מבשר, כאשר המטבוליט הראשון במסלול רב-שלבי מפעיל את האנזים המזרז את השלב האחרון. לפיכך, הוכחה ההשפעה המפעילה של גלוקוז-6-פוספט, המהווה מבשר לגליקוגן, על האנזים גליקוגן סינתטאז.

סוגים דומים של עיכוב על ידי התוצר הסופי והפעלה על ידי התוצר הראשון אופייניים לאנזימים אלוסטריים (רגולטוריים) (ראה לעיל), כאשר האפקטור, השונה מבחינה מבנית מהמצע, נקשר במרכז מיוחד (אלוסטרי) של מולקולת האנזים, מרוחק מרחבית מהמרכז הפעיל. לכן, נהוג להבחין בין סוג הוויסות האלוסטרי הכולל גם עיכוב אלוסטרי וגם הפעלה אלוסטרית. טרנספורמציות הדדיות של האנזים האלוסטרי הפעיל והלא פעיל בצורה פשוטה, כמו גם השינויים הקונפורמציוניים שנצפו עם ההתקשרות של המצע והאפקטורים, מוצגים באיור. 59.

ניתן לראות כי התקשרות של אפקטור שלילי למרכז האלוסטרי גורמת לשינויים משמעותיים בתצורת המרכז הפעיל של מולקולת האנזים וכתוצאה מכך לאובדן הזיקה של האנזים למצע שלו (היווצרות של קומפלקס לא פעיל).

אינטראקציות אלוסטריות מתבטאות באופי העקומות של התלות של קצב התגובה הראשוני בריכוז המצע או האפקטור, בפרט, בצורת ה-S של העקומות (סטייה מהעקומה ההיפרבולית של Michaelis-Menten). המשמעות היא שהקשירה של מולקולה אחת של המצע מקלה על הקישור של המולקולה השנייה במרכז האלוסטרי, ובכך מגבירה את קצב התגובה. בנוסף, אנזימים רגולטוריים (אלוסטריים) מאופיינים בתלות לא ליניארית של קצב התגובה בריכוז האנזים.

סוגים אחרים של ויסות פעילות האנזים.ישנם מספר מנגנונים נוספים השולטים בקצב התהליכים המטבוליים ובפעילות האנזימים התוך תאיים. מנגנונים כאלה עשויים לכלול תחרות של אנזימים על מצע משותף, השבתת פעילותו של אחד מהנוזואנזימים (במספר צורות של אנזימים), השפעת ריכוזי הקופקטורים וצורתם (בעיקר יוני מתכת) והתופעה. של מידור. נראה כי מנגנון המידור ממלא תפקיד ביולוגי חשוב, הפרדה מרחבית של אנזימים מהמצעים שלהם באמצעות ביו-ממברנות (לדוגמה, אנזימים ליזוזומליים: פרוטאנזים, פוספטאזות, ריבונוקלאזות ואנזימים הידרוליטיים אחרים, מחומרים שהם פועלים עליהם בציטופלזמה) או בלתי תואמים הדדית. באותו זמן תהליכים מטבוליים. דוגמה לאחרונים יכולים להיות מסלולים לסינתזה של חומצות שומן, המתרחשות בעיקר בחלק המסיס של הציטופלזמה, ומסלולים לפירוק חומצות שומן, המרוכזים במיטוכונדריה.

קביעת פעילות האנזים

קביעת התוכן הכמותי של אנזימים באובייקטים ביולוגיים מציגה קשיים מסוימים, שכן, למעט חריגים נדירים, אנזימים ברקמות נמצאים בריכוזים זניחים. לכן, כמות האנזימים נשפטת לפי קצב התגובה המזוזת, בתנאי מדידה מוסכמים מסוימים. בתנאים אופטימליים של טמפרטורה, pH של המדיום ורוויה מלאה של האנזים עם הסובסטרט, הקצב פרופורציונלי לריכוז האנזים. קצב התגובה האנזימטית נשפט או לפי קצב אובדן המצע, או לפי קצב היווצרות תוצר התגובה.

ועדת האנזימים של האיגוד הביוכימי הבינלאומי המליצה על יחידה סטנדרטית (E) לביטוי ריכוז האנזים. היחידה של כל אנזים נחשבת לכמות שלו, אשר, בתנאים אופטימליים, מזרזת את ההמרה של 1 מיקרומול מהמצע לדקה (מיקרומול/דקה). מוצעת הגדרה חדשה ליחידה הבינלאומית של האנזים קטאל (cat, kat), המתאימה לכמות האנזים המסוגלת לגרום להמרה של 1 מול של מצע למוצר תוך 1 שניות (1 מול/שניות). ניתן לבטא את היחס בין היחידה הבינלאומית (E) לקטאל באופן הבא:

או 1 E \u003d 1 μmol min -1 \u003d (1/60) μmol s -1 \u003d (1/60) μkat \u003d 16.67 ncat. לפיכך, 1E של האנזים מתאים ל-16.67 ncat.

כמו כן, מומלץ למדוד יחידות אנזים ב-25°C, pH אופטימלי וריכוז מצע מעל ריכוז הרוויה. במקרים אלו, הקצב מתאים לסדר האפס של התגובה ביחס למצע ותלוי רק בריכוז האנזים.

כדי לבטא את פעילות האנזים משתמשים בהגדרה של פעילות ספציפית ומולקולרית. הפעילות הספציפית של אנזים מתבטאת בדרך כלל כמספר יחידות הפעילות האנזימטית לכל 1 מ"ג חלבון (או מספר הקטלים לכל 1 ק"ג חלבון פעיל). מספר מולקולות המצע המומרות על ידי מולקולת אנזים אחת לדקה מכונה בדרך כלל מספר המחזור, או פעילות מולקולרית. לפיכך, מולקולה אחת של קטלאז אריתרוציטים מסוגלת לפצל 5 × 10 6 מולקולות של מי חמצן 1 בדקה אחת. (אחד על מנת שאטום 1 של ברזל אנאורגני, המזרז גם את הפירוק של H 2 O 2, יפצל מספר כזה של מולקולות H 2 O 2 שקטלאז מתפצל תוך 1 שניות, זה ייקח יותר מ-300 שנה. דוגמה זו היא הוכחה ברורה לאחת התכונות העיקריות של אנזימים - הפעילות הקטליטית הגבוהה שלהם.)