Verdant fermentų tirpalus, jų biochemija inaktyvuojama. Fermentų inaktyvavimas veikiant deguoniui

Fermento kiekį audiniuose bet kuriuo metu lemia santykinis jo sintezės ir skilimo greitis, taip pat įvairių tipų inhibitorių ir aktyvatorių koncentracija. Paprastai fermentų skilimas ir jų kiekio terpėje mažėjimas vyksta lėtai. Fermentų slopinimas ir aktyvinimas gali būti atliktas gana greitai – per kelias sekundes.

Atskirų fermentų aktyvumui nustatyti ir išreikšti yra daug metodų. Taip yra dėl fermentų įvairovės, įvairių substratų buvimo ir naudojimo jų aktyvumui nustatyti.

Tarptautinė biochemijos sąjunga pasiūlė tokį fermento vieneto apibrėžimą: Bet kurio fermento vienetas yra kiekis, kuris tam tikromis standartinėmis sąlygomis katalizuoja vieno mikromolio substrato konversiją per minutę. ». Mikromolių skaičius bus lygus standartinių vienetų skaičiui . Tarptautinė komisija pasiūlė, jei įmanoma, nustatyti fermentų aktyvumą esant 30 °C temperatūrai ir esant pH vertėms bei substrato koncentracijoms, optimalioms fermentiniam aktyvumui.

Yra dažni fermentų savybės ištekėti dėl jų baltyminės prigimties . Fermentai termolabūs, jų aktyvumas priklauso nuo pH ir drėgmės , kurioje jie veikia, taip pat nuo aktyvatorių ir inhibitorių įtaka .

Kai temperatūra pakyla iki tam tikrų ribų, fermentų aktyvumas didėja. Kai pasiekiama fermentui optimali temperatūra, jo katalizinis aktyvumas būna didžiausias. Daugeliui fermentų optimali temperatūra dažniausiai yra 40–50 °C temperatūroje (optimali augaliniams fermentams yra 50 - 60 ° C, o gyvūninės kilmės fermentams - 40 - 50 ° C). Tačiau optimali temperatūra nėra griežtai pastovi ir priklauso nuo daugelio priežasčių, o ypač nuo šildymo trukmės. Kuo ilgiau veikia fermentas, tuo žemesnė turėtų būti optimali temperatūra. .

Temperatūros diapazone nuo 0 iki 50 °C, temperatūrai didėjant arba mažėjant kas 10 °C, fermentų aktyvumas padidėja arba sumažėja atitinkamai 1,4–2 kartus. Toliau kaitinant fermentų aktyvumas mažėja, ir 80–100 °C temperatūroje fermentai paprastai visiškai praranda savo katalizines savybes dėl baltymų denatūravimo .

Inaktyvacijos (aktyvumo praradimo) temperatūra skirtingiems fermentams yra skirtinga. Taigi fermento amilazės inaktyvacija tirpale vyksta 70 °C temperatūroje, sacharozės – 59, tripsino ir pepsino – 65 °C temperatūroje. Sausoje būsenoje fermentai gali toleruoti kaitinimą iki aukštesnės temperatūros. Tačiau esant labai aukštai temperatūrai, fermentų inaktyvacija įvyksta akimirksniu. Pasterizavimas, sterilizavimas, blanširavimas ir virinimas sunaikina fermentus .

Po terminės inaktyvacijos kai kurie fermentai atkuria savo katalizinį aktyvumą. Pavyzdys – peroksidazė, kuri, net ir kaitinama 60 s iki 150 °C, visiškai nepraranda savo katalizinių savybių. Todėl peroksidazė laikoma termostabiliausiu fermentu.

Esant žemesnei nei 0 °C temperatūrai, fermentų katalizinis aktyvumas smarkiai sumažėja, tačiau išlieka net ir užšaldžius maistą.

Aplinkos reakcija turi didelę įtaką fermentų kataliziniam aktyvumui. Fermentai, veikiami aplinkos pH, keičia savo tirpumą, osmosinį slėgį, klampumą ir kitas savybes. Manoma, kad fermentinio aktyvumo pokyčiai, priklausantys nuo aplinkos pH, yra susiję su pokyčiais jonizacija fermentai, substratas arba fermento-substrato kompleksas .

Fermentai pasižymi optimaliu aktyvumu tik tam tikrose jiems būdingose ​​pH ribose.. Taigi pepsino, kuris išsiskiria į labai rūgščią skrandžio aplinką, aktyvumas yra optimalus, kai pH yra 1,5 ir 2,5. Tuo pačiu metu proteazės, kurias kasa išskiria į dvylikapirštę žarną, turi optimalų aktyvumą šarminėje pH zonoje, o optimalus tripsino veikimas yra 8–9 pH diapazone. Kai pH vertė viršija arba žemesnė už optimalų, fermentų aktyvumas mažėja .

Dauguma fermentų yra aktyviausi neutralioje, silpnai šarminėje arba silpnai rūgštinėje aplinkoje. Kai pH vertė pereina nuo optimalios į rūgštinę arba šarminę, fermentų aktyvumas mažėja.

Aktyvatoriai ir inhibitoriai(paralyžiatoriai) fermentų gali atitinkamai sustiprinti arba susilpninti ir net sustabdyti jų veiklą. Aktyvatoriai fermentai yra metalo jonai: Na + , K + , Rb + , Mg 2+ , Ca 2+ , Cu 2+ , Fe 2+ ir junginiai, turintys sulfhidrilo grupių: SH, HCN, H 2 S . Nurodytų metalų ar junginių buvimas tirpale tam tikra koncentracija prisideda prie visiško kai kurių fermentų aktyvumo pasireiškimo.

Visi fermentai yra jautrūs slopinimui dėl fermento baltymo denatūravimo arba sunaikinimo.

Inhibitorių veikimo esmė daugeliu atvejų yra ta, kad jie susijungia su aktyviomis fermento molekulės grupėmis arba aktyviais centrais. Išskirti bendrieji ir specifiniai inhibitoriai . KAM bendrieji inhibitoriai kurios slopina visų fermentų veikimą , apima sunkiųjų metalų druskos (švinas, sidabras, gyvsidabris), trichloracto rūgštis ir taninas . Dažnai fermentų veikimo slopinimas arba nutrūkimas, veikiant sunkiųjų metalų, yra grįžtamas, o jei į terpę dedama medžiagų, kurios sudaro junginius su šiais metalais, fermentų aktyvumas atsistato.

Specifiniai inhibitoriai veikia tik tam tikrus fermentus. Taigi vandenilio cianido rūgštis veikia tik oksidacinius fermentus, kurių aktyviajame centre yra geležies arba vario. Ciano rūgštis susijungia su metalais, ir fermentas praranda aktyvumą.

Gyvoje ląstelėje fermentų veikimo reguliavimas vyksta ne tik specifinių aktyvatorių ir inhibitorių pagalba, bet ir jungiantis fermentus prie įvairių koloidinių protoplazmos struktūrų. Šis fermentų prisijungimas lemia jų aktyvumo praradimą. Fermento išsiskyrimas iš junginio vėl atkuria jo katalizinį aktyvumą.

Fermentai inaktyvuojamas esant labai aukštam slėgiui . Tačiau pašalinus slėgį fermentai atkuria katalizinį aktyvumą.

Sausame maiste fermentų veikimas labai sulėtėja, tačiau visiškai nenutrūksta. Fermentų veiklos rezultatai gali pasireikšti produkto kokybės pokyčiais – jo patamsėjimu, aromato, skonio, konsistencijos pablogėjimu ir kt.

Daugumos fermentinių reakcijų greitis yra proporcingas fermento koncentracijai, bent jau ankstyviausiose stadijose. Po pradinių etapų fermentinių reakcijų greitis mažėja.

Fermentas sudaro kompleksą su substratu, kuris disocijuoja į laisvą fermentą ir galutinį reakcijos produktą:

kur E yra fermentas; S – substratas; ES – fermento-substrato kompleksas; P – galutinis produktas.

Substrato kiekis yra labai didelis lyginant su fermento kiekiu, todėl substrato koncentracija labai įtakoja fermentinių reakcijų greitį. Jei substrato yra didelis perteklius, susidarančio produkto kiekis yra proporcingas laikui. Mažėjant substrato koncentracijai, mažėja per laiko vienetą susidarančio galutinio produkto (P) kiekis.

Fermento buvimas tirpale vertinamas pagal jo veikimą. Taigi, apie amilazės buvimą seilėse galima spręsti pagal seilių gebėjimą sucukruoti krakmolą, o skrandžio pepsino buvimą – pagal gebėjimą pakankamai greitai ištirpinti kiaušinio baltymą ar fibriną.

Reguliuodami fermentų aktyvumą, sukurdami atitinkamą reakcijos aplinką, galite kontroliuoti jų katalizuojamų reakcijų greitį, taip pat maisto produktuose esančių fermentų aktyvumą, o tai leidžia vykdyti grūdų, bulvių laikymo priemones. , vaisiai ir daržovės, daugelio produktų (vyno, arbatos ir kt.) gamyba.

Fermentų nomenklatūra ir klasifikacija

Pradiniame fermentų tyrimo vystymosi etape jiems buvo suteikiami pavadinimai be konkrečios sistemos, remiantis atsitiktinėmis charakteristikomis, substrato pavadinimu arba katalizuojamos reakcijos tipu. Taigi, fermentas pepsinas gavo savo pavadinimą iš graikiško žodžio „pepsis“ – aš virškinu, papainas – iš papajų augalo sulčių, kuriose gausu fermento. Taip atsitiko, kad atskiri autoriai tam pačiam fermentui suteikė skirtingus pavadinimus.

Sparčiai vystantis fermentų mokslui – fermentologijai, 1961 m. Tarptautinės biochemijos sąjungos nuolatinis fermentų komitetas sukūrė modernią fermentų nomenklatūrą ir klasifikaciją. Pagal šią klasifikaciją fermento pavadinimas buvo sudarytas iš cheminio substrato pavadinimo ir fermento atliktos reakcijos pavadinimo. Į lotynišką substrato šaknies pavadinimą, kurį veikia fermentas (sacharozė - sacharozė), arba į šio fermento katalizuojamo proceso pavadinimą (hidrolizė – hidrolazės), pridėta pabaiga"aza". Kartu su naujais daugelio fermentų pavadinimais išliko ir senieji, kurie tvirtai įsitvirtino mokslinėje literatūroje (pepsinas, tripsinas, papainas ir kt.).

Pagal šiuolaikinę klasifikaciją visi fermentai skirstomi į šeši klasės: oksidoreduktazės; transferazės; hidrolazės; liazės; izomerazės; ligazės (sintetazės) . Fermentai klasifikuojami pagal jų veikimo pobūdį.

Kiekviena klasė skirstoma į poklasius, o kiekvienas poklasis – į grupes.

Oksidoreduktazės

Tai fermentai, kurie katalizuoja redokso reakcijos kurie atsiranda gyvuose organizmuose. Medžiagų oksidacijos reakcijas organizmuose visada lydi redukcijos reakcijos. Oksidoreduktazės skirstomos į 14 poklasių (plačiausia fermentų klasė).

Oksidacija vyksta kaip vandenilio (elektronų) pašalinimo iš substrato procesas, o redukcija vyksta kaip vandenilio atomų (elektronų) pridėjimas prie akceptoriaus. Šią reakciją galima schematiškai pavaizduoti taip:

AN 2 + B = A + VN 2,

kur AN 2 yra medžiaga, kuri atiduoda vandenilį ir vadinama donore; B yra medžiaga, kuri paima vandenilį ir vadinama akceptoriumi.

Gali oksiduotis įvairios medžiagos – angliavandeniai, riebalai, baltymai, aminorūgštys, vitaminai ir kt.

Oksidoreduktazių vaidmenį gyvuose audiniuose atlieka plačios grupės dehidrogenazės Ir oksidazės , kurie pavadinti priklausomai nuo substrato, kurį jie oksiduoja. Taigi, obuolių rūgštį dehidratuojantis fermentas vadinamas malato dehidrogenaze, etilo alkoholį dehidrogenuojantis – alkoholio dehidrogenaze ir kt.

Oksidoreduktazių klasėje pagrindinės yra dehidrogenazės, kurios atlieka dehidrogenizacijos reakciją. Visos dehidrogenazės skirstomos į dvi grupes : anaerobiniai ir aerobiniai, kurie vadinami oksidazėmis .

Anaerobinės dehidrogenazės yra specifiniai fermentai, kurie katalizuoja vandenilio gavyba nuo tam tikrų cheminių medžiagų ir perduodant ją kitiems fermentams – vandenilio nešėjams. Šios dehidrogenazės yra dviejų komponentų fermentai, kuriuose kofermentas lengvai atskiriamas nuo baltyminės dalies. Kaip kofermentas Anaerobinėse dehidrogenazėse gali būti dvi medžiagos – nikotino amido adenino nukleotidas ( AUKŠČIAU ) arba nikotino amido adelino nukleotido fosfatą ( NADP ). Abi šios medžiagos pasižymi išskirtinai aukštomis reaktyviosiomis redokso savybėmis.

Yra žinoma daug anaerobinių dehidrogenazių, kurios katalizuoja įvairių organinių junginių oksidaciją. Taigi, laktatdehidrogenazė katalizuoja pieno rūgšties oksidaciją į piruvo rūgštį, izocitrato dehidrogenazė – izocitro rūgšties oksidaciją į oksalo-gintaro rūgštį.

Į grupę aerobinės dehidrogenazės (oksidazės) apima fermentus, kuriuose yra kaip kofermentas įskaitant vitaminas B2 , (riboflavinas ), todėl tokie fermentai vadinami flavinas . Flavino fermentai gali pašalinti vandenilį iš oksiduojamos medžiagos ir perkelti jį į kitus junginius arba deguonį ore:

2H 2 O 2 → 2H 2 O + O 2.

Paimdama vandenilį iš oksiduojamos medžiagos ir perkeldama jį į oro deguonį, oksidazė gali sudaryti vandenį arba vandenilio peroksidą (H 2 O arba H 2 O 2). Šiai fermentų grupei priklauso polifenolio oksidazė, askorbato oksidazė ir gliukozės oksidazė.

Polifenolio oksidazė yra aerobinė dehidrogenazė, kuriai Vandenilio akceptorius yra deguonies dujos .

Jis veikia o-difenolius, polifenolius, taninus ir tiroziną. Polifenolio oksidazė plačiai paplitusi grybuose ir aukštesniuose augaluose, ypač žaliosios arbatos lapuose. Polifenoloksidazės veikimas paaiškina perpjauto vaisių ir daržovių, bulvių minkštimo patamsėjimą, taip pat šviežių arbatos lapelių patamsėjimą kočiojus. Polifenolio oksidazė vaidina svarbų vaidmenį kaip tarpinė augalų kvėpavimo medžiaga.

Fermentas peroksidazė kartu su polifenolio oksidaze ir citochromo oksidaze aktyviai dalyvauja augalų kvėpavimo procesuose ir augalų apsaugos reakcijose nuo augalų patogeninių mikroorganizmų.

Aktyvioje peroksidazės grupėje yra geležies . Naudojant fermentą peroksidazę dėl vandenilio peroksido ir kai kurie kiti organiniai peroksidai, vyksta organinių junginių oksidacija. Peroksidazė sudaro sudėtingą organinį junginį, dėl kurio peroksidas aktyvuojamas ir įgyja gebėjimą veikti kaip vandenilio akceptorius:

Daugelis organinių junginių reaguoja su atmosferos deguonimi ir sudaro peroksidus. Peroksidai ypač lengvai susidaro, kai atmosferos deguonimi oksiduojasi nesočiųjų jungčių turintys junginiai: karotinoidai, nesočiosios riebalų rūgštys, kai kurie angliavandeniliai.

Fermentas katalazė katalizuoja vandenilio peroksido skaidymo į vandenį ir deguonį procesą:

Katalazės molekulėje, kaip ir peroksidazėje, yra geležies . Pagrindinė katalazės paskirtis organizme – sunaikinti ląstelėms kenksmingą vandenilio peroksidą, susidarantį kvėpavimo metu.

Fermentas lipoksigenazė katalizuoja peroksidų ir hidroperoksidų susidarymą oksidacinio riebalų gedimo metu.

Kaip matyti iš fig. 46, daugumoje sistemų galima nustatyti laikotarpį, per kurį gedimų dažnis yra pastovus:

λ(t) = λ = konst.

Jei gedimų dažnis tam tikru laikotarpiu yra pastovus ir nėra laiko funkcija, tai pagal (3.64) lygtį patikimumo funkcija turi tokią formą

P(t) = e -λt . (3,70)

Šis eksponentinis dėsnis labai plačiai naudojamas patikimumo teorijoje.

Akivaizdu, kad gedimo pavojus λ šiuo atveju turi fermento inaktyvacijos greičio konstantos k reikšmę ir yra susijęs su tam tikru fizikiniu ir cheminiu procesu aktyviame fermento centre, dėl kurio prarandamas katalizinis aktyvumas.

Taigi (3.70) lygties eksponentas leidžia interpretuoti du būdus. Cheminės kinetikos požiūriu tai yra fermento E pavertimo neaktyvia forma E i monomolekulinės reakcijos greičio konstanta, tai yra gedimo greitis. Akivaizdu, kad savo fizine prasme šios sąvokos yra lygiavertės ir atspindi elementarių fermentų molekulių inaktyvavimo veiksmų dažnį.

Vidutinis statistinis visų pagal eksponentinį dėsnį inaktyvuoto katalizatoriaus molekulių veikimo laikas yra lygus

T 0 = 1/k. (3,71)

Taikant patikimumo teoriją labai lengva padaryti keletą svarbių kokybinių išvadų apie sudėtingų daugiafermentinių sistemų inaktyvavimo kinetinius modelius. Darbuose nagrinėjami kinetinės kelių fermentų sistemų inaktyvavimo modeliai, darant prielaidą, kad kiekvienas fermentas yra inaktyvuotas pagal eksponentinį dėsnį.

Panagrinėkime daugiafermentinę sistemą, kurioje dalyvauja n fermentų, kurie yra inaktyvuoti pagal eksponentinį dėsnį. Daugiafermentinėse sistemose, kurios pradinį substratą paverčia galutiniu reakcijos produktu, bet kurio fermento inaktyvavimas praranda visos sistemos katalizinę funkciją. Jei fermentai inaktyvuojami nepriklausomai vienas nuo kito, visos sistemos veikimo be gedimų tikimybė bus lygi kiekvieno grandinės fermento veikimo be sutrikimų tikimybių sandaugai. Patikimumo funkcija turi formą

P(t) = P 1 (t) ... P i ... P n (t).(3.72)

Jei kiekvieno fermento inaktyvacija vyksta intensyviai

P i (t) = e -λ i t , (3,73)

lygtį (3.73) pakeitus lygtimi (3.72), gaunama funkcija

Vidutinis veikimo laikas bus

(3.75)

Didžiausią indėlį į sumą (šios lygties vardiklį) įneša greičiausi kinetiniai inaktyvavimo procesai, taigi, vidutinį multifermentinių sistemų veikimą be sutrikimų lemia labiausiai labilių baltymų stabilumas. Jei fermento grandinėje yra labilus baltymas, kuris inaktyvuojamas greičiau nei kiti multifermentinės sistemos baltymai, šio konkretaus fermento inaktyvacija pasireikš visos sistemos inaktyvacijos kinetika.

Panagrinėkime fermentų sistemą, veikiančią lygiagrečiai, katalizuojančią tą pačią reakciją ir inaktyvuojančią skirtingu greičiu. Jei yra savavališkas skaičius fermentų frakcijų, kurios skiriasi aktyvumu ir stabilumu, atitinkamos patikimumo funkcijos analizė leidžia gauti lygtį

(3.76)

kur a j, λ j yra atitinkamai kiekvienos fermento frakcijos pradinis aktyvumas ir inaktyvacijos greičio konstantos; O 0 yra pradinės veiklos arba užregistruoto sistemos katalizinio aktyvumo pradiniu momentu suma.

Svarbu pažymėti, kad lygiagrečiai veikiančių fermentų sistemos vidutinį be sutrikimų veikimą lemia aktyviausia (didžiausia a j) arba stabiliausia (mažiausia λ j) fermentų frakcija. Tai išskiria šią sistemą nuo nuosekliai veikiančių katalizatorių sistemos, kurioje patikimumą lemia labiausiai labilus baltymas.

Fermentai, susijungę į sistemas ir vykdantys nuoseklių substratų transformacijų grandinę, paprastai turi skirtingą atsparumą inaktyvuojantiems poveikiams. Dėl šios priežasties daugiafermentinės sistemos inaktyvavimo procese gali pasikeisti ribojimo stadija. Įsivaizduokime, kad lėčiausiai dirbantis fermentas, kurio reakcijos greitis lemia visos sistemos aktyvumą, yra gana stabilus. Be to, jei vienas iš grandinės fermentų greitai praranda savo aktyvumą, susidaro situacija, kai proceso greitį lemia būtent šio, labiausiai labilaus fermento aktyvumas. Taigi, sistemai išjungus, ribojimo pakopa pasikeičia. Tai turėtų turėti įtakos inaktyvavimo kinetikai.

Panagrinėkime linijinę daugiafermentinę grandinę. Remiantis analize, tam tikromis sąlygomis proceso, kuriame dalyvauja n fermentų, pastovus greitis apibūdinamas lygtimi

(3.77)

čia [S] 0 yra pradinė pirmojo substrato koncentracija; υ i, K i – kiekvienos grandinės atkarpos didžiausias greitis ir Michaelio konstanta. Panagrinėkime atvejį, kai grandinėje yra du fermentai, kurių kinetiniai parametrai K i /υ i yra didžiausi ir palyginami. Jei parametro K i /υ i vertės likusiems grandinės fermentams yra žymiai mažesnės už šio parametro reikšmę dviem fermentams, stacionaraus greičio lygtis bus tokia forma.

(3.78)

kur indeksai i ir j apibūdina kiekvieno fermento parametrus.

Tarkime, kad abiejų fermentų inaktyvacija vyksta pagal eksponentinį dėsnį, ty kiekvienas fermentas yra inaktyvuojamas su gedimo dažniu λ i ir λ j, kuris laikui bėgant yra pastovus. Patikimumo funkcija turi formą

(3.79)

kur A i = k cat, i 0 .

Sistemos kinetinį elgesį inaktyvavimo proceso metu lemia kinetinių parametrų santykis

(3.80)

ir dviejų fermentų gedimo dažnių skirtumas. Panagrinėkime tris svarbiausius specialius atvejus:

1. Abiejų grandinės fermentų gedimo laipsniai yra vienodi.

λ i = λ j (3,81)

Patikimumo funkcija turi formą

P(t) = e -λ i t .(3,82)

Proceso kinetika priklauso nuo bet kurio fermento gedimo greičio, neatsižvelgiant į tai, kuris fermentas riboja daugiafermentinės reakcijos greitį. Tai pats paprasčiausias atvejis.

2. Procesą riboja grandinės fermentas j, kuris inaktyvuojamas daug greičiau nei kiti. Tai atitinka sąlygas

α = (A i /K i)/(A j /K j) >> 1; λi

Patikimumo funkcija pateikiama lygtimi

P(t) = e -λ j t . (3,84)

Sistemos inaktyvavimo kinetika yra eksponentinė. Sistemos patikimumą ir vidutinį veikimo laiką lemia greitį ribojančio fermento gedimo dažnis.

paieškos rezultatai

Rasti rezultatai: 25841 (0,82 sek.)

Nemokama prieiga

Ribotas priėjimas

Licencijos atnaujinimas patvirtinamas

1

PROTEOLITINIŲ FERMENTŲ BALTYMŲ INHIBITORIAI ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ DAKTARAS

Šio darbo tikslas – ištirti subtilius proteazės inhibitorių reakcijos mechanizmus. Tiek teoriniu, tiek praktiniu požiūriu nepaprastai svarbu ištirti proteolizės inhibitorių biologines funkcijas, ypač aukštesniuosiuose augaluose, taip pat ištirti imobilizuotų baltymų inhibitorių, kaip biospecifinių sorbentų, panaudojimo galimybes proteolitiniams fermentams izoliuoti iš įvairių objektų naudojant afinitetą. chromatografija

Tačiau pakartotinis fermento apdorojimas acto rūgšties anhidridu sukelia visišką inaktyvaciją.<...>Likučių reikšmė sudaro fermentų katalizinį centrą.<...>Laisvas fermentas 2. Fermentas + ekstraktas 3. Fermentas * zlgat pH 7,6 4.<...>vartojimo arba saugojimo procesas gali sukelti modifikuotų fermentų formų susidarymą arba jų inaktyvavimą<...>(Oteuka, Price, I974; Prlngle., 1975) Laboratorinėje praktikoje susijusių proteazių inaktyvavimui

2

PEPTIDAI IR JŲ SĄVEIKA SU AMINOACIL-RNR SINTAZĖMIS ABSTRAKTINIS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: MASKAVOS VALSTYBINIS UNIVERSITETAS, PAVADINTAS M. V. LOMONOSOVU

Išvados. 1. Įvairių baltymų fermentiniai hidrolizatai skatina mikroorganizmo Z. cassi augimą. Stimuliuojančio poveikio dydis priklauso ir nuo baltymo tipo, ir nuo hidrolizę atliekančio fermento pobūdžio.

Reakcija vyksta pagal šią schemą. fermentas + AT9*I0OS-CH(Shl)-R ^ * fermentas -AMP-OS-SHM)-/?<...>JpH-5-fermentas j deucine/md 1 j prieš inkubaciją Hidrolizė I !<...>T2 paratamį aktyvuojantys fermentai.<...>/substrato koncentracijos įtaka, fermentas, AT$ ir MP, substrato specifiškumas/.<...>„Ph-5 fermentų preparatuose iš žiurkių kepenų esančių peptidazių prigimtis“.

3

KONKREČIAI VIETOVĖS APRIBOJIMŲ ENDONUKLIAZIŲ IŠSKYRIMAS IR CHARAKTERISTIKOS NUO CIANOBAKTERIJŲ PAGAL Įprastą IR VIRUSINĖS INFEKCIJOS METU ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

UKRAINOS TSR MOKSLŲ AKADEMIJOS LENINO IR DRAUGYSTĖS ORDINAS

Mūsų darbo tikslas – ištirti kai kuriuos virulentinio cianofago N-2 sąveikos su heterocistinės gijinės cianobakterijos Nortoclinckia ląstelėmis, vnt. Rlenk 387/7. Šiuo atveju didžiausias dėmesys buvo skiriamas ląstelių ir virusų sukeltų restrikcijos fermentų bei šeimininko DNR fermentinės hidrolizės tyrimams infekcijos metu.

Tačiau naujų fermentų paieškos problema neprarado savo aktualumo.<...>Nustatykite išgrynintų restrikcijos fermentų atpažinimo vietas ir pjovimo tašką. 4.<...>Buvo sukurtos atpažinimo vietos ir nustatytas fermento Nil 387/7 I pjovimo taškas.<...>ir 0,7-0,82 M NaCl kitam fermentui.<...>„Fermentų gamybos, analizės ir naudojimo metodai“. Jūrmala, 1990. P. 4 2. 5 . Melnikas.A.I.

4

T-LIMFOCITAI KARVIŲ REPRODUKTINĖS FUNKCIJOS ATSTATYMAS PO apsiveršiavimo ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

VISO RUSIJA VALSTYBINĖS TYRĖJAS

Šio darbo tikslas – nustatyti galimą tiesioginį antibakterinį aktyvumą prieš tarpląstelinius patogenus galvijų T-limfocituose; tirtas T limfocitų imunoprotekcinis vaidmuo atkuriant karvių reprodukcinę funkciją po apsiveršiavimo, taip pat išsiaiškinta galimybė sutrumpinti šios funkcijos atsigavimo laiką aktyvinant vietinį gimdos audinio imunitetą.

pirmojo apvaisinimo skaičius 7 6% 50,0±13,3 40,1±12,6 per 90 dienų. skaičius 12 11% 85,8±9,3 73,3111,4 "inaktyvavimas<...>pirmojo apvaisinimo skaičius 23 16% 53,5±7,6 42,1±8,0 per 90 dienų. skaičius 39 23 % 90,7±4,4* 71,1±7,4* inaktyvacija

5

NAUJŲ VYNŲ STABILIZAVIMO IR KONTROLĖS BŪDŲ KŪRIMAS ABSTRAKTAS DIS. ... TECHNIKOS MOKSLŲ DAKTARAS

VISŲ SĄJUNGOS RAUDONOJI DARBO TYRIMŲ INSTITUTO „MAGARACH“ TARKAS

Darbo tikslas. Metodologiškai vynų stabilizavimo problemos sprendimas buvo pagrįstas sistemingu požiūriu į galimą vynų nestabilumą atskirų tipų drumstumui ir jų sudėtingoms apraiškoms įvertinti, vėliau kuriant naujus vynų stabilizavimo iš šios bazės metodus.

1967), dėl visos sąjungos Sozetsanipo dėl mikroorganizmų fermentų biosintezės ir jų naudojimo liaudyje.<...>Kai kalcio kiekis terpėje yra 20-30 mg/d, fermento aktyvumas sumažėja perpus.<...>fermentai.<...>Per 21 dieną nepertraukiamai veikiant reaktoriui, fermentų aktyvumas sumažėjo per pusę.<...>A.S. 536192 (TSRS) Fermentų imobilizacijos metodas (Pavlenko N.

6

GRYBŲ B-GLUKOZIDAZĖS GEETRIOHWIS CAADIDNE ZS ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: TSRS MOKSLŲ AKADEMIJA A. N. BACH VARDU LENINO BIOCHEMIJOS INSTITUTO UŽSAKYMAS

Tyrimo tikslas ir uždaviniai. Šio darbo tikslas buvo ištirti įvairias b-gliukozidazės formas pramoniniame fermentų preparate „Cellocandin I 10x“, gautą iš celiuliozę ardančio grybelio Geo trichura oandidum ZS kultūros skysčio filtrato.

fermentas lekulė, molekulės angliavandenių komponento sudėtis.<...>Fermento išeiga buvo apie 9% aktyvumo ir 0,13? pagal baltymus.<...>Išskirtas fermentas yra polisacharidas (arabogdEsuroEoxylan<...>Vtsroo Bseseyazn. sojoshč. skrandžio organizmų fermentai. Minskas, 1978, spalis, santrauka. ataskaita, p. 76.4.<...>"Labai išgrynintų fermentų gavimo metodai." -Vilnius, 1973, pirštas. ataskaita, p.94-95. 5.

7

KRAUJO BIOCHEMINIŲ RODIKLIŲ NAUDOJIMO EFEKTYVUMAS, VERTINANT KARAKULIŲ VEISLĖS SRAMS VEISLINĖS KOKYBĖS DIS. ... ŽEMĖS ŪKIO MOKSLŲ KANDIDATAS

VISOS SĄJUNGOS GYVŪNINKYSTĖS TYRIMŲ INSTITUTAS

Šio tyrimo tikslas – sukurti moksliškai pagrįstą Karakul avinų palikuonių kokybės vertinimo metodą, parenkant gyvūnus pagal jų biocheminį individualumą.

Prieš nustatant fermentų aktyvumą Autorių teisės UAB "CDB "BIBKOM" & LLC "Agentūra Kniga-Service" b.<...>Iš jų 6 galvos su dideliu fermento aspartato aminotransferazės aktyvumu, 6 galvos vidutinės ir 6 galvos<...>Avinų kraujo fermentų aktyvumas taip pat priklausė nuo RAŽUOTOJŲ amžiaus.<...>Fermentų aktyvumas 1Nukjajevo suma" ?<...>Terjerų Karakul avių vystymosi požymiai, kuriuose gali būti intiknisg fermentų aspartato

8

KAI KURIŲ TETRAPLODINIŲ IR TEKSAPLODINIŲ KVIEČIŲ RŪŠIŲ GENOMŲ SUDERINAMUMAS SU T. TIMOPHEEVI CITOPAZMA SANTRAUKA DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: MASKAVOS LENINO ORDINAS IR DARBO ŽEMĖS ŪKIO AKADEMIJOS RAUDONOSIOS REKLAPOS ORDINAS, PAVADINTAS K. A. TIMIRIAZEVO VARDUO

Uždaviniai: 1. Ištirti kai kurių heksaploidinių ir tetraploidinių kviečių rūšių genomų suderinamumą su T. timopheevi citoplazma ir tuo pačiu pabandyti išskirti pačių genomų poveikį ir sąveikas; 2. Ištirti vaisingų formų ir formų, gautų kryžminimo būdu, mejozę ir mikrosporogenezę; TVS eilutės X rodinys. 3. Atlikti kai kurių rūšių kviečių vaisingų formų generatyvinių organų ir jų sterilių analogų citocheminį tyrimą (esant T. timopheevi citoplazmą sterilizuojančiam poveikiui).

1,0 1,5 2,0 1,0. 1,5 1,2 1,1 Autorių teisės UAB Centrinė klinikinė ligoninė BIBKOM & LLC Kniga-Paslaugų agentūra Fermentų veikla<...>Fermentai.<...>fermentai.<...>Fermentų aktyvumas buvo nustatytas žiedadulkėse, kiaušidėse ir stigmoje. peroksidazė.<...>Kai kurių medžiagų ir fermentų kiekio sumažėjimas sterilių kviečių formų kiaušidėse ir stigmos

9

PALYGINAMI DUOMENYS APIE KAI KURIŲ GLIKOLITINIŲ FERMENTŲ AKTYVĄ BULIŲ IR ŠERNŲ SPERMA ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

LVIV VETERINARIJOS INSTITUTAS

Straipsnyje pateikiami adenozino trifosfatazės, fosfoheksoizomerazės, fosfogliukomutazės, aldolazės ir fruktozės-1,6-bifosfatazės aktyvumo bulių ir šernų spermoje lyginamojo tyrimo rezultatai, taip pat gamintojų seksualinio išnaudojimo režimo įtaka aktyvumui. tirtų fermentų.

Fermentų pasiskirstymas tarp lytinių ląstelių ir plazmos taip pat nėra vienodas.<...>Šis fermentas randamas abiejų gyvūnų rūšių spermoje.<...>(Fermento P sumažėjo.<...>Didelis ATPazės fermento kiekis 10.<...>Insulino poveikis kai kurių fermentų aktyvumui bulių spermoje.

10

AKTINOMICETŲ PROTEOLITINIO KOMPLEKSO IDENTIFIKACIJA IR KAI KURIOS YPATUMAI ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

Darbo tikslai. Šis darbas skirtas kai kurių aktinomicetų proteolitinio komplekso ypatybių tyrinėjimui

.; :"Šie fermentai atlieka svarbų reguliavimo vaidmenį koordinuojant apyvartą (skilimo £r = 5 sintezė<...>";. "Fermentų šaltiniai yra oligoidiniai ""v7 ;>^ ".;"." -" .<...>Preliminarus pieno virimo fermentų komplekso gryninimas buvo atliktas pagal visuotinai priimtą metodą<...>Optimali pH reikšmė „.-.“ pasireiškimui: fermentų aktyvumas. . . . „ " " " " ".<...>aktinomija-.;..^ dirbtuvės, kaip ir panašūs kitų mikroorganizmų fermentai, turėjo platesnius intervalus

11

SODD-PODZOL DIRVOŽIŲ BIOLOGINĖ VEIKLA IR JO KITA durpių MINERALINIŲ MIŠINIŲ ĮTAKA ABSTRAKTAS DIS. ... ŽEMĖS ŪKIO MOKSLŲ KANDIDATAS

BALTARUSIJA DARBO ŽEMĖS ŪKIO AKADEMIJOS RAUDONOJI RAUDONOJI REKLAMENTAS

SODD-PODZOL DIRVOŽIŲ BIOLOGINĖ VEIKLA IR JO KITIMAS DĖL durpių MINERALINIŲ MIŠINIŲ ĮTAIKOS

Dirvožemio fermentų aktyvumo priklausomybė nuo aplinkos sąlygų Fermentų aktyvumas priklauso nuo daugelio veiksnių<...>Čia atsispindi viena iš būdingų fermentų savybių – labilumas.<...>Tačiau jei organizmo fermentams šios priklausomybės yra visiškai aiškios, tai dirvožemio fermentams<...>Aplinkos sąlygos turi didelę įtaką fermentų aktyvumui dirvožemyje.<...>Priešingai, sumažėjus dirvožemio drėgmei, sumažėja jo fermentų aktyvumas.

12

FIZIOLOGINIS ŽEMĖS ŪKIO AUGALŲ ŠĖRIMO LAPIJA DERINIMO SU CHEMINIU RAJAVIMU (KUKURŪZŲ IR SORŲ PAVYZDŽIO) PAGRINDIMAS SANTRAUKA DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

Pabandėme ištirti fiziologinius žemės ūkio augalų šėrimo lapais ir jų cheminiu ravėjimu derinimo pagrindus, glaudžiai siedami su biochemijos, biofizikos ir augalininkystės klausimais. Ši disertacija skirta mineralinių trąšų ir herbicidų bendro naudojimo kukurūzų ir sorų pasėliuose teorijai ir praktikai.

13,9 14,8 L « 100 135,1 143,3 152,6 Eksperimentai taip pat parodė kitų kvėpavimo fermentų aktyvumo padidėjimą<...>Mūsų eksperimentuose kvėpavimo intensyvumas, kaip taisyklė, atitiko oksidacinių fermentų aktyvumą.<...>Ateityje šių fermentų aktyvumas padidės: azoto trąšų įterpimas į herbicido tirpalą<...>sušvelnina inicijuojantį 2,4-dichlorfenoksiacto rūgšties poveikį oksidacinių fermentų aktyvumui<...>augalai: "vandens mainai, fotosintezė, fitochromų sintezė, kvėpavimas ir kai kurių oksidacinių fermentų aktyvumas

13

KAI KURIE ANGLIAVANDENIŲ APYKAITĖS RODIKLIAI VIŠČIAMS PRIKLAUSO NUO AMŽIAUS IR FIZIOLOGINĖS KŪNO BŪKLĖS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

CHARKIVO VETERINARIJOS INSTITUTAS

Šiame darbe pateikiami rusų baltųjų viščiukų angliavandenių apykaitos kai kurių aspektų tyrimų rezultatai embriogenezės pabaigoje ir gana ilgą jų postnatalinės ontogenezės laikotarpį.

Su amžiumi susijusi pagrindinių angliavandenių metabolitų kiekio ir angliavandenių fermentų aktyvumo dinamika<...>Angliavandenių apykaita kiaušintakyje, taip pat atitinkamų fermentų aktyvumas<...>Fermento aktyvumas buvo išreikštas μg fosforo 100 mg audinio.<...>Taigi embriogenezės metu fermentų aktyvumas yra palyginti mažas.<...>Yra žinoma. kad šis fermentas taip pat atlieka vaidmenį glikogeno sintezėje./. .

14

TABAKO CHEMINĖS IMUNIZACIJOS PRIE JUODOS ŠAKNĖS PUVINIO BŪDAI ABSTRAKTINIS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

CHARKIVO DARBO ŽEMĖS ŪKIO INSTITUTO RAUDONOSIOS REKLAPOS ĮSAKYMAS V. V. DOKUČAJEVO PAVADINIMAS

TABAKO CHEMINĖS IMUNIZACIJOS NUO JUODŲJŲ ŠAKNŲ PUVINO METODAI

Apdorojimas prieš sėją augaluose suaktyvina VV fermentus, o tai teigiamai veikia tekėjimą<...>Paveiktas juodojo šaknų puvinio, augaluose pakinta kvėpavimo fermentų veikla

15

TRIUŠIO RAUMENŲ GLIKOGENO FOSFORILAZĖ – KETVERTARINĖ STRUKTŪRA IR REGULIAVIMO SAVYBĖS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ DAKTARAS

M.: A. N. BACH VARDU LENINO BIOCHEMIJOS INSTITUTO UŽSAKYMAS

Šio tyrimo tikslai daugiausia buvo tokie. 1. Fosforilazių B ir A disociacijos iš triušio raumenų į subvienetus sąlygų tyrimas, siekiant gauti papildomos informacijos apie fermento ketvirtinę struktūrą, subvienetų savybes ir tarpusavio ryšių pobūdį. 2. Išaiškinti piridoksalo-5-fosfato dalyvavimo išlaikant ketvirtinę fosforilazės struktūrą klausimą.

Fosforilazė priklauso reguliuojančių fermentų klasei, turinčiai „... ketvirtinę struktūrą.<...>Tai galima paaiškinti specifiniu cisteino poveikiu fermento struktūrai.<...>Trečiojo tipo sluoksniai pastebimi daugiausia ant burokėlių paruoštų fermentinių preparatų.<...>Sukeltas kai kurių piridoksalio fermentų optinis aktyvumas.<...>Cheminis fermentų modifikavimas kaip vienas iš būdų reguliuoti jų veiklą.

16

Buvo atliktas I tipo glutationo peroksidazės – fermento, kuris atlieka pagrindinį vaidmenį organizmo antioksidacinėje gynybos sistemoje – terminės inaktyvacijos kinetikos tyrimas. Įrodyta, kad 37°C temperatūroje oligomerinė glutationo peroksidazė yra inaktyvuojama monomolekuliniu mechanizmu. Buvo pasiūlytas efektyvus fermento stabilizavimo būdas naudojant skirtingo pobūdžio polielektrolitus.

Būtent prie šios pH vertės buvo tiriami fermentų inaktyvacijos kinetinės dėsningumai, kurie<...> <...>Nustatyta, kad esant 1, 10 ir 100 kartų minėtų polimerų pertekliui, fermentas inaktyvuojamas.<...> <...>

17

FOTODINAMINĖS FERMENTŲ INAKTYVAVIMO MECHANIZMO TYRIMAS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

Šio tyrimo tikslas buvo eksperimentiškai patikrinti šią prielaidą, įrodyti paslėptų baltymų substrato pažeidimų buvimą PDE metu, ištirti jų pobūdį ir indėlį į bendrą žalą, taip pat ištirti fotodinaminės žalos baltymams efektyvumą (kvantinę išeigą). , problema, kuri praktiškai nebuvo išplėtota, bet vis dėlto svarbi norint išsiaiškinti tiek ląstelės fotodinaminės reakcijos mechanizmą, tiek baltymo substrato struktūrines ypatybes.

<...>KONDAKOVA Fermentų fotodinaminės inaktyvacijos mechanizmo tyrimas Disertacijos santrauka<...>Miozino tirpalų apšvietimas metileno mėlynu ore sukelia fermento inaktyvavimą pagal įstatymą<...>Spalvos atkūrimą lydi dalinis fermento inaktyvavimas („deguonies“ poveikis).<...>Šiuo tikslu buvo ištirtos fermentų inaktyvavimo priklausomybės nuo Vine įvairiuose jų koncentracijų diapazonuose:

18

FERMENTŲ RADIACINĖS INAKTYVAVIMO MECHANIZMO TYRIMAS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ DAKTARAS

M.: TSRS MOKSLŲ AKADEMIJOS BIOLOGINĖS FIZIKOS INSTITUTAS

Palyginus ir analizuojant disertacijoje pateiktus rezultatus, dviejų etapų fermentų spinduliuotės inaktyvavimo procesas pateikiamas taip (13 skyrius). Pirmajame inaktyvacijos etape baltymo molekulėje įvyksta elektroninio krūvio perskirstymas, susidarant ir lokalizuojant elektroninę laisvą vietą.

E I D U S TYRIMAI FERMENTŲ RADIACINĖS INAKTYVAVIMO MECHANIZMO Mokslo konkursui skirtos disertacijos santrauka<...>EI DUS FERMENTŲ RADIACINĖS INAKTYVAVIMO MECHANIZMO TYRIMAS Mokslo konkursui skirtos disertacijos santrauka<...>Taigi, inaktyvuoti fermentus tiek esant „netiesioginiam“, tiek „tiesioginiam“ radiacijos poveikiui<...>(Paslėpta žala fermentų inaktyvavimo metu).<...>Deguonies dalyvavimas sausųjų fermentų inaktyvacijoje. Radiobiologija. 4, 44. Eidus L. X. 1964 m.

19

Santrauka. Enterobacteriaceae šeimos mikroorganizmų atsparumą antibiotikams sukelia kelių mechanizmų derinys, pavyzdžiui, perteklinė beta laktamazių gamyba, sumažėjęs mikrobų ląstelės išorinės membranos pralaidumas (dažniausiai susijęs su porino baltymų praradimu), ir ištekėjimo sistemos buvimas. Ypatingo dėmesio nusipelno metalo-beta laktamazės (MBL), kurių buvimas lemia gramneigiamų mikroorganizmų atsparumą visiems beta laktaminiams antibiotikams (kai kuriais atvejais, išskyrus aztreonamą). Šiuo metu klinikiniam naudojimui patvirtintų karbapenemams atsparių mikroorganizmų MBL inhibitorių nėra. Šio tyrimo pagrindas buvo veiksmingų karbapenemams atsparių mikroorganizmų MBL inhibitorių, patvirtintų klinikiniam naudojimui ir sustiprinančių karbapenemų poveikį, paieška. Darbas buvo atliktas 3 etapais: 1) modelio sistemos sukūrimas naudojant standartinį P. aeruginosa rekombinantinio metalo-beta-laktamazės fermento reagentą, išreikštą E. coli, siekiant įvertinti minimalių slopinamųjų koncentracijų (MIC) padidėjimą. ) karbapenemų prieš anksčiau jautrius gramneigiamų padermių mikroorganizmus in vitro; 2) perspektyvių MBL inhibitorių efektyvumo įvertinimas, esant tam pačiam standartiniam fermentų reagentui; 3) nustatytų inhibitorių gebėjimo sustiprinti karbapenemų poveikį prieš klinikinius gramneigiamų mikroorganizmų, gaminančių MBL, izoliatus įvertinimas, remiantis MIC ir frakcijos slopinimo koncentracijos indeksu (FIC). Standartinis šaškių lentos metodas buvo modifikuotas, siekiant įvertinti kartu vartojamą karbapenemo antibiotiką ir galimą MBL inhibitorių, bisfosfonatinį vaistą, etidrono rūgštį. Naudojant standartinį reagentą rekombinantiniam P. aeruginosa metalo-beta-laktamazės fermentui, išreikštam E. coli, buvo sukurta modelių sistema, leidžianti įvertinti naujų gramneigiamų mikroorganizmų MBL inhibitorių perspektyvas. Buvo nustatytas nuo dozės priklausomas meropenemo MIC lygio didinimo poveikis MBL reagento kiekiui modelio sistemoje, palyginti su etaloninėmis mikroorganizmų padermėmis, kurios anksčiau buvo jautrios antibiotikams. MBL fermento inaktyvacija buvo pastebėta net naudojant mažas bisfosfonato dozes. Tyrimai parodė, kad P. aeruginosa ATCC 27853 bandomosios kultūros logaritminė augimo fazė vėluoja iki 12 valandų, palyginti su kontroline medžiaga. Tuo pačiu metu maksimalios 50 000–100 000 μg/ml etidrono rūgšties dozės visiškai slopino MBL, o dėl meropenemo poveikio referencinės jautrumo vertės lygiu (2 μg) buvo pastebėtas logaritminės mikrobų augimo fazės nebuvimas. /ml). Buvo atskleistas sinerginis poveikis (FIC indeksas

MBL fermento inaktyvacija buvo pastebėta net vartojant mažas bisfosfonato dozes<...>Pradedant nuo 4-os eilės, fermento inaktyvacijos intensyvumas sumažėjo, o 8-oje eilėje jo nebuvimas.<...>Pradedant nuo 5-os eilės, sumažėjo fermentų inaktyvacijos intensyvumas, o 8-oje eilėje buvo pastebėtas augimo trūkumas<...>Ląstelėse be etidrono rūgšties buvo stebimas bandomojo padermės augimas dėl antibiotiko inaktyvavimo fermentu.<...>MBL fermento inaktyvacija buvo nustatyta net vartojant mažas bisfosfonato dozes.

20

KVIEČIŲ SĖKLŲ gemalų lipazė: PARUOŠIAMOJI GAMYBA, SAVYBĖS, VEIKLOS REGULIAVIMAS SANTRAUKA DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

VORONEŽO VALSTYBINIO UNIVERSITETAS

Disertacinio darbo tikslas – gauti vienalytę kviečių gemalų lipazę, ištirti jos fizikines ir chemines charakteristikas, veiklos reguliavimą, taip pat racionalaus kviečių gemalų laikymo ir naudojimo maisto pramonėje sukūrimą ir pagrindimą, atsižvelgiant į 2007 m. katalizinės lipazės savybės.

Fermentų aktyvumo nustatymas.<...>rūgštingumas ir terminė inaktyvacija tirti pH intervale 4-8,5 ir 20-60 °C temperatūroje.<...>Pakėlus temperatūrą iki 60 °C, fermentas buvo inaktyvuotas dar labiau: po 1 valandos inkubacijos<...>Rūgščių inaktyvacijos kinetikos tyrimas leido apskaičiuoti inaktyvacijos greičio konstantas tirtoje<...>Fig. 3 paveiksle parodytos Arrhenius diagramos, rodančios terminį lipazės inaktyvavimą.

21

PIENO krešėjimo preparatų LIPOLITINIS AKTYVUMAS IR JO VAIDMUO SUDARYTI SŪRIO KOKYBĘ ABSTRAKTAS DIS. ... TECHNIKOS MOKSLŲ KANDIDATAS

LENINGRADO TECHNOLOGIJOS ŠALDYMO PRAMONĖS INSTITUTAS

Darbo mokslinis naujumas. Pirmą kartą buvo sukurta pieno krešėjimo preparatų tinkamumo sūrių gamybai vertinimo kriterijų sistema pagal jų lipolitines savybes (A.S. Nr. 1040702 TSRS). Tirtas įvairios kilmės vaistų lipazės aktyvumas ir jo priklausomybė nuo pH ir temperatūros. Tirta kai kurių vaistų krešėjimo ir lipolitinio aktyvumo inaktyvavimo kinetika, veikiant temperatūrai ir ultravioletiniams spinduliams. Nustatyta pieno krešėjimą skatinančių vaistų lipazių specifiškumas. Buvo atskleistas ryšys tarp lipolizės parametrų ir sūrių kokybės.

Kai kurių vaistų krešėjimo ir lipolitinio aktyvumo inaktyvavimo kinetika<...>Inaktyvacijos kinetika – matuojant liekamąjį fermentų aktyvumą (I.B. Berezin, L.L.<...>kompleksas) ir padidėjęs fermento terminis inaktyvavimas esant pakankamai aukštai temperatūrai.<...>arba fermentų inaktyvacija veikiant UV spinduliuotei (4 lentelė).<...>Nebuvo aptikta pastebimo lipolitinių fermentų inaktyvavimo ultravioletinių spindulių įtakoje

22

INFORMACIJOS VEIKSNIŲ VAIDMUO BALTIMŲ FOTOINAKTIVAVIMO TYRIMAS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

BSSR MOKSLŲ AKADEMIJOS EKSPERIMENTINĖS BOTANIKOS INSTITUTAS

Šio darbo tikslas buvo 1) sisteminis baltymų molekulių konformacinės būsenos ir jų fosforo jautrumo lygio ryšio tyrimas; 2) eksperimentinis elektroninės sužadinimo energijos, išjungtos ne spinduliavimo keliu, panaudojimo baltymų fotoinaktyvavimui patikrinimas.

Paprastai tirtų baltymų kvantinė inaktyvavimo išeiga sumažėjo pridedant druskų.<...>Daugelis autorių pažymi padidėjusį fermentų stabilumą fermentų ir substratų kompleksuose.<...>inaktyvavimas apsaugos ir aktyvinimo fone.<...>Y-inaktyvacija atsiranda tik esant gana reikšmingoms Y šviesos dozėms.<...>Apie apsauginį substrato poveikį kai kurių fermentų inaktyvavimo ultravioletiniais spinduliais metu.

23

Buvo pasiūlytas heterogeninis biokatalizatorius, pagrįstas inulinaze, imobilizuota ant nejoninio sorbento Stirosorb. Atlikta laisvos ir imobilizuotos inulinazės terminė ir rūgštinė inaktyvacija. Apskaičiuotos atitinkamos inaktyvavimo konstantų reikšmės. Buvo nustatytas imobilizuoto fermento terminio stabilumo padidėjimas, palyginti su laisvuoju. Terminės inaktyvacijos poveikis fermento struktūrai buvo ištirtas naudojant IR spektroskopiją.

Natūralių ir imobilizuotų fermentų terminis ir rūgštinis inaktyvavimas buvo atliktas termostatu<...>1 paveiksle parodyta laisvo ir imobilizuoto fermento inaktyvacijos temperatūroje dinamika<...>Fermento inaktyvacija daugeliu atvejų yra pirmos eilės reakcija ir apibūdinama lygtimi<...>Imobilizuoto fermento inaktyvacijos konstanta sumažėjo, palyginti su natūraliu fermentu<...>Fermento spektrogramos po inaktyvacijos (70 °C) 30 minučių parodė reikšmingą padidėjimą

24

Nr. 3 [Maskvos universiteto biuletenis. 2 serija. Chemija, 2014]

Žurnale publikuojami tiek universiteto darbuotojų, tiek autorių iš kitų Rusijos ir pasaulio organizacijų straipsniai. Leidiniai apima visas chemijos šakas.

Remiantis duomenimis apie fermentų inaktyvavimo mechanizmą, buvo sukurtos nejoninių paviršinio aktyvumo medžiagų kompozicijos<...>Remiantis duomenimis apie antistafilokokinio fermento LysK inaktyvavimo mechanizmą, požiūriai į<...>T. 55. Nr. 3 iš kurio aišku, kad fermento inaktyvacija vyksta pirma eile su inaktyvavimo konstanta<...>Inaktyvacijos konstantų reikšmės žymiai padidėja didėjant PLPEG:fermento moliniams santykiams<...>Nuolatinė fermento inaktyvavimo reikšmė esant poliakrilo rūgščiai sumažėja maždaug

25

Taikant Dixono metodus ir cheminę modifikaciją, buvo atskleistas histidino imidazolo grupės, asparto ir glutamo rūgščių w-karboksilo grupių ir cisteino sulfhidrilo grupių vaidmuo trigliceridų hidrolizėje. Įrodyta, kad etilendiaminotetraacetatas yra nekonkurencinis lipazės inhibitorius

mėlyna turėtų sukelti fermento inaktyvavimą, kuris buvo pastebėtas mūsų eksperimentuose.<...>Lipazės apdorojimas ditionitrobenzenu sukelia fermento SH grupių modifikaciją ir jo inaktyvavimą.<...>Kai SH grupes blokavo p-chlormercuribenzoatas, buvo pastebėta dalinė lipazės inaktyvacija.<...>Dalinis fermento inaktyvavimas blokuojant sulfhidrilo grupes rodo jų indėlį į<...>Baltymų funkcinių grupių vaidmuo fermentuose // Fermentai. M.: Mokslas. 1964. 101–118 p.

26

Terminis gliukoamilazės inaktyvavimas buvo tiriamas taikant spektrofotometrinį metodą, skaitmeninius diferencinės šiluminės analizės (DTA) metodus ir kt. Šio fermento terminis stabilumas buvo įrodytas plačiame temperatūrų diapazone. Buvo patvirtintas ketvirtinės gliukoamilazės struktūros, kurią sudaro du subvienetai, buvimas

GLIUKOMILAZĖS VESTNIK VSU TERMINĖS INAKTYVAVIMO PROCESO TYRIMAS.<...>Serija chemija, biologija, farmacija 2003. Nr. 1. p. 57 – 60 UDC 577.154.31 TERMINĖS IŠJUNGIMO PROCESO TYRIMAS<...>Ištyrėme gliukoamilazės terminę inaktyvaciją 50, 60, 70 0C temperatūroje.<...>Fermentų inaktyvacijos greitis tirpale sparčiai didėja didėjant temperatūrai nuo 500 C iki 700 C<...>Gauti duomenys rodo, kad gliukoamilazės terminis inaktyvavimas yra tipiškas

27

MET LIKUČIŲ PAKEITIMO LĖJŲ LIKUČIAIS ​​ĮTAKA MIELIŲ D-AMINORŪGŠČIŲ OKIDAZĖS KATALITINĖMS SAVYBĖMS, OKSIDACINIUI IR TEMPERATŪROS STABILUMUI [Elektroninis išteklius] / Atrošenko [et al.] // Maskvos universiteto biuletenis. Serija 2. Chemija.- 2016.- Nr.4.- P. 47-57.- Prieigos režimas: https://site/efd/373180

Fermentų oksidacinį stabilumą pirmiausia lemia Cys ir Met liekanos. D-aminorūgščių oksidazės (DAAO, EC 1.4.3.3) iš mielių Trigonopsis variabilis (TvDAAO) atveju trys muteinai su taškiniais Met liekanos pakaitalais Leu liekanoje buvo gauti taikant vietinę mutagenezę. Pakeitimų įvedimo pozicijų pasirinkimas buvo atliktas remiantis daugialypiu DAAO aminorūgščių sekų iš skirtingų šaltinių suderinimu, taip pat trimatės TvDAAO struktūros analize. Buvo tiriamos gautų mutantų katalizinės savybės, temperatūra ir oksidacinis stabilumas. Visais atvejais dėl pakeitimo pasikeitė mutantinių fermentų substrato specifiškumo profilis. Pastebimas Michaelis konstantų padidėjimas mažiems substratams ir KM sumažėjimas D-amino rūgščių, turinčių didelių gabaritų šoninį radikalą. Buvo parodyta, kad dėl vieno iš pakeitimų TvDAAO temperatūros stabilumas padidėja 2–3 kartus, palyginti su laukinio tipo fermentu. Sukurtas metodas, leidžiantis nustatyti TvDAAO stabilumą vandenilio peroksido poveikiui. Buvo tiriamas laukinio tipo fermento ir susidariusio mutanto TvDAAO oksidacinis stabilumas. Nustatyta, kad visais atvejais Met liekanos pakeitimas Leu liekana turėjo nedidelį poveikį fermento oksidaciniam stabilumui.

Mutanto TvDAAO ir laukinio tipo fermento inaktyvacija, esant vandenilio peroksidui, buvo tiriama esant 0,05 M<...>dvi eksponentinės funkcijos, o fermento inaktyvavimo greitis priklauso nuo jo koncentracijos

Vienintelis mokslinis, techninis ir informacinis-analitinis mėnesinis žurnalas Rusijoje ir NVS šalyse apie mokslo ir technikos pokyčius visose šaldymo, kriogeninės įrangos ir technologijų, oro kondicionavimo ir vėdinimo, automatikos ir valdymo, šaldymo transporto, maisto gamybos procesų ir aparatų srityse. , darbo medžiagos, aplinkos problemos ir energijos taupymas. Žurnalas jau daugiau nei 100 metų yra pagrindinis informacijos apie žymiausių šalies ir užsienio mokslininkų fundamentinius ir taikomuosius darbus šaltinis, taip pat leidinys, skirtas kandidato ir mokslų daktaro mokslo laipsniams gauti disertacijų rezultatams publikuoti. Žurnalas įtrauktas į tarptautinę abstrakčių duomenų bazę „Agris“ ir registruotas Rusijos mokslo citatų indekse (RSCI).

Raktažodžiai: apdorojimas mikrobangų krosnelėje, peroksidazės ir oksidazės inaktyvavimas, šviežiai pjaustytos bulvės, režimai<...>Tokiu atveju patartina nustatyti optimalų apdorojimo mikrobangų lauku laiką, kad inaktyvavimo procesas<...>fermentai nesukėlė pernelyg didelio produkto audinio minkštėjimo.<...>Peroksidazės inaktyvacija gabalėlių paviršiuje ir viduje įvyko tik po 3 min (3 pav., D), kai<...>Taigi, remiantis fermentų ir mikroorganizmų inaktyvavimo optimaliu režimu tyrimų rezultatais

32

""ATPAŽINIMO" PROBLEMA: AMINOACIL-TRNR SINTETAZĖS IR JŲ SĄVEIKA SU TRNR" SANTRAUKA DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ DAKTARAS

M.: SSRS A. N. BACHO MOKSLŲ AKADEMIJOS VARDU LENINO BIOCHEMIJOS INSTITUTO UŽSAKYMAS

PAGRINDINĖS išvados 1 . Eksperimentinio atpažinimo problemos tyrimo išeities taškas yra aminoacil-tRNR sintetazių ir tRNR tyrimo metodinių pagrindų sukūrimas.

Lentelė Substratų įtaka žiurkių kepenų ARSazių termoinaktyvacijos greičiui, terminė inaktyvacija<...>Tačiau kai jie yra kartu tokiomis sąlygomis, kai susidaro va.... liladinilas, „fermento inaktyvacija<...>"Inaktyvacijos padidėjimas pastebėtas esant "!<...>tRNR poveikis APCae fotocheminiam aktyvumui iš žiurkių kepenų. inaktyvacija, kai nėra tRNR<...>: priklausomai nuo substrato ir APCazės pobūdžio, padidėjęs inaktyvavimas, apsauginis poveikis arba

33

Bendrosios nuostatos Su egzokrininiu kasos nepakankamumu (PIN) dažnai susiduria gydytojai – tiek terapeutai, tiek pediatrai. Klasifikacija Pagal kilmę: pirminis (įgimtas), antrinis (įgytas). Pagal mechanizmą: absoliutus ir santykinis. Pirminis (įgimtas) egzokrininis kasos nepakankamumas (EPI) formuojasi prenataliniu laikotarpiu ir atsiranda dėl embriogenezės sutrikimų ir (arba) genetinių defektų. Antrinis (įgytas) EPN yra susijęs su ligomis, atsirandančiomis postnataliniu laikotarpiu.

34

GLIUKOMILAZĖS ASPERGILUFS AWAMORI ABSTRACT DIS BIOSINTEZĖ IR SAVYBĖS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: SSRS A. N. BACHO MOKSLŲ AKADEMIJOS VARDU LENINO BIOCHEMIJOS INSTITUTO UŽSAKYMAS

IŠVADOS 1. Iš daugybės tirtų grybų atmainų grybas ASPERGILUFS AWAMORI, su kuriuo buvo atliktas šis darbas, pasižymi dideliu gebėjimu formuoti gliukoamilazę. Nustatytas amilolitinių fermentų aktyvumas panardintoje fisp kultūroje. įvairaus amžiaus awnon. Nustatyta, kad terpėje su natrio nitratu gliukoamilazės susidarymas pasiekia maksimumą 5 dienų kultūroje, kai grybas kultivuojamas laboratorinėmis sąlygomis, kolbose ant supamosios kėdės ir 3 dienų kultūroje kultivuojant fermentatoriuose. .

c-amilazės ir gliukoziltransferazės inaktyvavimas Norint išskirti labai išgrynintą gliukoamilazės preparatą<...>Naudojant atsparumą gliukoamilazei #sp. awna-t rūgščioje aplinkoje ir visiškas *-amilazės inaktyvavimas at<...>Norint visiškai inaktyvuoti glikoziltransferazę, Soley reikėjo ilgalaikio poveikio mažiausiai 24 valandas.<...>Sukurtas metodas gliukoziltransferazei ir α-amilazei inaktyvuoti Aspergillus kultūros filtrate.<...>Giliojoje grybo Nap/olup kultūroje susidariusi transglikozilazė ir jos inaktyvavimo būdai.

35

KASOS PROTEINAZĖS IR JŲ INHIBITORIAI (PROTEINAZIŲ SĄVEIKOS SU KRAUJO INHIBITORIAIS TYRIMAS. BIOCHEMINIAI PRIEŠUŽDEGIMO VEIKIMO MECHANIZMO TYRIMAI. KLINIKINIS TAIKYMAS) SANTRAUKA. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ DAKTARAS

UKRAINOS TSR MOKSLŲ AKADEMIJA

1. Remiantis klasikine proteinazių išskyrimo schema, sukurti kristalinio tripsino ir chimotripsino medicininių preparatų, skirtų injekcijoms į raumenis, gavimo metodą ir atlikti jų fizikinį, cheminį ir farmakologinį įvertinimą. 2. Eksperimente su gyvūnais ištirkite priešuždegiminį, ypač edemą mažinantį, tripsino ichnmotrnizino poveikį, kai jis vartojamas parenteraliai, taip pat klausimus, susijusius su kai kurių šio veikimo mechanizmo aspektų išaiškinimu.

Nustatyta, kad tripsino inaktyvacija serume įvyksta greitai ir dažniausiai visiškai atliekama<...>Kaip paaiškėjo, tripsiną nuo spontaniško inaktyvavimo apsaugo serumo inhibitorius.<...>Tai negali būti siejama su spontanišku fermento inaktyvavimu; jį tikriausiai sulaiko audiniai.<...>II inhibitorius sukelia bendrą fermento inaktyvavimą.<...>daugiausia su inhibitoriumi II, kuris kiekybiškai vyrauja prieš inhibitorių I ir sukelia bendrą inaktyvaciją

36

PH5 FERMENTO FRAKCIJOSE ESANČIŲ AMINOAKCINIŲ RNR SINTETAZIŲ SAVYBĖS E. COLI B. ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: BIOLOGINĖS IR MEDICINOS CHEMIJOS INSTITUTAS TSRS medicinos mokslų akademija

AMINOACINO-RNR SINTETAZIŲ, ESANČIŲ E. COLI PH5 FERMENTŲ FRAKCIJOSE, SAVYBĖS B.

Paaiškėjo, kad laikas, reikalingas tirtų aktyvuojančių fermentų terminei inaktyvacijai 50 £,<...>50 £ tirozil RNR sintetazės inaktyvavimo laikas buvo 30 sekundžių.<...>kad aktyvumo sumažėjimą rūgštinėse (palyginti su pH optimaliu) regionuose sukelia negrįžtama inaktyvacija<...>skirtingas aminoacil-GNA sintetazių stabilumas, kai fermentinis preparatas inkubuojamas 0° temperatūroje. 1" šilumos išjungimas<...>Aktyvumo sumažėjimą, kai pH pasislenka į rūgštinę sritį, palyginti su pH optimaliu, sukelia negrįžtama inaktyvacija

37

TYRIMAS FIZINIŲ IR CHEMINĖS VIETŲJŲ FERMENTŲ BALTYMŲ IR JŲ KATALITINĖS AKTYVUMŲ PRIKLAUSOMYBĖS ABSTRAKTAS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

BIOCHEMIJOS INSTITUTAS, Ukrainos TSR mokslų akademija

Išvados 1. Karbamido buvimas inkubaciniame mišinyje, kurio koncentracija iki 0,166 M, neturi įtakos aldolazės aktyvumui. Padidėjęs jo kiekis sukelia fermentų aktyvumo sumažėjimą, kuris tiesiogiai priklauso nuo karbamido koncentracijos. 2. Vieną valandą 0,5 M karbamido tirpale palaikytos aldolazės aktyvumas padidėja 14,2 %...

Kyla klausimas: ar čia vyksta dalinis negrįžtamas fermentų inaktyvavimas ar jis tik vyksta?<...>karbamido iki 1 M koncentracijos, manome, kad vandeniniame tirpale vyksta ne fermento denatūracija, o inaktyvacija<...>Galima daryti prielaidą, kad šis molekulių derinys į kompleksus apsaugo fermentą nuo negrįžtamo inaktyvavimo<...>susidaro agregatai, įvyksta negrįžtamas glicerofosfato dehidrogenazės inaktyvavimas, kuris yra susijęs<...>fermentines ir fizikines bei chemines savybes.

38

Chemijos pagrindai ir riebalų gamybos ir perdirbimo technologija. 1 dalis. Augalinių aliejų gavimo technologija Mokomasis ir metodinis vadovas

Ivanovo valstybinis chemijos technologijos universitetas

Mokymo vadove aprašomos parengiamos aliejinių augalų žaliavų laikymo ir perdirbimo operacijos, technologinės sėklų paruošimo aliejaus gavybai operacijos, išdėstyti teoriniai ir technologiniai augalinio aliejaus gavimo spaudimo ir ekstrahavimo būdu pagrindai, aptariami išgaunamo aliejaus pirminio gryninimo klausimai. . Skirta specialybės 260401 Riebalų, eterinių aliejų ir parfumerijos bei kosmetikos gaminių technologija studentams.

Sąlygos turėtų užtikrinti kuo mažesnę baltymų denatūraciją ir fermentų inaktyvavimą, pyragų detoksikaciją<...>Jame yra visas gyvai sėklai būdingų fermentų rinkinys.<...>Šiuo atveju fosfolipazės grupės fermentai ir lipazės fermentai yra inaktyvuojami.<...>Neutralizuoti nepageidaujamas medžiagas ir inaktyvuoti fermentus, kurie katalizuoja formavimosi procesus<...>Sunkiau inaktyvuoti fermentus ir kitas nepageidaujamas medžiagas, esančias sojos pupelių sėklose

39

VYNO MIELŲ AUTOLIZĖS PRODUKTŲ BIOCHEMINIAI TYRIMAI ABSTRAKTINIS DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: SSRS A. N. BACHO MOKSLŲ AKADEMIJOS VARDU LENINO BIOCHEMIJOS INSTITUTO UŽSAKYMAS

Tyrimo tikslas ir uždaviniai. - tirti mielių ir vyno fermentų aktyvumo pokyčius autolizės metu; - ištirti autolizės produktus, azotines medžiagas,

Vėlesnis senėjimas sukelia nedidelį fermento inaktyvavimą.<...>Šie fermentai daugiausia išsiskiria į vyną.<...>Terminio apdorojimo metu kartu su fermentų išsiskyrimu vyksta fermentų inaktyvacija.<...>procesai ikhayug terminio cheminių medžiagų skilimo reiškiniai, terminis baltymų denatūravimas, inaktyvacija<...>Terminis apdorojimas, kartu su medžiagų perėjimu iš mielių į vyną, stebimas fermentų inaktyvavimas

40

Darbas skirtas tirti ATP reagentą, kurio sudėtyje yra mutantinės termostabilios ugniagesių luciferazės Luciola mingrelica, luciferino, MgS0_4, buferinio tirpalo komponentų ir stabilizatorių, ir yra plačiai naudojamas nustatant adenozino-5"- nano- ir pikomoliarines koncentracijas. fosfatas (ATP) įvairiuose biologiniuose mėginiuose. Atliktas ATP reagento aktyvumo, stabilumo ir analitinių charakteristikų įvertinimas tirpale, esant 5% želatinai ir želatinos gelyje, kai želatinos koncentracija yra 5% ir temperatūra > = 30°, buvo gautas ATP reagento tirpalas, o žemesnėje nei 30° temperatūroje vyksta želėjimas. ATP reagento tirpalai buvo tiriami 30°C temperatūroje, o plonos želatinos plėvelės su ATP reagentu buvo tiriamos 22°C temperatūroje luciferazės aktyvumas ir stabilumas ATP nustatymo jautrumas (virš 0,96) nepriklausė nuo želatinos buvimo ir agregacijos dispersijos. Aptikimo ribos buvo 2 * 10 (-12), 7 * 10 (-). 13), 7 * 10(-14) M ATP, kai ATP reagentas naudojamas želatinos plėvelėse ir tirpale, kai yra 5% želatinos ir atitinkamai jos nėra. Įrodyta, kad ATP reagentą laikant 22°C temperatūroje želatinos gelyje ne tik išsaugomas fermentinis aktyvumas, bet ir apsaugomas fermentas nuo bakterijų užteršimo, dėl to prarandamas luciferazės aktyvumas.

Per šį laiką ATP reagentas buferyje buvo inaktyvuotas tik 8%.<...>Kinetinės inaktyvacijos kreivės rodo (2 pav.), kad visais atvejais procesas vyksta pagal pirmąją<...>Tada inaktyvavimas vyksta pirma tvarka.<...>Fermento inaktyvacija 4 ° kampu įvyko pirmąja tvarka ir nepriklausė nuo to, ar fermentas buvo buferyje<...>Berezinas I.V., Klyachko N.L., Levashovas A.V. ir kiti // Imobilizuoti fermentai. M., 1987 m.

41

Nr. 1 [Maisto ir perdirbimo pramonė. Abstraktus žurnalas, 2002]

1999 m. buvo išleistas pirmasis abstraktaus žurnalo „Maisto ir perdirbimo pramonė“ numeris. Nuo 2000 m. kas ketvirtį leidžiama Centrinė mokslinių tyrimų biblioteka. Žurnalas yra naujausios informacijos apie šalies ir užsienio maisto pramonės literatūrą organas. Leidinys skirtas maisto pramonės mokslininkams, specialistams ir praktikams ir gali būti kaip informacinis įrankis bibliotekininkams ir mokslinės bei techninės informacijos įstaigų darbuotojams. Metinė RJ apimtis – apie 1200 leidinių. Leidinyje pateikiama informacija apie reikšmingiausius Centrinės mokslinių tyrimų bibliotekos gautus straipsnius iš mokslinių ir mokslinių-praktinių žurnalų bei rinkinių, atspindinčius pasaulinį dokumentikos srautą visuose maisto pramonės sektoriuose.

C, fermentas yra stabilus nuo 4 iki 30 ° C, tada stabilumas sumažėjo, o po 60 ° C įvyko greita inaktyvacija<...>iki visiško PPO inaktyvavimo.<...>Pastebėta, kad 1 ir 2 nesukelia fermentų inaktyvacijos, 3 – minimaliai, o 4a ir 4b – selektyviai.<...>greitas PPO inaktyvavimas.<...>Pastebėta, kad 1 ir 2 nesukelia fermentų inaktyvacijos, 3 – minimaliai, o 4a ir 4b – pasirinktinai.

42

Mikrobiologinės sintezės preparatų panaudojimo biotechnologiniai pagrindai sumažėjusių funkcinių ir technologinių savybių žalios mėsos perdirbimui monografija

Darbe apibendrinti ilgamečių tyrimų rezultatai ir susisteminta informacija, apibūdinanti kompleksinių proteolitinių fermentų preparatų panaudojimo perspektyvas ir potencialias galimybes koreguoti žemos kokybės mėsos žaliavų savybes, taip pat mėsai, turinčiai nukrypimų nuo mėsos savybių. autolitinių transformacijų eiga. Monografija parengta Kazanės valstybinio technologijos universiteto Maisto gamybos technologijos katedroje.

į substratą, o iš kitos - fermento inaktyvacijos rezultatas.<...>maisto pramonėje įmanoma tik tada, kai jis yra visiškai inaktyvuotas gatavame produkte, nes<...>Kaip matyti iš gautų rezultatų (2.4 pav.), fermento inaktyvacija prasideda esant pH 8,0 ir intensyviai.<...>Tolesnis inkubacijos temperatūros padidėjimas iki 600 ° C leido užbaigti

Šio tyrimo tikslas – ištirti į pilką miško dirvožemį įterptos augalinės medžiagos ir jos drėgmės sąlygų įtaką redokso fermentų aktyvumui.

dirvožemis Sterilizavus dirvožemio mėginius su įvestomis organinėmis medžiagomis \-radiacijos būdu, jie buvo visiškai inaktyvuoti<...>dirvožemio mėginiuose ir užbaigti fermento preparato inaktyvavimą kvarciniame smėlyje.<...>Kvarciniame smėlyje įvyko reikšmingas fermento inaktyvavimas.<...>Dirvožemio sterilizavimas γ spinduliuote ir aukšta temperatūra lemia visišką dshidrogenazių inaktyvavimą,<...>Įrodyta, kad katalazės ir peroksidazės fermentų preparatų, patenkančių į pilką miško dirvą, inaktyvavimas

Taigi, blanširavimo tikslas yra inaktyvuoti nepageidaujamus fermentus, esančius daržovėse,<...>Autorių teisės OJSC "CDB "BIBKOM" & LLC "Agentūra Kniga-Service" 61 Nr. 10/2015 tarp temperatūros ir inaktyvavimo laiko<...>jo forma, dydis, struktūra, brandumo laipsnis ir ypač inaktyvuojamų fermentų sistemų tipas<...>esant žemai temperatūrai, kartais naudojamas siekiant pagerinti produkto tekstūrą per selektyvią inaktyvaciją<...>Peroksidazė yra vienas termostabiliausių fermentų.

45

ARGINAZĖS SĖKLOS VIKI SHORNOY ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: MASKAVOS VALSTYBINIS PEDAGOGINIS INSTITUTAS, PAVADINIMAS V. I. LENINO VARDU

Išvados 1. Arginino hidrolizė, esant arginazės preparatams iš vikių sėklų, tik pradinėse inkubacijos stadijose paklūsta monomolekulinio proceso sąlygoms. Reakcijai vykstant toliau, empiriniai greičiai atsilieka nuo apskaičiuotų pirmosios eilės reakcijos sąlygoms.

apskaičiuoti fermento slopinimo reakcijos produktu (orntine) konstantas.<...>substratas ir reakcijos produktai; 2) fermento terminis inaktyvavimas reakcijos metu.<...>Visas taškų rinkinys apibrėžia vieną kreivę, todėl galime manyti, kad terminis inaktyvavimas yra fermentas<...>Kadangi buvo įrodyta, kad reakcijos metu vaistų terminis inaktyvavimas nevyksta, reikėtų manyti<...>Augalų arginazės inaktyvavimas fermentinės arginino hidrolizės metu.

46

Laisvieji radikalai, kurių sudėtyje yra aktyvuotų deguonies metabolitų ir azoto oksido, kai jų gaminamas per daug, gali turėti didelę reikšmę reprodukcinės sistemos patologinių būklių atsiradimui: endometriozei, difuzinei mastopatijai, įvairios lokalizacijos kancerogenezės indukcijai. Yra įrodymų, patvirtinančių oksidacinio streso vaidmenį moterų nevaisingumui. Ikiklinikinių ir klinikinių tyrimų rezultatai patvirtina antioksidantų panaudojimo galimybes šių ligų profilaktikai ir gydymui. Vitaminai A, C, E dėl jų prieinamumo, paplitimo gamtoje, geresnio tyrimo ir afiniteto žmogaus organizmui dažniausiai įtraukiami į kompleksinę terapiją. Yra daug įrodymų apie antioksidantų vitaminų vartojimo veiksmingumą gydant reprodukcinės sistemos ligas. Didesnis kompleksinės farmakoterapijos, naudojant antioksidantus, efektyvumas paaiškinamas ne tik poveikiu lipidų peroksidacijai, kaip vienai iš ligos patogenezės grandžių, bet ir kartu su antioksidantais skiriamų vaistų metabolizmo intensyvumo pasikeitimu. sumažinti citochromo P450 3A4 kiekį. Elektrocheminė citochromo P450 3A4 katalizinio aktyvumo analizė parodė, kad vitaminai A, C ir E turi įtakos citochromo P450 3A4 redukcijai dėl savo antioksidacinio poveikio.

Šiuos procesus kontroliuoja fermentai, kurie pašalina reaktyvių produktų nutekėjimą.<...>sukelia jo reguliavimo funkcijų pažeidimą, susijusį su svarbiausiais ląstelių metabolizmo procesais: inaktyvacija<...>ROS gali sąveikauti su citochromu P450, sukeldamas fermentų inaktyvaciją.<...>Vitaminai C, E ir beta karotinas aprūpina organizmą nefermentiniu AOD dėl inaktyvavimo įvairiais<...>Beta karotinas, kartu su reaktyviųjų deguonies rūšių inaktyvavimu įvairiais lygiais, gali atkurti

47

VITROGENAZĖS SISTEMOS REGULIAVIMAS IR SAVYBĖS RODOBACTER CAPSULATUS ABSTRACT DIS. ... BIOLOGINIŲ MOKSLŲ KANDIDATAS

M.: TSRS MOKSLŲ AKADEMIJOS MIKROBIOLOGIJAS INSTITUTAS

Šio darbo tikslas buvo ištirti purpurinės nesierinės bakterijos Rhodobaoter сapaulatua padermės BIO nitrohekazės sistemos reguliavimo savybes.

Vadinasi, šios bakterijos nitrogevazės perėjimas prie NGr-forijos yra fermento kaip tokio inaktyvavimas.<...>Esminis vaidmuo yra R.capaula azoto ir Pd I inaktyvavimas „šio fermento / nes jis išlaiko aktyvumą. in vivo ir inviSiw, kai naudojami<...>B. capeulatua nitratų reduktazė yra diosimilinio tipo fermentas. 8.<...>Svarbus vaidmuo inaktyvuojant nekrogenazės ir ferredoksino I molekules: produktai vaidina

48

Laisvo heparino kiekis pacientų, sergančių vera policitemija, kraujo plazmoje ir neurologinių smegenų simptomų dažnis [Elektroninis išteklius] / Gaidukova, Tkachenko, Bublii // Hematologija. Transfuziologija. Rytų Europa.- 2016.- Nr.1.- P. 47-57.- Prieigos režimas: https://site/efd/478925

Aktualumas. Vera policitemija (PV) – mieloproliferacinių neoplazijų grupės liga, kurios klinikinės apraiškos pasižymi polinkiu į kraujavimą ir trombozę Tikslas: ištirti laisvojo heparino kiekį sergančiųjų PV kraujo plazmoje šios ligos smegenų simptomų struktūra. Medžiagos ir metodai. Ištirti 32 pacientai, sergantys IP. Tarp tirtų pacientų 18 vyrų ir 14 moterų. Vidutinis tirtų pacientų amžius – 57,2±1,2 metų. Antrąją stebėjimo grupę sudarė 52 pacientai, ištirti dėl įtariamų mieloproliferacinių kraujo ligų, tačiau atlikus išsamų klinikinį ir hematologinį tyrimą tokios ligos iš jų buvo pašalintos, o periferinio kraujo būklė buvo vertinama kaip absoliuti SE dėl tam tikrų ligų. somatinės ligos. Tarp tirtų pacientų buvo 30 vyrų ir 22 moterys. 2 grupės pacientų amžiaus vidurkis – 55,7±3,6 metų. Kontrolinę grupę sudarė 35 praktiškai sveiki panašaus amžiaus asmenys. Kiekybinis laisvosios heparino frakcijos kiekis buvo nustatytas elektroforetine analize pagal B.V. metodą. Michailičenka, S.V. Vydybortsa (2000). Rezultatai ir išvados. Pacientams, sergantiems IP, yra laisvo heparino metabolizmo disbalansas, kuris pasireiškia padidėjusiu jo kiekiu kraujo plazmoje. Diskusijoje pateikiami duomenys apie fiziologinį heparino vaidmenį. Įrodyta, kad jo veikimas yra ne tik hemostazės reguliavimas, bet ir angiogenezės, imuninių reakcijų, riebalų ir angliavandenių apykaitos reguliavimas, antibakterinis, antivirusinis ir priešuždegiminis aktyvumas. Aptariami galimi nustatytų pažeidimų atsiradimo mechanizmai.

Visų pirma darbe nagrinėjami šie klausimai: 1. Ar keičiasi RNR polimerazės savybės, kai ji sujungiama su DNR dar neprasidėjus RNR sintezei? 2. Su kuo susijęs polimerazės stabilizavimas esant DNR ir NTP: iniciacijos aktu, t.y. pirmųjų NTP sujungimas, su ilgų polinukleotidų grandinių sintezės procesu arba su stabilizuojančiu NTP poveikiu RNR polimerazei, nesusijusiam su nukleotidų sujungimu vienas su kitu. 3. Ar polimerazės stabilizavimui RNR sintezės metu svarbu išsaugoti šabloninės DNR dydį ir dvigrandę natūralią struktūrą?

Inkubavimo sąlygos g I laisvas fermentas; 2 fermentas + DNR) 3 fermentas + DNR + NTP.<...>7 lentelė Tripsino RNR polimerazės inaktyvacija priklausomai nuo jos išankstinio inkubavimo sąlygų Preinkubacijos metu<...>Šis rezultatas, taip pat duomenys apie inaktyvavimas

Darbe buvo tiriamas aukštų žalingų temperatūrų (45°C) poveikis G. max ir G. soja augalams dvi ir dvylika valandų, keičiant peroksidazės ir katalazės elektroforezės spektrus. Kiekybiniai ir kokybiniai lapų elektroforezės spektro pokyčiai dėl karščio streso priklausė nuo genotipo, sojų vystymosi fazės ir streso faktoriaus trukmės. Įrodyta, kad trumpalaikis temperatūros įtempimas nesukelia kiekybinių peroksidazės ir katalazės elektroforezės spektrų pokyčių sojos pupelių lapuose. Ilgai veikiant aukštai žalingai temperatūrai, inaktyvuojamos daugiausia peroksidazės ir katalazės formos, pasižyminčios vidutiniu elektroforeziniu judumu. Stabilios peroksidazės formos, kurių Rf 0,02; 0,10; 0,21 (G. max) ir Rf 0,02; 0,10; 0,40 (G. soja), katalazė su Rf 0...0,04 (G. max) ir Rf 0...0,04; 0,22…0,24 (G. soja), taip pat sėslios formos, suaktyvėjusios aukštoje temperatūroje, užtikrina augalų funkcionavimą stresinėmis sąlygomis

Ilgai veikiant aukštai žalingai temperatūrai, inaktyvuojamos daugiausia peroksidazės formos<...>Ilgalaikis šilumos smūgio poveikis sukelia fermentų inaktyvavimą.<...>Sojų pupelių terminio prisitaikymo mechanizmuose svarbų vaidmenį vaidina kelios molekulinės fermentų formos.<...>Dvylika valandų veikiant aukštai žalingai temperatūrai, daugiausia inaktyvuojama<...>Fermentų vaidmuo augalų atsparumui / K. N. Sarsenbajevas, F. A. Polimbetova // KazSSR mokslų akademija, vyriausiasis Botas. sodas.

Fermentinės reakcijos greitį, kitaip tariant, fermento aktyvumą lemia ir aktyvatorių bei inhibitorių buvimas terpėje: pirmieji padidina reakcijos greitį ir kartais jį modifikuoja, antrieji slopina reakciją. Tarp cheminių junginių, turinčių įtakos fermentų veiklai, yra įvairių medžiagų. Taigi, HC1 aktyvina pepsino, tulžies rūgščių – kasos lipazės – veikimą; kai kuriuos audinių fermentus (oksidoreduktazes, katepsinus, arginazę), augalų proteinazę papainą ir kt. žymiai aktyvina junginiai, turintys laisvųjų SH grupių (glutationas, cisteinas), o kai kuriuos ir vitaminas C. Jonai ypač dažnai tarnauja kaip dvivalenčių, o kartais ir vienavalenčių metalų aktyvatoriai. . Daugelis fermentų visai neaktyvūs, kai nėra metalų. Taigi, pašalinus cinką, karboanhidrazė praktiškai neturi fermentinio aktyvumo; Be to, veikiant šiam fermentui, cinkas negali būti pakeistas jokiu kitu metalu. Yra žinomi fermentai, kurių veikimą aktyvuoja daugybė metalų, ypač enolazę (žr. Angliavandenių apykaita) aktyvina Mg 2+, Mn 2+, K +. Lentelėje 18 parodyta metalų dalyvavimo kai kurių fermentų veikloje pavyzdžiai.

Kalbant apie metalų vaidmenį aktyvinant fermentus, turimi duomenys rodo, kad kai kuriais atvejais metalų jonai (Co 2+, Mg 2+, Zn 2+, Fe 2+) atlieka protezinių fermentų grupių funkcijas. Kitais atvejais jie prisideda prie substrato prijungimo prie aktyviosios vietos ir fermento-substrato komplekso susidarymo. Pavyzdžiui, Mg 2+ jonai per neigiamai įkrautą fosfatų grupę užtikrina organinių medžiagų monofosforinių esterių papildymą į aktyvųjį fosfatazių centrą, kuris katalizuoja šių junginių hidrolizę. Kai kuriais atvejais metalas susijungia su substratu, sudarydamas tikrą substratą, kurį veikia fermentas. Visų pirma, Mg 2+ jonai aktyvuoja kreatino fosfokinazę, nes susidaro tikrasis substratas ir ATP magnio druska. Galiausiai yra eksperimentinių įrodymų, kad metalai (pavyzdžiui, Ca 2+ jonai seilių amilazės molekulėje) dalyvauja formuojant ir stabilizuojant aktyvųjį centrą ir visą fermento molekulės tretinę struktūrą. Taip pat reikia pažymėti, kad metalai dažnai atlieka allosterinių moduliatorių vaidmenį (žr. 59 pav.). Sąveikaujant su alosteriniu centru, toks metalas (moduliatorius) skatina palankiausios fermento ir aktyvaus fermento-substrato komplekso erdvinės konfigūracijos susidarymą.

Fiziologinės koncentracijos anijonai dažniausiai yra neveiksmingi arba turi mažai aktyvinančio poveikio fermentams. Išimtis yra pepsinas, kai kurios oksidoreduktazės, aktyvinamos anijonais, taip pat seilių amilazė, katalizuojanti krakmolo hidrolizę, kurios aktyvumą didina chloro jonai, ir adenilatciklazė, kurią aktyvuoja halogeno anijonai.

Inhibitoriai Įprasta vadinti medžiagas, sukeliančias dalinį arba visišką fermentų katalizuojamų reakcijų slopinimą. Kadangi fermentai yra baltymai, bet kokios medžiagos, sukeliančios baltymų denatūraciją (šiluma, rūgštys, šarmai, sunkiųjų metalų druskos), sukelia fermento inaktyvavimą. Tačiau toks inaktyvavimas yra gana nespecifinis. Tai nesusiję su fermentų veikimo mechanizmu. Daug didesnę grupę sudaro vadinamieji specifiniai inhibitoriai, kurie veikia vieną fermentą arba susijusių fermentų grupę. Šių inhibitorių tyrimai yra svarbūs dėl daugelio priežasčių.

Pirma, inhibitoriai gali suteikti vertingos informacijos apie aktyviosios fermento vietos prigimtį, taip pat apie jo funkcines grupes ir cheminius ryšius, užtikrinančius fermento ir substrato komplekso susidarymą. Žinomos medžiagos, kurios specifiškai suriša vieną ar kitą fermento molekulės grupę, pašalindamos ją iš cheminės reakcijos sferos. Visų pirma, jodoacetatas ICH 2 -COOH, jo amidas ir etilo esteris, parachlormerkuribenzoatas ClHg - C 6 H 4 -COOH ir kiti reagentai gana lengvai susijungia su kai kuriomis SH fermentų grupėmis. Jei tokios grupės yra būtinos katalizės veiksmui, tokių inhibitorių pridėjimas visiškai praranda fermento aktyvumą:

R-SH + ICH 2 -COOH --> HI + R-S-CH 2 -COOH

Daugelį kitų fermentų (cholinesterazę, tripsiną ir chimotripsiną) stipriai slopina tam tikri organiniai fosforo junginiai, ypač diizopropilfluorofosfatas (DFP), nes aktyvioje vietoje blokuojama pagrindinė serino hidroksilo grupė (žr. aukščiau).

Antra, inhibitoriai buvo plačiai naudojami fermentologijoje tiriant daugelio formų fermentų ir izofermentų prigimtį, kurie skiriasi ne tiek elektroforetiniu mobilumu, kiek reakcijų į tą patį inhibitorių skirtumais.

Naudojant inhibitorius, kurie selektyviai išjungia atskirus daugiapakopio metabolizmo proceso etapus, galima tiksliai nustatyti cheminių reakcijų seką ir dalyvaujančių fermentų pobūdį. Konkrečiai, tokiu būdu, naudojant jodoacetatą, fluoridą ir kitus inhibitorius, buvo iššifruotas glikolitinis gliukozės redokso transformacijos į pieno rūgštį raumenų audinyje kelias (žr. Angliavandenių apykaita), kurį sudaro 11 etapų, kuriuose dalyvauja 11 fermentų ir 10 tarpinių. metabolitai.

Daugelio toksinų ir nuodų veikimo mechanizmas organizme pagrįstas fermentų slopinimu. Taigi, žinoma, kad apsinuodijus vandenilio cianido rūgštimi mirtis įvyksta dėl visiško kvėpavimo fermentų (citochromo oksidazės), ypač smegenų ląstelių, slopinimo. Kai kurių insekticidų toksinis poveikis žmonių ir gyvūnų organizmui atsiranda dėl cholinesterazės – fermento, kuris atlieka pagrindinį vaidmenį nervų sistemos veikloje – aktyvumo slopinimo.

Racionali chemoterapija – sąmoningas vaistų vartojimas medicinoje, turėtų būti pagrįstas tiksliomis žiniomis apie jų veikimo mechanizmą, fermentų biosintezę ar jų darbą organizme. Kartais žmonių ligų gydymas apima selektyvių inhibitorių naudojimą. Taigi, tripsino, chimotripsino ir kallikreino inhibitorius trazilolis yra plačiai naudojamas ūminiam pankreatitui gydyti. Tam tikrų natūralių ir sintetinių junginių (vadinamųjų antimetabolitų) selektyvus slopinantis poveikis fermentams šiuo metu yra veiksmingų chemoterapinių vaistų sintezės metodų kūrimo pagrindas. Šis kelias atveria plačias galimybes reguliuoti tiek fermentų sintezę, tiek medžiagų apykaitos intensyvumą.

Slopinimo tipai. Nors daugumos inhibitorių veikimo mechanizmas yra neaiškus, paprastai yra skiriamas grįžtamasis ir negrįžtamas slopinimas. Jei inhibitorių molekulė sukelia nuolatinius fermento funkcinių grupių pokyčius arba modifikaciją, toks slopinimas vadinamas negrįžtamu. Tačiau dažniau pasireiškia grįžtamasis slopinimas, kurį galima kiekybiškai ištirti remiantis Michaelis-Menten lygtimi. Grįžtamasis slopinimas savo ruožtu skirstomas į konkurencinį ir nekonkurencinį, priklausomai nuo to, ar įmanoma ar ne įveikti fermentinės reakcijos slopinimą padidinus substrato koncentraciją. Antruoju atveju, padidinus substrato koncentraciją, fermento slopinimo laipsnis nekeičiamas.

Konkurencinį slopinimą gali sukelti medžiagos, kurių struktūra panaši į substratą, bet šiek tiek skiriasi nuo tikrojo substrato struktūros. Klasikinis tokio tipo slopinimo pavyzdys yra sukcinato dehidrogenazės aktyvumo slopinimas malono rūgštimi. Šis fermentas katalizuoja oksidaciją dehidrogenuodamas gintaro rūgštį į fumaro rūgštį pagal schemą:

Jei į terpę pridedama malono rūgšties (inhibitoriaus), dėl savo struktūrinio panašumo į tikrąjį gintaro rūgšties substratą (dviejų tų pačių jonizuotų karboksilo grupių buvimas) ji reaguos su aktyviuoju centru, sudarydama fermento inhibitorių. kompleksas (žr. diagramą), tačiau Šiuo atveju vandenilio pernešimas iš malonato nevyksta. Kadangi substrato – gintaro rūgšties ir inhibitoriaus – malonato struktūros vis dar šiek tiek skiriasi, jos konkuruoja dėl prisijungimo prie aktyviosios vietos, o slopinimo laipsnį lems malonato ir sukcinato koncentracijų santykis, o ne absoliuti inhibitoriaus koncentracija. Šis slopinimo tipas kartais vadinamas metabolinio antagonizmo slopinimu (56 pav.).

Bendrąja forma reakcija tarp inhibitoriaus ir fermento gali būti pavaizduota tokia lygtimi:

Gautas kompleksas, vadinamas fermento inhibitorių kompleksu (EI), skirtingai nei ES, nesuyra ir nesudaro reakcijos produktų. EI komplekso disociacijos konstanta arba slopinimo konstanta (K 1), vadovaujantis Michaelis-Menten teorija, gali būti nustatyta kaip atvirkštinės ir pirminės reakcijos konstantų santykis:

y., slopinimo konstanta yra tiesiogiai proporcinga fermento ir inhibitoriaus koncentracijos sandaugai ir atvirkščiai proporcinga EI komplekso koncentracijai.

Konkurencinio slopinimo metodas buvo plačiai pritaikytas medicinos praktikoje. Pavyzdžiui, žinoma, kad sulfonamidų vaistai vartojami tam tikroms infekcinėms ligoms, kurias sukelia bakterijos, gydyti. Paaiškėjo, kad šie vaistai savo struktūra yra panašūs į para-aminobenzenkarboksirūgštį, kurią bakterijų ląstelė naudoja folio rūgšties, kuri yra neatsiejama bakterijų fermentų dalis, sintezei. Dėl šio struktūrinio panašumo sulfonamidas, pavyzdžiui, blokuoja fermento veikimą, iš komplekso išstumdamas para-aminobenzenkarboksirūgštį fermentu, kuris sintetina folio rūgštį, o tai slopina bakterijų augimą.

Kai kurie vitamino B6 ir folio rūgšties analogai, ypač deoksipiridoksinas ir aminopterinas (žr. Vitaminai), veikia kaip konkurenciniai, vadinamieji kofermento inhibitoriai (arba antivitaminai), slopinantys daugelį biocheminių procesų organizme.

Nekonkurencinis slopinimas sukelia medžiagos, kurios struktūriškai nepanašios į substratus ir dažnai jungiasi ne su aktyviuoju centru, o kitur fermento molekulėje. Slopinimo laipsnį daugeliu atvejų lemia inhibitorių veikimo fermentui trukmė. Esant tokio tipo slopinimui, dėl stabilaus kovalentinio ryšio susidarymo fermentas dažnai visiškai inaktyvuojamas, o tada slopinimas tampa negrįžtamas. Nekonkurencinio slopinimo (inaktyvavimo) pavyzdžiai yra jodoacetato, diizopropilfluorfosfato, taip pat dietil-n-nitrofenilfosfato ir vandenilio cianido rūgšties veikimas, kuris susideda iš funkcinių grupių arba metalo jonų surišimo ir išjungimo fermento molekulėje.

Norėdami išsiaiškinti slopinimo tipo klausimą, naudokite Michaelis-Menten lygtį, Lineweaver-Burk grafiką ir kitas sudėtingesnes lygtis, pavyzdžiui, Edie-Hofstee lygtį:

v = - K m (0/[S]) + V maks

ir atitinkamus grafikus tiesiosiomis koordinatėmis. Toliau pateiktose diagramose, pavaizduotose koordinatėmis v ir [S], taip pat koordinatėmis 1/v ir 1/[S], ​​V yra didžiausias reakcijos greitis, V 1 yra didžiausias greitis esant inhibitoriui , K 1 yra slopinimo konstanta; visi kiti simboliai buvo pateikti aukščiau.

Matyti, kad esant konkurenciniam slopinimo tipui (57 pav.), inhibitorius padidina K m reikšmę (dydžiu, lygiu nuo x ašies atkirstų segmentų ilgio skirtumui), nepaveikdamas maksimalus greitis. Tai reiškia, kad esant pakankamai aukštai substrato koncentracijai [S], inhibitorius išstumiamas substrato molekulėmis iš EI komplekso. Esant nekonkurenciniam slopinimui (58 pav.), inhibitorius sumažina maksimalų greitį. Jei K m reikšmė nemažėja, tai kalbame apie visiškai nekonkurencinį slopinimą. Panašaus tipo slopinimas atsiranda formuojant neaktyvius, sunkiai atsiskiriančius EI ir (arba) EIS kompleksus. Tačiau dažnai yra mišrus slopinimo tipas (kartais vadinamas iš dalies nekonkurenciniu), kai Vmax sumažėjimas derinamas su Km padidėjimu. Tai reiškia, kad EI kompleksas išlaiko dalinį aktyvumą, ty gebėjimą sudaryti tarpinį trijų komponentų kompleksą EIS, kuriame substratas patiria uždelstą katalizinę transformaciją. Retais atvejais fermento aktyvumo slopinimo laipsnis gali padidėti didėjant substrato koncentracijai; Šio tipo slopinimui buvo pasiūlytas gana netikslus terminas non-competitive (iš anglų kalbos nekonkurencinis). Vienas iš tokio slopinimo mechanizmų yra dėl galimybės derinti inhibitorių su ES kompleksu, kad susidarytų neaktyvus arba lėtai reaguojantis trinaris ESI kompleksas.

Taigi, grafiškai analizuojant fermentinių reakcijų greitį kaip substrato koncentracijų funkciją, galima gauti vertingos informacijos apie fermentinių reakcijų kinetiką, nušviečiant galimą fermentinės katalizės mechanizmą.

Fermentų aktyvumo reguliavimas

Aukščiau buvo teigiama, kad viena iš unikalių gyvų organizmų savybių yra nuostabus gebėjimas subalansuoti katabolinius (biodegradacinius) ir anabolinius (biosintezės) procesus. Nors ląstelėse vienu metu vyksta šimtų ir tūkstančių įvairių medžiagų sintezės, skilimo ir tarpusavio virsmo procesai, tačiau yra daug reguliavimo mechanizmų, užtikrinančių vidinės organizmo aplinkos pastovumą. Kai kurie iš šių reguliavimo mechanizmų, tarp kurių svarbų vaidmenį atlieka fermentų aktyvumą reguliuojantys mechanizmai, bus aptarti toliau.

Masinio veikimo dėsnio įtaka. Grįžtamoje cheminėje reakcijoje, kurią katalizuoja fermentas, pavyzdžiui, A + B C + D, reakcijos komponentų koncentracija ir atitinkamai reakcijos kryptis bus reguliuojama masės veikimo dėsnio įtaka. Visų pirma, tai gali būti parodyta grįžtamoje transaminavimo reakcijoje, katalizuojamoje alanino aminotransferazės:

Alaninas + α-ketoglutaratas piruvatas + glutamatas.

Akivaizdu, kad tokio tipo reguliavimas atlieka tik ribotą vaidmenį, nes realiomis sąlygomis reakcija paprastai vyksta viena kryptimi, nes susidarę produktai gali pasirodyti esąs kitų fermentų veikimo substratai ir pašalinti iš reakcijos; šiais atvejais nustatoma stabili (stacionari) būsena, o ne tikroji pusiausvyra.

Fermento kiekio pasikeitimas. Bakterijose gerai ištirtas sukeltos fermentų sintezės reiškinys, kai jos auginamos terpėje, kurioje vienintelis anglies ir energijos šaltinis yra vieni ar kiti angliavandeniai, pavyzdžiui, gliukozė. Gliukozę terpėje pakeitus laktoze sukeliama indukuota arba adaptuota (po trumpo uždelsimo fazės laikotarpio) fermento galaktozidazės (užprogramuoto laktozės geno, žr. Baltymų sintezė) sintezė, kuri skaido laktozę į gliukozę ir galaktozę. Gyvūnų audiniuose tokia greita fermentų sintezė pastebima palyginti rečiau, o sintezę skatinantis mechanizmas ištirtas tik nedaugeliui fermentų (tirozino transaminazių, serino ir treonino dehidratazės, triptofano pirolazės ir kt.). Tačiau į organizmą patekus tam tikriems nuodams, kancerogeninėms medžiagoms, alkaloidams, insekticidams ir pan., po kelių dienų pastebimas staigus fermentų aktyvumo (atitinkamai kiekio) padidėjimas – kepenų ląstelių lygaus endoplazminio tinklo hidroksilazės; pašalinių medžiagų oksidavimas į produktus, kurie nėra toksiški organizmui. Kita vertus, aprašyti atvejai, kai, veikiant tokioms hidroksilazėms, svetimos medžiagos organizme virsta toksiškesniais junginiais. Šis reiškinys, priešingas detoksikacijai, vadinamas mirtina sinteze.

Profermentai. Virškinimo trakto ir kasos proteolitiniai fermentai sintetinami neaktyvia forma, profermentų (zimogenų) pavidalu. Reguliavimas šiais atvejais priklauso nuo profermentų pavertimo aktyviais fermentais, veikiant specifiniams agentams. Taigi, tripsinas sintetinamas kasoje tripsinogeno pavidalu. Pastarasis žarnyne paverčiamas aktyviu tripsinu, veikiant kitam baltymo fermentui – enterokinazei, pirmą kartą aptiktam I. P. Pavlovo laboratorijoje. Nustatyta, kad enterokinazės aktyvinantis poveikis susilpnėja iki heksapeptido skilimo iš tripsinogeno, dėl ko susidaro natūrali tretinė tripsino struktūra ir jo aktyvusis centras (žr. aukščiau); taip pat stebima autokatalizė. Neaktyvus pepsinogenas paverčiamas aktyviu pepsinu autokataliziškai dėl ribotos proteolizės, dalyvaujant HC1, ir taip pat yra susijęs su skilimu nuo pirmojo specifinio polipeptidinio pobūdžio inhibitoriaus (žr. Paprastų baltymų metabolizmas). Neaktyvios formos proteinazių ir daugelio kitų neaktyvių pirmtakų baltymų sintezė akivaizdžiai turi tam tikrą biologinę reikšmę, neleidžianti sunaikinti organų ląsteles, kuriose susidaro profermentai.

Cheminis fermento modifikavimas. Aukščiau buvo nurodyta (žr. Baltymų chemiją), kad kai kurie baltymai posintetiškai modifikuojasi formuojant tretinę struktūrą. Paaiškėjo, kad pagrindiniai energijos apykaitos fermentai – fosforilazė, glikogeno sintetazė ir kt. – taip pat yra kontroliuojami fosforilinimo ir defosforilinimo, kurį atlieka specifiniai fermentai – proteinkinazė ir proteino fosfatazė, kurių aktyvumo lygį savo ruožtu reguliuoja hormonai. (žr. Angliavandenių apykaita). Pagrindinių fermentų aktyvumo lygį ir atitinkamai medžiagų apykaitos procesų intensyvumą lems šių fermentų fosforilintų ir defosforilintų formų santykis.

Fermentų aktyvumo reguliavimas grįžtamojo ryšio principu. Daugelyje griežtai biosintetinių reakcijų pagrindinis daugiapakopio fermentinio proceso greičio reguliavimo tipas yra grįžtamojo ryšio slopinimas, kai galutinis biosintetinės grandinės produktas slopina fermento, katalizuojančio pirmąjį žingsnį, aktyvumą.

Tarkime, kad ląstelėse vyksta daugiapakopis biosintezės procesas, kurio kiekvieną etapą katalizuoja savas fermentas:

Tokios bendros reakcijų sekos greitį daugiausia lemia galutinio produkto (P) koncentracija, kurios kaupimasis virš leistino lygio turi galingą slopinamąjį poveikį pirmajam proceso etapui, atitinkamai, fermentui E. 1.

Tokio mechanizmo, skirto metabolitų fermentų aktyvumui kontroliuoti, egzistavimas pirmą kartą buvo įrodytas E. coli tiriant izoleucino ir citidino trifosfato (CTP) sintezę. Paaiškėjo, kad izoleucinas, kuris yra galutinis produktas, selektyviai slopina treonino dehidratazės aktyvumą, kuris katalizuoja pirmąjį treonino pavertimo izoleucinu proceso etapą, apimantį penkias fermentines reakcijas. Panašiai CTP, kaip galutinis biosintezės kelio produktas, slopina pirmąjį fermentą (aspartato transkarbamoilazę), taip reguliuojant jo sintezę. Šis slopinimo tipas vadinamas grįžtamojo ryšio slopinimu arba retroinhibicija. Jo egzistavimas buvo įrodytas visuose gyvuose organizmuose ir šiuo metu laikomas vienu iš pirmaujančių fermentų aktyvumo ir ląstelių metabolizmo reguliavimo būdų apskritai 1. (1 Pažymėtina, kad reakcijos greitį (taip pat ir fermentų aktyvumą) grynai biodegradaciniuose (kataboliniuose) procesuose reguliuoja tarpiniai produktai, kurie yra ląstelės energetinės būklės rodikliai (purino nukleotidai, pirofosfatas, neorganinis fosfatas ir kt.). .)

Kita vertus, amfiboliniuose procesuose (žr. Įvadas į medžiagų apykaitą ir energiją), kurie vienu metu atlieka biosintetinę ir biodegradacinę funkciją 2, reguliavimo buvimas įrodytas tiek retroinhibicijos rūšimi, tiek makroerginiais – energetinės būsenos rodikliais. ląstelė. (2 Amfiboliniai procesai apima tokius kelius kaip glikolizė, glikogenolizė, trikarboksirūgšties ciklas, heksozės monofosfato kelias, aminorūgščių transamininimas (žr. „Metabolizmas“).). Be to, amfiboliniams procesams unikalus reguliavimo tipas, būdingas tik jiems, yra aktyvinimas pirmtaku, kai pirmasis metabolitas daugiapakopiame kelyje aktyvuoja fermentą, kuris katalizuoja paskutinę stadiją. Taigi įrodytas gliukozės-6-fosfato, kuris yra glikogeno pirmtakas, aktyvuojantis poveikis fermentui glikogeno sintetazei.

Panašūs galutinio produkto slopinimo ir pirmojo produkto aktyvavimo tipai būdingi alosteriniams (reguliuojantiems) fermentams (žr. aukščiau), kai efektorius, struktūriškai kitoks nei substratas, jungiasi prie specialaus (allosterinio) fermento molekulės centro, erdviniu atstumu nuo aktyvaus centro. Todėl įprasta atskirti allosterinį reguliavimo tipą, kuris apima ir allosterinį slopinimą, ir allosterinį aktyvavimą. Aktyvių ir neaktyvių alosterinių fermentų tarpusavio konversijos supaprastinta forma, taip pat konformaciniai pokyčiai, pastebėti prijungus substratą ir efektorius, yra pateikti Fig. 59.

Matyti, kad neigiamo efektoriaus prijungimas prie allosterinio centro sukelia reikšmingus fermento molekulės aktyvaus centro konfigūracijos pokyčius ir dėl to prarandamas fermento afinitetas savo substratui (susidaro neaktyvus kompleksas). .

Allosterinė sąveika pasireiškia pradinio reakcijos greičio priklausomybės nuo substrato arba efektoriaus koncentracijos kreivių pobūdžiu, ypač kreivių S forma (nukrypimas nuo hiperbolinės Michaelis-Menten kreivės). Tai reiškia, kad vienos substrato molekulės surišimas palengvina antrosios molekulės prisijungimą prie allosterinio centro ir taip padidina reakcijos greitį. Be to, reguliuojantiems (allosteriniams) fermentams būdinga netiesinė reakcijos greičio priklausomybė nuo fermento koncentracijos.

Kiti fermentų aktyvumo reguliavimo tipai. Egzistuoja nemažai kitų mechanizmų, kurie kontroliuoja medžiagų apykaitos procesų greitį ir tarpląstelinių fermentų aktyvumą. Tokie mechanizmai gali apimti fermentų konkurenciją dėl bendro substrato, vieno iš fermentų aktyvumo sustabdymą (įvairiose fermentų formose), kofaktorių koncentracijų ir jų formos (ypač metalo jonų) įtaką ir kompartmentalizacijos reiškinį. Kompartmentalizacijos mechanizmas, matyt, atlieka svarbų biologinį vaidmenį, erdviškai atskirdamas fermentus nuo jų substratų per biomembranas (pavyzdžiui, lizosomų fermentus: proteinazes, fosfatazes, ribonukleazes ir kitus hidrolizinius fermentus nuo medžiagų, kurias jie veikia citoplazmoje) arba yra tarpusavyje nesuderinami medžiagų apykaitos požiūriu. procesus tuo pačiu metu. Pastarųjų pavyzdžiu gali būti riebalų rūgščių sintezės keliai, kurių daugiausia yra tirpioje citoplazmos frakcijoje, ir riebalų rūgščių, susitelkusių mitochondrijose, skilimo keliai.

Fermentų aktyvumo nustatymas

Nustatant kiekybinį fermentų kiekį biologiniuose objektuose, kyla tam tikrų sunkumų, nes, išskyrus retas išimtis, fermentų koncentracijos audiniuose yra nežymiai mažos. Todėl fermentų kiekis nustatomas pagal katalizuojamos reakcijos greitį tam tikromis sutartomis matavimo sąlygomis. Esant optimalioms temperatūros, aplinkos pH ir visiško fermento prisotinimo substrato sąlygoms, greitis yra proporcingas fermento koncentracijai. Fermentinės reakcijos greitis nustatomas pagal substrato praradimo greitį arba pagal reakcijos produkto susidarymo greitį.

Fermento koncentracijai išreikšti Tarptautinės biochemijos sąjungos fermentų komisija rekomenduoja standartinį vienetą (E). Bet kurio fermento vienetas laikomas kiekiu, kuris optimaliomis sąlygomis katalizuoja 1 µmol substrato konversiją per minutę (µmol/min). Buvo pasiūlytas naujas tarptautinio fermento katalo vieneto (kat) apibrėžimas, atitinkantis fermento kiekį, galintį sukelti 1 molio substrato pavertimą produktu per 1 s (1 mol/s). Tarptautinio vieneto (E) santykis su katal gali būti išreikštas taip:

arba 1 E=1 µmol · min -1 = (1/60) µmol · s -1 = (1/60) µkat = 16,67 nkat. Taigi fermento 1E atitinka 16,67 ncat.

Taip pat rekomenduojama išmatuoti fermentų vienetus esant 25°C, optimaliam pH ir substrato koncentracijai viršijant prisotinimo koncentraciją. Tokiais atvejais greitis atitinka nulinės eilės reakciją substrato atžvilgiu ir priklausys tik nuo fermento koncentracijos.

Fermento aktyvumui išreikšti naudojamas specifinio ir molekulinio aktyvumo apibrėžimas. Specifinis fermento aktyvumas paprastai išreiškiamas fermentinio aktyvumo vienetų skaičiumi 1 mg baltymo (arba katalų skaičiumi 1 kg aktyvaus baltymo). Substrato molekulių, kurias per minutę paverčia viena fermento molekulė, skaičius paprastai vadinamas apyvartos skaičiumi arba molekuliniu aktyvumu. Taigi viena eritrocitų katalazės molekulė per 1 minutę gali suskaidyti 5 · 10 6 vandenilio peroksido molekules 1. (1 1 neorganinės geležies atomui, kuris taip pat katalizuoja H 2 O 2 skilimą, suskaidyti H 2 O 2 molekulių skaičių, kurį katalazė suskaido per 1 s, prireiktų daugiau nei 300 metų. Šis pavyzdys yra aiškus vienos iš pagrindinių fermentų savybių – didelio katalizinio aktyvumo – įrodymas.)