Ажлын танилцуулга
Асуудлын хамаарал.Тарваган тахал бол эмгэг төрүүлэгчийн дамжих механизмтай, зоонозын байгалийн голомт, ялангуяа аюултай хорио цээрийн бактерийн халдварт өвчин юм [Черкасский, 1996]. Тарваган тахал нь хүн амд бодит аюул занал учруулж байна, зарим нь ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад байдаг байгалийн олон тооны тахлын голомтууд байдаг [Оншценко нар, 2004]. Энэ өвчинд нэрвэгдээгүй хөрш зэргэлдээ орнуудаас болон биотеррорист үйлдлээс болж тахлын үүсгэгчийг Орост нэвтрүүлэх магадлал өндөр байна. ДЭМБ-ын мэдээлснээр дэлхий даяар жил бүр тарваган тахлын 2000 гаруй тохиолдол бүртгэгдэж, ихэнх нь үхэлд хүргэдэг. 2009 онд Хятадын Хайнань Түвдийн өөртөө засах оронд уушгины хатгалгааны томоохон дэгдэлт гарч, мөн хэд хэдэн хүн нас барсан байна. Эдгээр бүх баримтууд нь орчин үеийн технологид суурилсан тахлын эмгэг төрүүлэгчийг оношлох шинэ, өндөр үр дүнтэй арга, түүний үүсгэсэн онцгой аюултай өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх, эмчлэх арга хэрэгслийг яаралтай боловсруулахыг шаарддаг.
Одоогоор ашигласан ангилал Yersinia pestisзөвхөн морфологи, соёлын, биохимийн болон бусад фенотипийн шинж чанарыг харгалзан үзсэн [Безсонова, 1928; Борзенков, 1938; Туманский, 1957; Тимофеева, 1968; Кутырев, Проценко, 1998; Devignat, 1951] бөгөөд эдгээр шинж чанаруудын хувьсах чадвартай холбоотой сул тал байсангүй. Гэсэн хэдий ч генетик, молекул микробиологийн суурь ололт амжилт нь тахал үүсгэгчийг системчлэх асуудлыг шийдвэрлэхэд түүний молекул генетикийн шинж чанарыг ашиглахад үндэслэн чанарын шинэ түвшинд гаргах боломжийг олгож байна.
Одоогийн байдлаар хүлээн зөвшөөрөгдсөн дотоодын ангиллын дагуу тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгуудыг үндсэн болон 4 бага (Кавказ, Алтай, Гиссар, Улегей) дэд зүйлд хуваадаг [Тимофеева, 1985; Кутырев, Проценко, 1998]. Гадаадын нийтлэг ангиллын дагуу омог Y. pestisОлон тооны биохимийн шинж чанаруудын ялгааг үндэслэн (глицериныг исгэх, нитратыг багасгах, аммиакийг исэлдүүлэх чадвар) болон түүх, газарзүйн үндэслэлээр тэдгээрийг antiqua (эртний), medievalis (дунд зууны) болон orientalis (зүүн) гэсэн гурван биовард хуваадаг. ). Фенотипийн шинж чанарын дагуу үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь гадаадын ангилалд хүлээн зөвшөөрөгдсөн гурван биовар (эртний, дундад зууны, дорнын) тохирч байна. Гэсэн хэдий ч омог Y. pes-
4 tisОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тарваган тахлын байгалийн голомтод эргэлдэж байгаа нь зарим биоварт хамаарах байдлаар системчлэгдээгүй хэвээр байна.
Дифференциал ач холбогдолтой биохимийн шинж чанарын илэрхийлэлд хамгийн идэвхтэй нь глицериныг исгэж, дундад зууны үеийн биоварын омог юм ". пестиснитратыг багасгах чадваргүй, харин глицерол, арабинозыг исгэх; Зүүн биоварын омгууд нь глицериныг исгэдэггүй, харин нитратыг идэвхтэй багасгаж, арабинозыг ашигладаг.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь дүрмээр бол өндөр хоруу чанартай бөгөөд тархалтын өндөр ач холбогдолтой байдаг. Тэд рамноз ба мелибиозыг исгэдэггүй, PESTICE I-д мэдрэмтгий биш, изоцитралазын үйлдвэрлэл өндөртэй байдаг. Бага зэргийн дэд зүйлийн омгууд нь рамноз ба мелибиозыг исгэдэг, пестицин I-д мэдрэмтгий, изоцитрат-лиазын идэвхгүй, лабораторийн амьтдад сонгомол хоруу чанартай, тархалтын ач холбогдол багатай.
Биохимийн шинж чанар, омгийг хуваахад ашигладаг өөр өөр илэрхийллийн генетикийн шалтгаанууд Y. pestisбиовар болон дэд зүйлүүдийг өнөөг хүртэл хангалттай судлаагүй байна. Найдвартай батлагдсан цорын ганц зүйл бол зүүн биоварын омог дахь глицерол исгэх дутагдалтай байгаа шалтгаан нь глицерол-3-фосфат дегидрогеназын генийн мутаци юм. (glpD).Энэ генд зүүн биоварын бүх омгууд 93 bp-ийн устгалтай болохыг харуулсан. . Уран зохиолд генийн бүтцийн ялгааг тодорхойлох цөөн хэдэн бүтээл байдаг Y. pestisрамнозын нитратыг багасгах, исгэх үүрэгтэй үндсэн ба жижиг дэд зүйлүүд [Куклева нар, 200 2009; Анисимов нар, 2004; Жоу нар, 2004].
Хоол тэжээлийн хэрэгцээний хувьд тахлын омгийн нэг төрлийн бус байдлын шалтгаан тодорхойгүй хэвээр байна. Төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос үүссэн омгууд нь хоол тэжээлийн хэрэгцээгээрээ ялгаатай бөгөөд генийн солилцооны эмгэгээр тодорхойлогддог бөгөөд омгийг ялгах генетикийн схемд ашиглаж болно. Y. pestisтөрөл бүрийн байгалийн тахал голомтоос.
Микробиологи, биохимийн шинж чанарын янз бүрийн илэрхийлэлд тулгуурласан генийн бүтцийн өөрчлөлтийг тодорхойлох нь тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгийг ангилах генетикийн схемийг бий болгох, мөн төрөл зүйл доторх хувьслын үндсэн чиглэлийг тодорхойлох найдвартай мэдээлэл болно. Y. pestis.
5 Ажлын зорилго.Тарваган тахал үүсгэгчийн омгийг дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндэслэлийг тодорхойлох.
Судалгааны зорилго:
Ажилд ашигласан омгийн шинж чанарыг тодорхойлох Y. pestis,ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тахлын байгалийн голомтод тусгаарлагдсан биохимийн шинж чанар (нитратыг бууруулах, изоцитрат лиаза үйлдвэрлэх, арабиноз ба мелибиозын исгэх) нь дэд зүйл, биовард хуваагддаг. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй омгууд нь тодорхой биоварт хамаарах эсэхийг тогтоох.
Нитратыг багасгах, арабиноз исгэх зэрэг биоваруудад хуваагдахад ашигладаг ялгаатай шинж чанарыг кодлодог генийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг судлах.
Генийн өөрчлөлтийг тодорхойлох Y. pestis,тахлын эмгэг төрүүлэгчийн үндсэн ба бага дэд зүйлүүдийг ялгах үндэс болох мелибиозын исгэх, изоцитрат лиазын үйлдвэрлэлийг тодорхойлох.
Омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодорхойлох Y. pestisКавказын дэд зүйлүүд, тэдгээрийн ауксотрофийн генетикийн үндэс суурийг бий болгодог.
Олж авсан үр дүнг омгийн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход ашиглах хэтийн төлөвийг үнэлэх. Y. pestisмөн энэ эмгэг төрүүлэгчийн дотоод хувьслын үндсэн чиглэлийг тогтоох.
Ажлын шинжлэх ухааны шинэлэг зүйл.Микробиологи, биохими, генетикийн нарийн төвөгтэй шинжилгээний мэдээлэлд үндэслэн ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй тахал төрөгчийн омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоваруудад хамаардаг болохыг тогтоожээ.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн зарим омгийн нитрат бууруулах идэвхгүй байдлын шалтгаан нь 613-р байрлалд нэг нуклеотидын орлуулагч G -»T байгаатай холбоотой болохыг анх удаа харуулсан. периплазмын нитрат редуктазын ген хос,Энэ нь эдгээр омгууд дундад зууны үеийн биоварт хамаарах болохыг нотолж байна. Алтайн болон Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад энэ шинж чанар илрэхгүй байгаа нь өөр генийн 302-р байрлалд тимусын нуклеотид (+T) орсны улмаас үүсдэг. ссуА,Энэ нь унших хүрээг өөрчлөх, кодлогдсон тээврийн уургийн бүтцийг зөрчихөд хүргэдэг - SsuA, мөн нитратыг бууруулахад оролцдог.
Энэ нь анх удаа омог дахь арабиноз исгэх байхгүй гэдгийг тогтоосон] хортон шавьжАлтай ба Хисарын дэд зүйл нь арабиноз опероны зохицуулалтын генийн мутацитай холбоотой юм. тийм ээ,Энэ нь генийн эхэн үеэс эхлэн 773-р байрлалд гуанин нуклеотид (+G) оруулдаг бөгөөд энэ нь арабиноз опероны генийн транскрипцийг эхлүүлэхэд шаардлагатай зохицуулалтын уургийн AgaC-ийн бүтцийг өөрчлөх, тасалдуулахад хүргэдэг. .
Зохицуулагч генд хоёр нуклеотид (+CC) орсонтой холбоотой гол болон жижиг дэд зүйлийн тахал үүсгэгчийн омог дахь изоцитр-лиазын янз бүрийн үйлдвэрлэлийн генетик үндэс анх удаа тогтоогдсон. iclR 26-р байранд! 270, энэ нь түүгээр кодлогдсон IclR ацетат опероны дарангуйлагч уураг идэвхгүй болоход хүргэдэг бөгөөд үндсэн дэд зүйлийн омог дахь изоцитр лиаза ферментийн үүсгэгч синтезийн шалтгаан болдог. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь штакт генийг агуулдаг iclRизоцитрат лиазын үндсэн синтез хийх чадваргүй байдаг.
Омог дахь мелибиозын исгэх үйл явц байхгүй болохыг харуулсан Y. pestisүндсэн дэд төрөл нь оруулах дарааллыг нэвтрүүлсэнтэй холбоотой юм IS285ген melB,галактозид пермеаза ферментийг кодлох. Гол бус дэд зүйлийн омогуудад генд IS2&5 оруулдаг melBбайхгүй.
Кавказын дэд зүйлүүдийн омгийн ауксотрофийн генетик үндэс нь анх удаагаа холбоотой байдаг. -тайоруулах дарааллын хэрэгжилт IS100генүүд аргАТэгээд aroF, 10 bp оруулах. ген рүү aroG,тимин нуклеотидын генийг оруулах thiHv. 13 bp устгах генд thiG.
Омгийн молекулын шинж чанарыг олж авсан Y. pestisДэд зүйл, биоварт хуваагдах үндсэн биохимийн шинж чанарыг кодлодог генүүд дээр суурилсан үндсэн болон шинэ дэд зүйл нь тахал үүсгэгчийг төрөл зүйл дотор ангилах генетикийн схемийг боловсруулах үндэс суурийг бүрдүүлдэг.
Ажлын үр дүнд үндэслэн “Тарваган тахал үүсгэгч омгийн дэд зүйлүүдийг дэс дарааллын аргаар тодорхойлох арга” (No2009116913. 2009 оны 5 дугаар сарын 14-ний өдрийн тэргүүлэх чиглэл. Патент олгох шийдвэр гаргаж, " Омгийн дэд зүйлүүдийг ялгах арга Yersinia pestisолон давхаргат дарааллаар бичих аргаар (No 2009146094. тэргүүлэх чиглэл 11.12.2009).
Ажлын практик ач холбогдол.Ажлын үр дүнд үндэслэн “Тарваган тахал үүсгэгч омгийн дэд зүйлүүдийг генийн дараалалд үндэслэн тодорхойлох” арга зүйн зөвлөмжийг боловсруулан баталлаа. rhaSТэгээд тийм ээ, rhamnose болон arabinose-ийн исгэх үйл явцыг хянах" (RosNIHR "Microbe"-ийн захирал баталсан. 2009 оны 6-р сарын 16-ны өдрийн 6-р протокол) болон "Дэд зүйлүүдийг тодорхойлох;
7 омгийн шинж чанар Yersinia pestisолон талт дарааллаар бичих аргаар (RosNIPCI "Microbe"-ийн захирал баталсан. 2010 оны 2-р сарын 23-ны өдрийн 1-р протокол).
Эмгэг төрүүлэгч бактерийн улсын цуглуулгад гурван омог хадгалагддаг. Y. pestisАлтайн KM 910, Гиссарын KM 596, Улегагийн KM 1861 нь эдгээр дэд зүйлүүдийн лавлагаа омог юм.
Судалгааны явцад олж авсан омгийн генетикийн зохион байгуулалтын талаархи мэдээлэл Y. pestisРосNIPCI "Microbe" компанийн мэргэшүүлэх, ахисан түвшний сургалтанд "Тахал үүсгэгчийн генетик" сэдвээр лекц уншихад ашигладаг.
Хамгаалалтын заалтууд:
ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй гол дэд зүйлийн тахлын үүсгэгч омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоваруудад хамаардаг нь эдгээр омгийн микробиологи, биохими, генетикийн шинж чанарын иж бүрэн дүн шинжилгээнээс нотлогддог.
Омог хуваахдаа биохимийн шинж чанарын янз бүрийн илрэлүүдийн үндэс суурь Y. pestisДэд зүйл болон биоварууд нь эдгээр шинж чанарыг кодлодог генүүдэд янз бүрийн төрлийн мутаци агуулдаг. Дундад зууны үеийн биоварын үндсэн дэд зүйлийн омог дахь нитратыг бууруулах чадваргүй байгаа нь генд утгагүй мутаци (G - T) байгаатай холбоотой юм. хоспериплазмын нитратын редуктаза, Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгуудад - нэг нуклеотидыг генд оруулах замаар ссуАпериплазмын тээвэрлэлтийн уураг СсуА.Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад арабиноз исгэх байхгүй байгаа нь генийн дараалалд гуанин нуклеотид орсонтой холбоотой юм. тийм ээS.
Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн омгуудын биохимийн идэвхжил нь хэд хэдэн ялгаатай шинж чанаруудын дагуу ялгаатай байдаг нь тэдгээрийг үндсэн дэд зүйлүүдэд кодлодог генийн бууралт, бага дэд зүйлүүдэд бүрэн бүтэн байдгаас үүдэлтэй юм. Үндсэн дэд зүйлүүдийн омгуудад мелибиоз исгэхгүй байх нь генд нэвтэрсэнтэй холбоотой юм. melBЭнэ дэд зүйлийн омог дахь галактозид нэвчилт, изоцитрат лиазын үндсэн нийлэгжилт нь зохицуулалтын генийн дараалалд хоёр нуклеотид (CC) орсонтой холбоотой юм. iclR.Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн генийг агуулдаг melBТэгээд iclR.
Омгийн хоол тэжээлийн олон хэрэгцээний шалтгаан Y. pestisКавказын дэд зүйл нь амин хүчил, витамины биосинтезийн хэд хэдэн генийг идэвхгүйжүүлэх явдал юм. Энэ дэд зүйлийн омгуудын аргининаас хамаарах хамаарал нь генд IS70O оруулснаас үүдэлтэй юм. аргА,фенилаланины хувьд - 10 bp оруулна. ген рүү aroG,тирозины хувьд - оруулах IS100ген рүү aroF,тиамины хувьд (13 bp устгах замаар BO - генд thiGболон сингл оруулах
8 дахь нуклеотид М.Н.Кавказын болон бусад дэд зүйлүүдийн омог, түүнчлэн тахал үүсгэгчийн биоварын тодорхойлсон мутацийн бүхэл бүтэн цогцолбор дээр үндэслэн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход ашиглаж болох өвөрмөц генотипүүдийг тодорхойлсон болно. Y. pestis.
Ажлын баталгаажуулалт.Диссертацийн материалыг ТУХН-ийн гишүүн орнуудын улс хоорондын шинжлэх ухаан, практикийн IX бага хуралд “Тусгаар улсуудын хамтын нөхөрлөлийн гишүүн орнуудын нутаг дэвсгэрт халдварт өвчинтэй тэмцэх дэлхийн стратегийг хэрэгжүүлэхэд орчин үеийн технологи”, Волгоград хотод танилцуулж, хэлэлцүүлэв. , 2008; Олон улсын VI бага хурал “Молекулын оношлогоо ба биоаюулгүй байдал”, М., 2009; 2010 оны 5-р сарын 25-аас 27-ны хооронд Хэрэглэгчийн эрх ашгийг хамгаалах, хүний сайн сайхны төлөөх холбооны албаны залуу эрдэмтэн, мэргэжилтнүүдийн "Биологийн аюулгүй байдлыг хангах орчин үеийн технологи" бага хурлын шинжлэх ухаан, практикийн сургууль; RosNIPCI "Microbe"-ийн жилийн эцсийн чуулганд, Саратов 2008 - 2010 он.
Дипломын ажил
Одиноков, Георгий Николаевич
Эрдмийн зэрэг:
Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигч
Дипломын ажил хамгаалах газар:
HAC тусгай код:
03.02.03, 03.02.07
Мэргэжил:
Микробиологи
Хуудасны тоо:
ТАНИЛЦУУЛГА
БҮЛЭГ 1. Уран зохиолын тойм
1.1. 15-р тахлын эмгэг төрүүлэгчийн геномын зохион байгуулалтын талаархи орчин үеийн санаанууд
1.2. Yersinia pestis-ийн төрөл зүйлийн доторх ангиллын схемүүд 28 ӨӨРИЙН СУДАЛГАА
БҮЛЭГ 2. МАТЕРИАЛ, АРГА ЗҮЙ
2.1. Ажилд ашигласан бактерийн омог, тэдгээрийг тариалах нөхцөл 36
2.2. Y. pestis омог дахь глицерин, арабиноз, рамноз, мелибиоз, изоцитралазын нийлэгжилт, 46 исгэх, денитрификаторын үйл ажиллагааг судлах арга.
2.3. Y. pestis омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодорхойлох
2.4. Бактерийн ДНХ-ийн тусгаарлалт
2.5. Полимеразын гинжин урвал явуулах
2.6. Үр дүнгийн электрофоретик бичлэг
2.7. Генүүдийн нуклеотидын дарааллыг тодорхойлох
2.8. Филогенетик шинжилгээ хийх
БҮЛЭГ 3. БАЙГАЛИЙН ТӨРӨЛ ҮЙЛДВЭРИЙН АНХАН БА ҮНДСЭН БУС БАЙГАЛТЫН Y. pestis омгийн микробиологи, биохимийн шинж чанарын шинжилгээ.
ТАХЛЫН ТӨВЛӨЛТ
3.1. Төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос гаралтай Y. pestis омгийн шинж чанар нь дэд зүйл, биоварт хуваагдах үндсэн биохимийн шинж чанар.
3.2. Кавказын дэд зүйлийн K resNB омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодорхойлох
БҮЛЭГ 4. ТАХАЛ ӨВЧНИЙ ШАЛТГААН БИОВАРЫН ЯЛГАЛАГДАХАД АШИГЛАХ БИохимийн шинж чанарыг кодлодог генийн бүтэц-функцын 60 зохион байгуулалтыг тодорхойлох.
4.1. Опероны 60-р хос ген болон нитратын бууралтыг кодлодог бусад генүүдийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг тодорхойлох.
4.2. K. опероны омог дахь арабиноз опероны генийн нуклеотидын дарааллын хэлбэлзлийн харьцуулсан шинжилгээ
БҮЛЭГ 5. ТАХЛЫН ШАЛТГААНЫ ҮНДСЭН болон ҮНДСЭН БУС дэд зүйлд хуваахдаа 83 ЯЛГЫН ТЭМДЭГЛЭЛИЙГ КОДЧИЛСОН ГЕНИЙН ӨӨРЧЛӨЛТИЙГ ТОДОРХОЙЛОЛТ.
5.1. Мелибиозын исэлтийг кодлодог үндсэн ба жижиг дэд зүйлийн 83-р тахал үүсгэгчийн омгийн генийн бүтцийн өөрчлөлтийг тодорхойлох.
5.2 U. periasus омгийн изоцитрат лиаза биосинтезийн генийн мутацийг тодорхойлох.
6-р бүлэг
6.1. Аргинины биосинтезд оролцдог генийн нуклеотидын дарааллын хэлбэлзлийн компьютерийн харьцуулсан шинжилгээ
6.2. Фенилаланин, тирозин, 101 витамин В1 (тиамин) биосинтезийн генийн мутацийг илрүүлэх.
6.3. Кавказын дэд зүйлийн омог дахь аргинин, фенилаланин, тирозин, витамин В1 (тиамин) -ийн биосинтезийн генийн бүтэц, үйл ажиллагааны төлөв байдлыг судлах.
БҮЛЭГ 7. ТАХАЛ ӨВЧӨГЧИЙН ӨВГӨӨЛ ДОТООД АНГИЛАХ ГЕНЕТИК БҮТЭЭГДЭХҮҮНИЙГ АВАХ ТӨЛӨВЛӨГИЙН ҮНЭЛГЭЭ.
Диссертацийн танилцуулга (конспектийн хэсэг) "Үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн Yersinia pestis омгийн биохимийн шинж чанарын генетикийн шинжилгээ" сэдвээр.
Асуудлын хамаарал
Тарваган тахал бол эмгэг төрүүлэгчийн дамжих механизмтай, зоонозын байгалийн голомт, ялангуяа аюултай хорио цээрийн бактерийн халдварт өвчин юм [Черкасский, 1996]. Тарваган тахал нь хүн амд бодит аюул занал учруулдаг бөгөөд үүний 42 нь ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад байдаг [Онищенко нар, 2004]. Энэ өвчинд нэрвэгдээгүй хөрш зэргэлдээ орнуудаас болон биотеррорист үйлдлээс болж тахлын үүсгэгчийг Орост нэвтрүүлэх аюултай. ДЭМБ-ын мэдээлснээр дэлхий даяар жил бүр тарваган тахлын 2000 гаруй тохиолдол бүртгэгдэж, ихэнх нь үхэлд хүргэдэг. 2009 онд Хятадын Хайнань Түвдийн өөртөө засах оронд уушгины хатгалгааны томоохон дэгдэлт гарч, мөн хэд хэдэн хүн нас барсан байна. Эдгээр бүх баримтууд нь тахал өвчний үүсгэгч бодис, түүний үүсгэгч онцгой аюултай өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх, эмчлэх орчин үеийн технологид суурилсан шинэ, өндөр үр дүнтэй оношлогооны аргуудыг яаралтай боловсруулахыг шаарддаг.
Өнөөг хүртэл ашигласан Yersenia pestis-ийн ангилалд зөвхөн морфологи, соёлын, биохимийн болон бусад фенотипийн шинж чанарууд, түүнчлэн эмгэг төрүүлэгч омгийн хоруу чанарын ялгааг харгалзан үзсэн болно [Безсонова, 1928; Берлин A.JL нар, 1938; Туманский, 1959; Тимофеева, 1972; Кутырев нар, 1998; Devignat, 1951; Дэйл нар, 2002; Коббс нар, 2004; Деннис нар, 2004; Лазарус нар, 2004]. Ийм ангилал нь мэдээжийн хэрэг Y. pestis-ийг системчлэхэд хувь нэмэр оруулсан бөгөөд ерөнхийдөө энэ зүйлийн доторх жинхэнэ филогенетик харилцааг тусгасан болно. Эдгээр нь өнөөг хүртэл ач холбогдлоо алдаагүй бөгөөд практик микробиологид өргөн хэрэглэгдэж байгаа боловч сүүлийн үеийн генетик ба молекул микробиологийн ололт амжилт нь тахлын үүсгэгч бодисыг системчлэх асуудлыг чанарын хувьд шинэ түвшинд шилжүүлэх боломжийг олгож байна. Түүний молекул генетикийн шинж чанарыг ашиглахад үндэслэсэн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн одоо байгаа ангиллыг генетикийн үндсэн дээр орчуулах нь системчлэлийн найдвартай байдал, найдвартай байдал, чанарыг сайжруулахаас гадна сонгодог схемийн янз бүрийн сул талуудаас зайлсхийх болно. Эмгэг төрүүлэгчийн фенотип шинж чанар Бактерийн геном нь ДНХ-ийн засварын системээр санамсаргүй өөрчлөлтөөс хамгаалагдсан нэлээд консерватив бүтэцтэй тул генетикийн ялгах схемүүд нь ашигласан фенотипийн ангилалтай харьцуулахад илүү найдвартай, дахин үржих боломжтой бөгөөд илүү нарийвчлалтай байдаг.
Одоогийн байдлаар хүлээн зөвшөөрөгдсөн дотоодын ангиллын дагуу тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгуудыг үндсэн ба 4 бага (Кавказ, Алтай, Гиссар, Өлегэй) дэд зүйлд хуваадаг [Кутырев нар, 1998]. Гадаадын өргөн тархсан ангиллын дагуу 7. парабены омгуудыг биохимийн хэд хэдэн шинж чанарын ялгаа (глицериныг исгэх, нитратыг багасгах, аммиакийг исэлдүүлэх чадвар) болон түүх, газарзүйн зарчмаар гурван биоварт хуваадаг: anpyanaia. (эртний), tesNeuainz (дунд зууны) болон openianus (дорно дахины). Фенотипийн шинж чанарын дагуу үндсэн дэд зүйлийн омог нь гадаадын ангилалд хүлээн зөвшөөрөгдсөн гурван биовар (эртний, дундад зууны, дорнын) тохирч байна. Гэсэн хэдий ч тахлын байгалийн голомтод эргэлдэж буй тахал үүсгэгчийн омгууд c. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнууд биоварын харьяаллаар системгүй хэвээр байна.
Дифференциал ач холбогдолтой биохимийн шинж чанарын илэрхийлэлийн хувьд хамгийн идэвхтэй нь эртний биоварын омог юм. Тэд глицериныг исгэж, денитратжуулах үйлчилгээтэй. Дундад зууны үеийн биовар U. reese-ийн омгууд нь нитратыг багасгах чадваргүй, харин глицерол, арабинозыг исгэх чадвартай байдаг. Зүүн биоварын омгууд нь глицериныг исгэдэггүй, харин нитратыг идэвхтэй багасгаж, арабинозыг ашигладаг.
Y. pestis омгийг биовар болгон хуваахад ашигласан биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн шалтгааныг өнөөг хүртэл хангалттай судлаагүй байна. Уран зохиолд энэ асуудлын талаархи цөөн тооны хэвлэлүүд байдаг. Найдвартай батлагдсан цорын ганц зүйл бол зүүн биоварын омог дахь глицерол исгэх дутагдалтай байгаа шалтгаан нь глицерол-3-фосфат дегидрогеназа (glpD) генийн мутаци юм. Зүүн биоварын бүх омгууд энэ генд 93 bp-ийн устгалтай болохыг харуулсан. . Биоварыг ялгахад ашигладаг бусад биохимийн шинж чанарыг тодорхойлдог генийн өөрчлөлттэй холбоотой зөрчилтэй мэдээлэл байдаг.
Y. pestis-ийг 1985 онд Тарваган тахлын нянгийн ангилал зүйн бүх холбоотны хурлаас баталсан ангиллын дагуу дэд зүйлүүдэд хуваах нь омгийн биохимийн тэгш бус үйл ажиллагаа, тэдгээрийн лабораторийн амьтадтай харьцуулахад хоруу чанарын ялгаа болон янз бүрийн ландшафт-газарзүйн байршил [ Кутырев, Проценко, 1998; Анисимов нар, 2004]. Үндсэн дэд зүйлүүдийн омгууд нь дүрмээр бол өндөр хоруу чанартай бөгөөд тархалтын өндөр ач холбогдолтой байдаг. Тэд рамноз ба мелибиозыг исгэдэггүй, пестицин I-д мэдрэмтгий биш, изоцитралазын үйлдвэрлэл өндөртэй байдаг. Бага зэргийн дэд зүйлийн омгууд нь рамноз ба мелибиозыг исгэдэг, пестицин I-д мэдрэмтгий, изоцитрат-лиазын идэвхгүй, лабораторийн амьтдад сонгомол хоруу чанартай, тархалтын ач холбогдол багатай.
Төрөл бүрийн дэд зүйлүүдийн тахал үүсгэдэг омгийн янз бүрийн биохимийн үйл ажиллагааны генетикийн үндэслэлийг бараг судлаагүй байна. Гадаадад ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод тархсан бага зэргийн дэд зүйлийн омгийн гадаад цуглуулгад байхгүй тул энэ асуудлыг бага судалсан байна. Дотоодын уран зохиолд генийн бүтцийн ялгааг тодорхойлох цөөн хэдэн бүтээл байдаг, U. resI үндсэн болон бага дэд зүйл; нитратыг багасгах, рамнозыг исгэхийг кодлох [Eroshenko et al., 2008; Куклева нар, 2008, 2009]. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тархаж буй тахлын эмгэг төрүүлэгчийн үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн омог нь нитратыг бууруулах, глицерин, арабиноз, мелибиоз, изоцитрат лиазыг исгэх зэрэгт оролцдог генийн бүтэц болон ангилахад чухал ач холбогдолтой бусад шинж чанаруудын хувьд судлагдаагүй хэвээр байна. Тарваган тахлын нянгийн омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээний хувьд нэг төрлийн бус байдгийн шалтгааныг тогтоогоогүй байна. Тарваган тахлын янз бүрийн голомтоос гаралтай омгууд нь өөр өөр хоол тэжээлийн хэрэгцээтэй байдаг бөгөөд энэ нь завсрын бодисын солилцооны генийн алдагдлаар тодорхойлогддог бөгөөд үүнийг генетикийн схемд омог ялгах ¥ ашиглаж болно. төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос үүснэ.
Микробиологийн болон биохимийн шинж чанарын янз бүрийн илэрхийлэлд тулгуурласан генийн бүтцэд гарсан өөрчлөлтийг тодорхойлох нь тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгийг ангилах генетикийн схемийг бий болгох, мөн U-ийн төрөл зүйлийн дотоод хувьслын үндсэн чиглэлийг тодорхойлох найдвартай үндэс суурь болно. печни.
Ажлын зорилго. Тарваган тахал үүсгэгчийн омгийг дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндэслэлийг тодорхойлох.
Судалгааны зорилго:
1. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын тахлын байгалийн голомтод тусгаарлагдсан ажилдаа ашигласан Г.ресизийн омгуудыг биохимийн шинж чанараар нь (нитратыг бууруулах, изоцитрат лиаза үйлдвэрлэх, арабиноз, мелибиозыг исгэх) тодорхойлох. дэд зүйл болон биовард хуваагдах үндэс суурь болдог. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй омгууд нь тодорхой биоварт хамаарах эсэхийг тогтоох.
2. Нитратыг багасгах, арабиноз исгэх зэрэг биоваруудад хуваагдахад хэрэглэгддэг дифференциал шинж чанарыг кодлодог генийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг судлах.
3. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн болон бага дэд зүйлүүдийг ялгах үндэс болох мелибиозын исгэх, изоцитрат лиазын нийлэгжилтийг тодорхойлдог U.ribbi-ийн генийн өөрчлөлтийг тодорхойлох.
4. Кавказын дэд зүйлийн U. rhenium омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодорхойлж, ауксотрофийн генетикийн үндсийг тогтоох.
5. Гарсан үр дүнг ашиглах хэтийн төлөвийг үнэлж, U. paratilis омгийн төрөл зүйлийн доторх ангилалын генетикийн схемийг бий болгож, энэ эмгэг төрүүлэгчийн дотоод хувьслын үндсэн чиглэлийг тогтооно.
Ажлын шинжлэх ухааны шинэлэг зүйл. Микробиологи, биохими, генетикийн иж бүрэн шинжилгээний мэдээлэлд үндэслэн ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод тархаж буй тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоваруудад хамаардаг болохыг тогтоожээ.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн зарим омгийн нитрат бууруулах идэвхгүй байдлын шалтгаан нь 613-р байрлалд Т-тэй нэг нуклеотидын орлуулагч О байгаатай холбоотой болохыг анх удаа харуулсан. периплазмын нитрат редуктазын ген - хос А нь эдгээр омгууд нь дундад зууны үеийн биоварт хамаарах болохыг нотолж байна. Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад энэ шинж тэмдэг илрэхгүй байгаа нь өөр генийн 302-р байрлалд тимин нуклеотид (+T) орсонтой холбоотой бөгөөд энэ нь унших хүрээг өөрчлөх, унших үйл явцыг тасалдуулахад хүргэдэг ген юм. кодлогдсон тээврийн уургийн бүтэц -8 eA, мөн нитратыг бууруулахад оролцдог.
Алтай, Хисар дэд зүйлийн U. resia омогт арабиноз исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь зохицуулалтын ген болох арабиноз опероны agaC-д өөрчлөлт орсонтой холбоотой болох нь анх удаа тогтоогдсон. генийн эхэн үеэс эхлэн 773-р байрлалд байрлах гуанин нуклеотид (+b) нь арабинозын генийн транскрипцийг эхлүүлэхэд шаардлагатай зохицуулалтын уургийн AgaC-ийн бүтцийг зөрчиж, унших хүрээг өөрчлөхөд хүргэдэг. оперон.
Үндсэн болон бага дэд зүйлийн тарваган тахал үүсгэгчийн омгуудад изо-цитрат лиазыг янз бүрээр үйлдвэрлэх генетикийн үндэс анх удаа тогтоогдсон бөгөөд энэ нь тахлын дотор хоёр нуклеотид (+CC) орсонтой холбоотой юм. зохицуулалтын ген ShK. 269-270 байрлалд байгаа нь түүгээр кодлогдсон IcIR ацетат опероны дарангуйлагч уураг идэвхгүй болоход хүргэдэг бөгөөд үндсэн дэд зүйлийн омог дахь изоцитрат лиаза ферментийг үүсгэгч синтезийн шалтгаан болдог. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн iIII генийг агуулдаг бөгөөд изоцитралазын үндсэн синтез хийх чадваргүй байдаг.
Гол дэд зүйлийн 7. давирхайн омогт мелибиоз исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь галактозид нэвчилт ферментийг кодлодог ген1В-д 18255-р оруулах дараалал нэвтэрсэнтэй холбоотой болох нь тогтоогдсон. Бага зэргийн дэд зүйлийн омгийн хувьд te1B генд 1В255 оруулахгүй.
Кавказын дэд зүйлүүдийн омгийн ауксотрофийн генетик үндэс нь анх удаа илэрсэн бөгөөд энэ нь a^A ба агора генд 1$>100 оруулах дараалал, 10 bp оруулгатай холбоотой юм. agoO генд тимин нуклеотидыг d/Ru генд оруулах замаар 13 bp-ээр устгана. gcJ генд.
Дэд зүйл, биоварт хуваагдах үндсэн биохимийн шинж чанарыг кодлодог генийн дагуу үндсэн ба бага дэд зүйлийн U. paratilis омгийн молекулын шинж чанар нь тахал үүсгэгчийг төрөл зүйл дотор ангилах генетикийн схемийг боловсруулах үндэс суурийг бүрдүүлдэг.
Ажлын үр дүнд үндэслэн “Тарваган тахал үүсгэгч омгийн дэд зүйлд хамаарлыг дэс дарааллын аргаар тодорхойлох арга” (No2009116913. Тэргүүлэх чиглэл 2009 оны 5 дугаар сарын 14-ний өдөр. Нааштай шийдвэр гаргалаа) шинэ бүтээлийн хүсэлтийг гаргасан. патент) болон “Multilocus sequencing method-typing ашиглан Yersinia pestis омгийн дэд зүйлүүдийг ялгах арга (No 2009146094. Тэргүүлэх чиглэл 2009-12-11).
Ажлын практик ач холбогдол. Ажлын үр дүнд үндэслэн "Рамноз ба арабинозын исгэх үйл явцыг хянадаг rhaS ба agaC генийн дараалалд үндэслэн тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийн дэд зүйлүүдийг тодорхойлох" арга зүйн зөвлөмжийг боловсруулж батлав (РосНИПЦИ-ийн захирал баталсан " Микроб. 2009 оны 6-р сарын 16-ны өдрийн 6-р протокол) болон "Олон талт дарааллаар хэвлэх аргыг ашиглан Yersinia pestis-ийн дэд зүйлийн омгийг тодорхойлох" (РосNIPCI "Microbe"-ийн захирал баталсан. 2010 оны 2-р сарын 23-ны өдрийн 1-р протокол).
Эмгэг төрүүлэгч нянгийн улсын цуглуулгад Алтайн Y. pestis KM 910, Гиссарын KM 596, Өлэгэй дэд зүйлийн КМ 1861 гэсэн гурван омог эдгээр дэд зүйлийн лавлагаа омог болгон хадгалсан.
Судалгааны явцад олж авсан Y. pestis омгийн генетикийн зохион байгуулалтын талаархи мэдээллийг энэ сэдвээр лекц уншихдаа ашигладаг. Тарваган тахал үүсгэгчийн генетик RosNIPCI "Microbe"-ийн онцгой аюултай халдварын чиглэлээр мэргэшүүлэх курсууд болон РосNIPCHI "Microbe"-ийн "бактериологи" мэргэжлээр эмч нарт зориулсан ахисан түвшний сургалтын хөтөлбөрт хамрагдах.
Хамгаалалтын заалтууд:
1. ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй гол дэд зүйлийн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоварт хамаарах нь эдгээр омгийн микробиологи, биохими, генетикийн шинж чанарын иж бүрэн шинжилгээгээр нотлогддог.
2. Y. pestis омгийг дэд зүйл болон биовард хуваахад ашигладаг өөр өөр илрэл, биохимийн шинж чанаруудын үндэс нь эдгээр шинж чанарыг кодлодог генийн өөр өөр төрлийн мутаци юм. Дундад зууны үеийн биоварын үндсэн дэд зүйлийн омог дахь нитратыг бууруулах чадваргүй байгаа нь периплазмын нитрат редуктазын параА генд утгагүй мутаци (G T) байгаатай холбоотой бөгөөд Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омогтой холбоотой юм. периплазмын тээвэрлэгч уураг SsuA-ийн ssuA генд нэг нуклеотид оруулах. Алтайн болон Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад арабиноз исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь agaC генийн дараалалд гуанин нуклеотид орсонтой холбоотой юм.
3. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн омгуудын биохимийн идэвхжил нь хэд хэдэн ялгавартай шинж чанарын дагуу ялгаатай байгаа нь тэдгээрийг үндсэн дэд зүйлд кодлох генийн бууралт, бага дэд зүйлд бүрэн бүтэн байдгаас үүдэлтэй. Үндсэн дэд зүйлийн омгуудын мелибиозын исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь melB галактозид нэвчдэсийн генд IS2S5-ийг нэвтрүүлсэнтэй холбоотой бөгөөд энэ дэд зүйлийн омог дахь изоцитрат лиазын үүсгэгч нийлэгжилт нь хоёр нуклеотид (CC) орсны улмаас үүсдэг. iclR зохицуулалтын генийн дараалал. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн melB ба iclR генийг агуулдаг.
4. Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн хоол тэжээлийн олон хэрэгцээний шалтгаан нь амин хүчил, витамины биосинтезийн хэд хэдэн генийг идэвхгүй болгосон явдал юм. Энэ дэд зүйлийн омгийн аргининаас хамаарал нь argA генд 100, фенилаланины хувьд 10 bp оруулснаар үүсдэг. aroG генд, тирозины хувьд - IS100-ийг aroF генд оруулах замаар, тиаминыг (B]) 13 bp устгах замаар. - гуяны генд нэг нуклеотид оруулах. Кавказын болон бусад дэд зүйлүүдийн омог, түүнчлэн тахал үүсгэгчийн биоварын тодорхойлсон мутацийн бүх цогцолбор дээр үндэслэн Y. pestis-ийн төрөл зүйлийн доторх ангилал, генетикийн схемийг бий болгоход ашиглаж болох онцлог генотипүүдийг тодорхойлсон.
Ажлын баталгаажуулалт. Диссертацийн материалыг ТУХН-ийн гишүүн орнуудын улс хоорондын шинжлэх ухаан, практикийн IX бага хуралд “Тусгаар улсуудын хамтын нөхөрлөлийн гишүүн орнуудын нутаг дэвсгэрт халдварт өвчинтэй тэмцэх дэлхийн стратегийг хэрэгжүүлэхэд орчин үеийн технологи”, Волгоград хотод танилцуулж, хэлэлцүүлэв. , 2008; Олон улсын VI бага хурал " Молекулын оношлогоо ба биоаюулгүй байдал", М., 2009; Хэрэглэгчийн эрхийг хамгаалах, хүний сайн сайхны төлөөх хяналтын холбооны албаны залуу эрдэмтэн, мэргэжилтнүүдийн эрдэм шинжилгээ, практик сургуулийн бага хурал " Биологийн аюулгүй байдлыг хангах орчин үеийн технологи", 2010 оны 5-р сарын 25 - 27; RosNIPCI "Microbe"-ийн жилийн эцсийн чуулганд, Саратов 2008 - 2010 он.
Хэвлэлүүд. Диссертацийн сэдвээр 7 хэвлэмэл бүтээл хэвлэгдсэний 4 нь "ОХУ-ын Боловсрол, шинжлэх ухааны яамны Дээд аттестатчиллын комиссоос санал болгосон шинжлэх ухааны тэргүүлэх сэтгүүлүүдийн жагсаалт" -аас тогтмол хэвлэлд нийтлэгдсэн. Шинэ бүтээлийн хоёр патент олгогдлоо " Тарваган тахал үүсгэгч омгийг дараалал тогтоох аргыг ашиглан дэд зүйлээр ялгах арга"(No 2009116913. 2009 оны 05 сарын 14-ний өдрийн давуу эрх. Патент олгох тухай эерэг шийдвэр гарсан) болон "Method for subspecies differentiation of Yersinia pestis in the method using multilocus sequence typing" (No 200914609) 2009 оны 12-р сарын 11-ний өдөр).
Диссертацийн бүтэц, хамрах хүрээ. Диссертацийг 156 хуудас бичгийн машинаар бичсэн бөгөөд танилцуулга, уран зохиолын тойм бүлэг, өөрийн судалгааны таван бүлэг, дүгнэлт, дүгнэлтээс бүрдэнэ. Бүтээлийг 11 хүснэгт, 34 зургийн хамт дүрсэлсэн болно. Ном зүйн индекс нь дотоод, гадаадын 203 эх сурвалжийг агуулна.
Диссертацийн дүгнэлт "Микробиологи" сэдвээр, Одиноков, Георгий Николаевич
1. Байгалийн төрөл бүрийн тарваган тахлын голомтоос гаралтай байгалийн Y pestis омгийн биохими, генетикийн шинж чанарын иж бүрэн шинжилгээнд үндэслэн ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн омгууд эртний болон дундад зууны үеийн биоварт хамаарах нь тогтоогдсон.
2. Дифференциал биохимийн шинж чанар илэрхийлэгдэхгүй байгаа шалтгаан - ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тахлын байгалийн голомтод тусгаарлагдсан үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омгийн нитратын бууралт нь мутаци - нэг нуклеотидыг солих явдал юм. периплазмын нитрат редуктазын параА генд, Алтай, Гиссар дэд зүйлүүдэд - перплазмын тээвэрлэгч уургийн ssuA генд нэг нуклеотид оруулах.
3. Тарваган тахлын нянгийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн омог дахь мелибиозын исгэх шинж чанар, изоцитрат лиазын нийлэгжилт өөр өөр илэрхийлэгдэх генетикийн үндсийг анх удаа тогтоов. Үндсэн дэд зүйлийн омог дисахаридын мелибиозыг исгэх чадваргүй байгаа нь галактозид нэвчилтийг кодлодог melB бүтцийн генийн дараалалд IS2&5 орсонтой холбоотой болохыг харуулсан. Тарваган тахлын нянгийн үндсэн дэд зүйл болох изоцитрат лиазын үүсгэгч нийлэгжилт нь iclR дарангуйлагч генийн 269-270-р байрлалд хоёр нуклеотид (+CC) орсноор үүсдэг нь тогтоогдсон.
4. Алтай, Гиссар дэд зүйлийн пестис омгийн арабино-сөрөг байдлын шалтгаан нь энэ генийн 773-р байрлалд ганц гуанин нуклеотид орсны улмаас арабиноз опероны - agaC-ийн зохицуулах генийн мутаци юм. .
5. Кавказын дэд зүйлийн U. pestis омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг анх удаа тогтоов. Аргинины ауксотроф нь argA генд IS 100, фенилаланины хувьд 10 r.n оруулснаас үүдэлтэй болохыг тогтоожээ. aroG-д, тирозины хувьд - aro F-д IS 100 оруулах замаар, витамин Bi-д - гуяндаа 13 bp-ийг устгаж, thiH-д тимин оруулах замаар.
6. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн (эртний, дундад зууны, дорнын биоварууд) болон бага дэд зүйлүүдийн онцлог генотипийг тодорхойлсон бөгөөд тэдгээрийн хэрэглээ нь Y. pestis-ийг төрөл зүйл дотроо ялгах боломжийг олгодог. Y. pestis омгийн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход олж авсан үр дүнг ашиглах хэтийн төлөвийг харуулав.
ДҮГНЭЛТ
Тахал үүсгэгчийг 1894 онд нээсний дараа зуу гаруй жилийн турш судлах явцад А.Йерсен, С.Китазато нар микробиологи, биохимийн болон бусад шинж тэмдгүүдийн янз бүрийн илрэл дээр үндэслэсэн Y. pestis-ийн төрөл бүрийн ангиллын схемийг олон удаа санал болгосон. фенотип шинж чанар. Санал болгож буй ангилал нь судлаачдын мэдлэгийн түвшин, арга зүйн хандлагад нийцэж байсан нь гарцаагүй. Тиймээс 1928 онд А.А. Безсонова, бүх Y. pestis омгуудыг глицериныг исгэх чадвараар нь глицерин-сөрөг, глицерин-эерэг гэсэн хоёр бүлэгт хуваасан. 1938 онд A.L. Берлин болон А.К. Борзенков тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгуудыг далайн болон эх газрын арьстан гэж хуваасан. Р.Девигнат 1951 онд биохимийн хэд хэдэн шинж чанар (денитрификация ба глицерол исгэх янз бүрийн чадварууд) болон ландшафт-газарзүйн гарал үүслийн онцлогт тулгуурлан Y. pestis омгийг 3 бүлэгт хуваахыг санал болгосон бөгөөд эдгээр нь одоогоор биовар гэж тооцогддог. тахлын микроб: эртний, дундад зууны болон дорнын. 1985 онд Тарваган тахлын бичил биетний ангилал зүйн асуудлаарх Бүх холбооны хурлаар фенотип шинж чанар, лабораторийн амьтдын хоруу чанар, тархалтын талбайд үндэслэн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн дэд зүйл ангиллын нэгдсэн системчилсэн схемийг баталсан. ТУХН-ийн орнууд болон Монголд тархаж буй тахлын нянгийн омгуудыг үндсэн, кавказ, алтай, гиссар, улегей гэсэн таван дэд зүйлд хуваадаг (Тимофеева 1972; Кутырев, Проценко, 1985).
Санал болгож буй бүх схемүүд нь мэдээжийн хэрэг судлаачдад ашигтай байсан бөгөөд Y. pestis-ийг системчлэхэд хувь нэмэр оруулсан бөгөөд тэдгээрийн олонх нь (дэд зүйл, биовард хуваагдах) өнөөдөр өргөн хэрэглэгддэг. Гэсэн хэдий ч молекул биологийн орчин үеийн технологийн хурдацтай хөгжил, эмгэг төрүүлэгч Йерсиниагийн бүрэн геномын дараалал нь тарваган тахал үүсгэгчийн харьцуулсан геномик дээр үндэслэн орчин үеийн молекул генетикийн түвшинд тахлын эмгэг төрүүлэгчийн дотоод ангилалыг сайжруулах асуудлыг шийдвэрлэх боломжтой болгож байна. омог. Энэ эмгэг төрүүлэгчийн одоо байгаа дифференциал ангиллын схемийг генетикийн түвшинд хөрвүүлэх нь тэдгээрийн нягтрал, үр ашиг, найдвартай байдлыг нэмэгдүүлэхийн зэрэгцээ Y. pestis зүйлийн системчлэлийн чанарыг сайжруулах болно.
Төрөл бүрийн дэд зүйлүүдийн тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийн янз бүрийн биохимийн үйл ажиллагааны генетик үндэс нь бараг судлагдаагүй хэвээр байна. Y. pestis-ийн төрөл зүйлийн дотор хуваагдахад ашигладаг генүүдэд зөвхөн хувь хүний генетикийн согогийг илрүүлсэн. Ийнхүү дундад зууны үеийн биоварын үндсэн дэд зүйлүүдийн омгуудад нитратыг бууруулах чадваргүй байгаа нь периплазмын нитрат редуктазын хос L бүтцийн генийн мутацитай холбоотой болохыг харуулж байна. Энэ шинж чанарын илрэл ба глицерин-3-фосфатын дегидрогеназын ген glpD-ийн устгалаас үүдэлтэй зүүн биоварын омгууд (глицерин-сөрөг омгууд эсвэл далайн арьстан) глицеролыг исгэх чадваргүй байдаг. Гол дэд зүйлийн бүх судлагдсан омгийн рамноз-сөрөг байдлын шалтгаан нь рамноз опероны rhaS зохицуулалтын генд нэг нуклеотидын ижил бус орлуулалт байгаатай холбоотой болохыг нотлох баримтууд олж авсан [Куклева нар, 2008; 2009]. Биохимийн чухал шинж чанарыг тодорхойлдог бусад генүүдийн тухайд нэлээд зөрчилдөөнтэй мэдээлэл эсвэл мэдээлэл алга байна. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод оршдог үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн Y. pestis омог биохимийн ялгаатай шинж чанартай генийн хувьд бараг судлагдаагүй байна. Y. pestis-ийн хувьслын янз бүрийн үе шатанд байгаа янз бүрийн дэд зүйлийн омгийн генетикийн зохион байгуулалтыг судлах нь маш чухал ажил бөгөөд энэ нь өндөр хоруу чанар үүсэхэд хүргэсэн эмгэг төрүүлэгч геномын хувьслын өөрчлөлтийг тодорхойлох боломжийг олгоно. бактери Y. pestis.
Тарваган тахал үүсгэгчийн омгийг дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг янз бүрээр илэрхийлэх генетикийн үндсийг тогтоохын тулд бид уламжлалт микробиологийн болон биохимийн аргууд болон молекул биологийн орчин үеийн аргууд - полимеразын гинжин урвал, дараалал, биоинформатикийн аргуудыг ашигласан. . Интернетийн нөөцийг ашигласан - NGBI GenBank, KEGG Metabolic Pathways, PF AM, Modeller болон компьютерийн программуудыг ашигласан: Mega 4.0 ба PHYLIP зайны матрицын аргуудтай.
Тарваган тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийг дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндсийг тогтоохын тулд ерөнхий шинжилгээний алгоритмыг ашигласан. Эхний шатанд Y. pestis-ийн байгалийн омог дахь судлагдсан микробиологийн буюу биохимийн шинж чанарын илэрхийлэлийг судалсан. Төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос олон тооны (зуу орчим) Y. pestis омог дээр дифференциал ач холбогдолтой шинж чанаруудын илэрхийлэл (нитратын бууралт, арабиноз исгэх, мелибиоз, изоцитрат лиаза үүсэх) судлагдсан.
Үүний зэрэгцээ Y. pestis KIM (дунд зууны үеийн биовар), C092 (зүүн биовар), Antiqua, Ангол, Ne-pa1516 (эртний биовар), 91001 (microtus biovar), Pestoides F (Кавказын дэд зүйл) болон Y. pseudotuberculosis омгийн компьютерийн шинжилгээг ашиглан. PB1 /+, IP32953, IP31758, YPIII, геномыг нь NCBI GenBank мэдээллийн санд харуулсан бүрэн нуклеотидууд нь бид KEGG бодисын солилцооны зам болон PF AM мэдээллийн сангийн дагуу бүтээгдэхүүн нь илэрхийлэлд оролцдог генийн хувьсах бүс нутгийг тодорхойлсон. энэ шинж чанараас. Праймеруудыг генийн хувьсах бүс нутгуудад зориулж бүтээсэн бөгөөд энэ нь уг шинж чанарын фенотипийн илрэл байхгүй байх шалтгаан болсон байж магадгүй бөгөөд тэдгээрийн тусламжтайгаар тахал үүсгэгчийн янз бүрийн байгалийн омог дахь ПГУ-д хувьсах генийн хэсгүүдийг олшруулсан. Судлагдсан шинж чанарын илэрхийлэлд ялгаатай омгийн генийн нуклеотидын дарааллыг харьцуулж үзсэний үндсэн дээр энэ шинж чанар байхгүй болоход хүргэсэн мутаци тогтоогдсон.
Энэхүү алгоритмыг ашиглан бид Y. pestis омгийг биовар болгон хуваахад оршдог генийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг судалсан - нитратын бууралт ба арабинозын исгэх генийн харьцуулсан компьютерийн шинжилгээ хос оперон, түүнчлэн pagP болон ssuA генүүд - нитратыг бууруулахад оролцдог зохицуулалтын (NarP) болон тээвэрлэлтийн (SsuA) уургууд, NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан омгууд, түүнчлэн олон тооны (ойролцоогоор) хийгдсэн. зуун) Оросын Холбооны Улс, ойрын болон алс хилийн чанадад янз бүрийн байгалийн тахлын голомтод тусгаарлагдсан Y. pestis-ийн байгалийн омог болон бага зэргийн дэд зүйл.
Үндсэн дэд зүйлийн зарим омгийн денитратжуулах чадваргүй байгаагийн шалтгаан нь периплазмын нитрат редуктаз хэмээх уураг кодлодог хос А генийн 613-р байрлалд G-Т-д нэг нуклеотидын орлуулалт байгаа нь тогтоогдсон. Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгуудын нитратыг бууруулах боломжгүй байгаа шалтгаан нь өөр бөгөөд тээвэрлэлтийн уургийн ген - ssuA-д мутаци байгаатай холбоотой бөгөөд эдгээр омгууд нь 302-р байрлалд нэг нуклеотидын оруулга (+T) агуулдаг. ). Олж авсан мэдээлэл нь омгийн биохимийн шинж чанаруудын хамт (нитратыг багасгах, арабиноз, глицериныг исгэх чадвар) нь эртний болон дундад зууны үеийн биоварын омог ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлддэг, харин зүүн бүсийн омгууд байдаг гэж дүгнэх боломжийг бидэнд олгосон. биовар нь зөвхөн гадаад орны омгуудаас л илэрдэг.
Microtus biovar омгийн нитрат бууруулах идэвхгүй байдлын шалтгаан нь Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгийнхтой ижил мутаци буюу ssu генд нэг нуклеотид орсонтой холбоотой бололтой. Хос A генийн мутаци - 1021-р байрлалд нэг хос А генийг оруулах нь микротусын омог дахь шинж чанарыг илэрхийлэхгүй байх шалтгаан болохгүй гэдгийг бид тогтоосон [D. Zhou et al., 2004]. Учир нь бид үүнийг Кавказын дэд зүйлүүдийн омог, түүнчлэн нитратыг бууруулдаг псевдо-сүрьеэгийн 7-р омог дээр тодорхойлсон. "
Тарваган тахал үүсгэгч олон тооны байгалийн омог, тахал өвчнийг зохицуулахад оролцдог agaC генийн нуклеотидын бүрэн дараалалд арабиноз опероны генийн бүтэц, функциональ шинжилгээг анх удаа хийжээ. арабинозын исгэх илэрхийлэлийг тодорхойлсон. Алтай, Гиссарын дэд зүйлүүдэд энэ шинж тэмдэг байхгүй байгаагийн шалтгаан нь генийн эхэн үеэс эхлэн 773-р байрлалд agaC генд нэг нуклеотидын оруулгатай байгаа нь тогтоогдсон. Үндсэн, Кавказ, Улегай дэд зүйлийн омгууд ийм мутаци агуулаагүй бөгөөд энэ нь арабинозыг исгэх чадвартай холбоотой байдаг.
Y. pestis омгийг үндсэн болон жижиг дэд зүйлд хуваахад ашигладаг мелибиозын исгэх, изоцитрат лиазын нийлэгжилтийг кодлодог генийн бүтцийг судлах ажлыг хийсэн. Өмнө нь үндсэн болон үндсэн бус дэд зүйлийн омог дахь эдгээр шинж чанаруудын янз бүрийн илрэлийн генетикийн тодорхойлолтыг судлаагүй байна. Уран зохиолд энэ асуудлын талаархи мэдээлэл байхгүй байна.
NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан Y. pestis ба 7. псевдосүрьеэгийн омгийн мелибиоз исгэх генүүдийн (melA, melB ба melR) нуклеотидын дарааллын компьютерийн харьцуулсан шинжилгээ нь синтезийг тодорхойлдог melB ген (1232 bp) байгааг харуулсан. галактозид нэвчилт, IS2&5 оруулах дарааллыг оруулах (1322 bp) 73 bp. тарваган тахал үүсгэгч4 омгийн C092, KIM, Antiqua, Непал516. Анголын 7 пестис, 91001, Pestoides F-ийн бусад омог, 7 псевдо-сүрьеэгийн бүх омогт melB генийн бүтэц бүрэн бүтэн илэрсэн. IS2SJ оруулах бүсийг тойрсон тооцоолсон праймеруудыг ашиглан ПГУ-ын шинжилгээ хийхдээ тахлын эмгэг төрүүлэгчийн олон тооны байгалийн омогоос melB генийн тодорхой хэсгүүдийг гаргаж авсан. Судалгаанд хамрагдсан үндсэн бус дэд зүйл болох Кавказ, Алтай, Гиссар, Өлэгэй зэрэг 7 төрлийн пестисийн омгийн ПГУ-д melB генийн бүрэн бүтэн бүтцэд тохирсон 325 bp хэмжээтэй олшруулалт гарсан. Үүний эсрэгээр, үндсэн дэд зүйлүүдийн омгийн хэлтэрхийнүүд нь 1648 bp-ээс том хэмжээтэй байсан нь энэ генд оруулах дарааллыг нэвтрүүлж, мелибиозын эсрэг ферментийн идэвхгүй байдалтай холбоотой болохыг харуулж байна. Тиймээс бид анх удаа генетикийн шалтгааныг тогтоосон; дифференциал шинж чанарын өөр илэрхийлэл - үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн тахал үүсгэгчийн омог дахь мелибиозыг исгэх нь үндсэн дэд зүйлийн омгийн melB генийн бүтцийг зөрчсөнтэй холбоотой юм. IS2 & 5.
Үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омгийг үндсэн бус омог ба псевдотүрьеэгийн үүсгэгч бодисоос ялгахын тулд тэдгээрийн изоцитрат лиаза ферментийг бүрдүүлэгч нийлэгжүүлэх чадварыг ашигладаг. NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан G. pestis ба Y. pseudotuberculosis омгийн ацетат опероны (aceA, aceB, aceK, iclR) генийн нуклеотидын дарааллын компьютерийн харьцуулсан шинжилгээ нь iclR-д хоёр нуклеотидын оруулга байгааг харуулсан ( генийн хэмжээ 843 bp) (+CC) генийн эхнээс 269-270 байрлалд Y. pestis омгийн C092, KIM, Antiqua, Nepal516. Үүний эсрэгээр Ангол, 91001, Pestoides F тахлын нянгийн бусад омгууд болон псевдосүрьеэгийн бүх омгууд нь iclR генийн бүтэцтэй байдаг. Y. pestis-ийн байгалийн омог дээр бидний хийсэн iclR генийн хувьсах бүсийн дараалал нь Y. pestis-ийн үндсэн дэд зүйлийн омгуудад ижил мутаци илэрсэн - хоёр нуклеотид (+CC) оруулах. 269 - 270 байрлалд, энэ генийн бүтэц бүрэн бүтэн байдаг бага дэд зүйлээс ялгаатай. Тодорхойлсон мутаци нь индукторын молекулыг холбодог домэйны С төгсгөлийн төгсгөл (148 - 271 аа) алдагдахтай холбоотой IclR ацетат опероны дарангуйлагч уургийн бүтцийг (болон үйл ажиллагаа) генийг идэвхгүй болгож, тасалдуулахад хүргэдэг. . Энэ нь ацетат опероны генийг бүрдүүлэгч илэрхийлэлд хүргэдэг бөгөөд Y. pestis-ийн үндсэн дэд зүйлийн омог дахь изоцитрат лиаза ферментийн өндөр идэвхжилтэй холбоотой байдаг.
Өмнө нь тахлын бичил биетний хамгийн эртний омог нь Кавказын дэд зүйлийн омог гэж санал болгож байсан [Бобров, Филлипов, 1997; Куклева нар, 2002]. Тэдний судалгаа нь геномын хувьслын өөрчлөлтийн үе шатуудыг тодорхойлох боломжийг олгодог тул сапрофит энтеропатоген нян - псевдотүрьеэгийн микробыг эмгэг төрөгч дамжуулах үндсэн механизмтай, өндөр хоруу чанартай системийн эмгэг төрүүлэгч болгон хувиргахад хүргэдэг тул ихээхэн анхаарал татаж байна. . Бидний үр дүнгээс үзэхэд Кавказын дэд зүйл нь дифференциал биохимийн шинж чанарын хувьд хамгийн идэвхтэй бөгөөд псевдосүрьеэгийн үүсгэгчтэй адил бүрэн бүтэн ген (paraA, ssuA, glpD, araC, melB, iclR) агуулдаг. Энэ нь Кавказын дэд зүйл нь Y. pestis-ийн бусад дэд зүйлүүдтэй харьцуулахад өмнөх Y. pseudotuberculosis-тэй илүү ойр байгааг баталж байна.
Мөн бид Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг судлах зорилгоор микробиологийн судалгаа хийсэн, учир нь энэ асуудлын талаар уран зохиолд зөрчилтэй мэдээлэл байсан. Кавказын дэд зүйлүүдийн судлагдсан бүх омгууд жигд ажилладаг болохыг тогтоожээ. Тэд фенилаланин ба тирозин гэсэн хоёр анхилуун үнэрт амин хүчлийн хэрэгцээ, түүнчлэн амин хүчил аргинин ба витамин Би (тиамин) шаардлагатай байгааг тогтоожээ. Аргинин, фенилаланин, тирозин, В1 витаминд тавигдах шаардлагаас гадна Зүүн Кавказын өндөр уулын тахлын голомтоос гаралтай омгууд мөн лейцинээс хамааралтай байсан бол Ленинакан, Присеван, Зангезур-Карабах, Кавказын дэд зүйлийн омгууд мөн лейцинээс хамааралтай байсан. Араксинд ийм хамааралтай байгалийн голомт байхгүй байв.
KEGG ба PFAM мэдээллийн санг ашиглан Кавказын дэд зүйлүүдийн омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг тогтоох, бодисын солилцооны замд дүн шинжилгээ хийх, үнэрт амин хүчлүүд болох фенилаланин, тирозин, аргинин, амин хүчлийн биосинтезд оролцдог ферментийн системийг тодорхойлох. витамин Bt (тиамин) хийсэн. Кавказын дэд зүйлүүдийн омгийн аргинин (argA), фенилаланин (aroG), тирозин (aroF), витамин Bl (thiH, thiG)-ийн биосинтезийн генүүдэд мэдэгдэхүйц мутаци илэрсэн. a^A бүтцийн генд дөнгөж 196 bp-ийн \S100 оруулах дарааллын оруулга илэрсэн нь Кавказын дэд зүйлүүдийн аргининыг ауксотрофийн шалтгаан болсон юм. Өмнөх генд
Тиймээс бид анх удаа Кавказын дэд зүйлийн омгийн ауксотрофийн генетикийн үндэс суурийг тавьсан. Кавказын дэд зүйлүүдийн омгийн генетикийн шинж чанарыг дифференциал биохимийн шинж чанарын генүүд ((ggarA, vvi, glpD, agaC, me1B, igSh) болон өсөлтийн хүчин зүйлийн биосинтезийн генийн хувьд (agA, agoC, agor, ¿/g) олж авсан. /C ба ShN) нь U. re, M"ya-ийн бусад дэд зүйлээс үл хамааран энэ дэд зүйлийн хамгийн эртний, түүнчлэн түүний хувьслын урт хугацааг харуулж байна.
Тарваган тахлын янз бүрийн голомтоос гаралтай U. Resib-ийн байгалийн омгийн молекул генетикийн нарийвчилсан шинжилгээнд үндэслэн Орос, ойрын болон алс холын хилийн чанадад эргэлдэж буй бусад дэд зүйлийн омгийн генетикийн шинж чанарыг мөн тодорхойлсон. ParaA, agaC, glpD, mA, SHR генүүдэд тодорхойлогдсон генетик мутацийг ашигласнаар U. pebis омог үндсэн эсвэл бага дэд зүйлд, үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь бусад төрөлд хамаарах эсэхийг өндөр үр ашигтай, найдвартай тодорхойлох боломжтой болж байна. эртний, дундад зууны эсвэл дорно дахины гурван биоварын нэг. Эдгээр ангилал зүйн нэгж бүрийн онцлог генотипүүд болох Y. pestis төрөл зүйлийг тодорхойлсон.
Энэ ажлын явцад тогтоогдсон A, ssu, araC, melB, iclR, argA, aroH, aog F, thiH, thiG хосуудын генүүдийн хувьсах чадварыг glpD генийн өмнө нь тодорхойлсон хэлбэлзэлтэй хамт сэргээн босгоход ашигласан. Кавказын омгууд, түүнчлэн Y. pestis-ийн бусад бага зэргийн дэд зүйлүүдийн эртний байдлыг баталгаажуулсан тахлын үндсэн ба жижиг эмгэг төрүүлэгч омгийн дэд зүйлийн хувьслын филогенетик схем (Зураг 34).
Энэхүү диаграммаас харахад тахлын үүсгэгч бодис нь псевдосүрьеэгийн микробоос гаралтай бөгөөд энэ энтеропатоген Yersinia-ийн хувьслын нэг салбар юм. Y. pestis-ийн хамгийн эртний дэд зүйл нь тахлын микробын бусад дэд зүйлтэй харьцуулахад Y. pseudotuberculosis-д филогенетикийн хувьд илүү ойр байдаг. Y pestis-ийн хувьслын өөр нэг эртний салбар бол Улега, Алтай, Гиссарын дэд зүйлүүдээр төлөөлдөг бөгөөд тэдгээр нь генетикийн хувьд бие биетэйгээ ойрхон бөгөөд хувьслын ерөнхий голоос нэг бүлэгт хуваагдсан бололтой, хожим нь тусдаа дэд зүйл болон хуваагдсан. . Тэдгээрийн дотроос хамгийн эртний нь Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгуудтай харьцуулахад амьдралыг тэтгэгч генийн мутаци бага (ялангуяа agaC генд мутаци байхгүй) агуулагддаг Улега дэд зүйл юм. Сүүлийнх нь филогенетикийн хувьд бие биетэйгээ ойр, мөн микротусын бүлгийн омгууд нь Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омогтой адил дифференциал биохимийн шинж чанарын генийн мутаци агуулсан байдаг. Микротус омог нь Алтай-Гиссарын дэд зүйлийн бүлэгт багтдаг гэж бид анх санал болгосон.
С092 (дорно дахины)
KIM 776 (meclievalis) (meclievalis)
NepalSlö (antiqua) subsp. ulegeica subsp. hismrica
91001 (microtus) subsp. алтай.
231, 680 subsp. кавказ
Y. pseu dotu bereu losis
Зураг 34. U. rheaT^ya-ийн төрөл зүйлийн дотоод хувьслын схем
Энэхүү ажилд хийгдсэн судалгаанууд нь тахал үүсгэгчийн молекулын ангилал зүйг боловсруулах үндэс суурь болж байгаа бөгөөд түүний зорилго нь микробиологи, биохимийн ялгавартай ач холбогдолтой генийн хувьсах чанарт үндэслэн Y. pestis-ийн төрөл зүйл доторх иж бүрэн ангилал зүйг бий болгох явдал юм. тахлын бичил биетний шинж чанар.
Диссертацийн судалгааны эх сурвалжийн жагсаалт Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигч Одиноков, Георгий Николаевич, 2010 он
1. Акиев А.К. Тахал микробын физиологийн хувьсах байдлын тухай // Онцгой аюултай халдварын асуудал. - 1969. Дугаар. 6 (10). - P. 22 - 25.
2. Анисимов А.П. Байгалийн голомтын экосистемд тахал үүсгэгчийн эргэлт, хадгалалтыг баталгаажуулдаг Yersinia pestis-ийн хүчин зүйлүүд. Зурвас 1 // Молекулууд, генетик. 2002. - No 3. - P. 3 - 23.
3. Анисимов А.П. Байгалийн голомтын экосистемд тахал үүсгэгчийн эргэлт, хадгалалтыг баталгаажуулдаг Yersinia pestis-ийн хүчин зүйлүүд. Зурвас 2 // Молекулууд, генетик. 2002. - No 4. - P. 3 - 11.
4. Апарин Т.П., Голубинский Е.П. Тахал өвчний микробиологи: гарын авлага. - Эрхүү / Эрхүүгийн хэвлэлийн газар. Их сургууль, 1989. - 90 х.
5. Базанова Л.П., Иннокентьева Т.И. Сибирийн байгалийн голомт дахь эмгэг төрүүлэгчийн эргэлтэд тахлын гол ба хоёрдогч тээгч бөөс нь үүргийн талаар // Мед. догол мөр. болон саажилт өвчин. 2008. - No 3. - P. 54 - 60.
6. Балахонов С.Б., Ценжаев С.Н., Эрдэмабат А.Б. Монголоос тусгаарлагдсан тахал үүсгэгч омгийн шинэ плазмидоварууд // Молекул, генетик, микробиол. болон вирусол. - 1991. - No 11. 27 - 29.
9. Бибикова В.А., Классовский В.Н., бүүрэгээр тахлын халдвар дамжих. - М.: - Анагаах ухаан, 1974. 188 х.
10. Бобров А.Г., Филлипов А.А. Yersinia pestis болон Yersinia pseudotuberculosis II Моль-ийн геномд IS285 ба IS 100-ийн тархалт. генетик, микробиол. болон вирусол. 1997. - No 2. - P. 36 - 40.f
11. Ващенок Б.Э. Бөөс нь хүн, амьтны өвчин үүсгэгчийг дамжуулдаг. - Л.: Наука, 1988. - 160 х.
12. Величко Л.Н., Кондрашкина К.И., Ермилов А.П. болон бусад. Бүүргийн ялгадас нь тахлын микробыг удаан хугацаагаар хадгалах байгалийн орчин юм // Ялангуяа аюултай халдварын асуудал. - 1978. - Дугаар. (64). - P. 51 - 53.
13. Волков Ю.П., Ерошенко Г.А. Бичил биетний хувьслын харилцааг үнэлэхэд ашигладаг филогенетик модыг бий болгох зарим аргын үр нөлөөний дүн шинжилгээ // Онцгой аюултай халдварын асуудал. 2009. - Дугаар. 1 (99). - P. 35 - 41.
14. Gusfield J. Алгоритм дахь мөр, мод ба дараалал: Компьютерийн шинжлэх ухаан ба тооцооллын биологи. - Санкт-Петербург: Невскийн аялгуу, BHV-Петербург, 2003. 654 х.
15. Голдфарб Л.М., Домарадская Т.И., Жапаридзе М.Н. Тахал ба псевдосүрьеэгийн эмгэг төрүүлэгчдийг ялгах изоцитат-харх-лиаза тестийн үнэлгээний талаар // Тахал, холерын эмгэг төрүүлэгчдийн лабораторийн оношлогоо, биохимийн өнөөгийн асуудлууд. - 1984. S. 23 - 27.
16. Голдфарб Л.М., Домарадская Т.И., Жапаридзе М.Н. Йерсиниа тахал өвчнийг ялгах изоцитрат-лиазын идэвхжилийн сорил // Зоонозын халдвараас урьдчилан сэргийлэх орчин үеийн асуудлууд. - 1984. - 2-р хэсэг.-S. 21-22.
17. Домарадский I.V. Тахал. М .: Анагаах ухаан, 1998. - 173 х.
18. Ilyina T.S., Romanova Yu.M., Ginzburg A.JI. Биофильм нь хүрээлэн буй орчин ба эзэн организм дахь бактерийн оршин тогтнох арга зам болох: үзэгдэл, генетикийн хяналт, тэдгээрийн хөгжлийг зохицуулах систем // Генетик. - 2004. -Т. 40, No 11. - P. 1 12.
19. Класовский Л.Н., Мартиневский И.Л., Степанов В.М. Транскавказын өндөрлөгөөс үлийн цагаан оготно, тэдгээрийн бөөснөөс тусгаарлагдсан тахлын бактерийн омгийн өсөлтийн хүчин зүйлсийн талаар // Онцгой аюултай халдварын асуудал. 1972. - Дугаар. 1. - хуудас 186 - 188.
20. Козлов М.П. Тахал. М.: Анагаах ухаан, 1979. - 192 х.
21. Кокушкин А.М. Зэрлэг мэрэгчдийн хоол тэжээлийн халдварын зарим шинж чанар, тахлын илрэл // Пробл. ялангуяа аюултай халдварууд. - 1994.-No5.-С. 23-31.
22. Кокушкин А.М. Тарваган тахлын эпидемиологийн нийгэм, биологийн талууд: Зохиогчийн хураангуй. dis. док. зөгийн бал. Шинжлэх ухаан. 1995. - 46 х.
23. Куклева Л.М. Ерошенко Г.А. Шавина Н.Ю. болон бусад псевдогенийн тархалтын харьцуулсан шинжилгээ. Тахал үүсгэгчийн үндсэн ба бага дэд зүйлийн омгийн геном // Молекул генетик., Микробиол. болон вирусол. 2009. - №2. - P. 32-36.
24. Куклева Л.М., Ерошенко-Г.А., Павлова А.И. ба бусад. Нитратыг бууруулах, глицерин ба арабинозыг исгэх зэрэгт суурилсан янз бүрийн төрлийн тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийн шинж чанарууд // Онцгой аюултай халдварын асуудал. - 2007.-No 94.-P. 50-53.
25. Куклева Л.М., Ерошенко Г.А., Шавина Н.Ю. ба бусад. Тахал үүсгэгчийн үндсэн ба бага дэд зүйлийн омгийн псевдогенийн тархалтын харьцуулсан дүн шинжилгээ // Молекул, генетик, микробиол. болон вирусол. - 2008. -No 2.-С. 32-36.
26. Куклева Ж.М., Кузьмиченко И.А., Проценко О.А. Yersinia pestis-ийн янз бүрийн дэд зүйл ба Yersinia pseudotuberculosis II омгийн омгийн биохимийн шинж чанарын харьцуулсан шинж чанар Онц аюултай халдварын асуудлууд. - 2001.-Дугаар. 1.-С. 105-110.
27. Куклева Ж.М., Проценко О.А., Кутырев В.В. Тахал ба псевдосүрьеэгийн эмгэг төрүүлэгчдийн хоорондын харилцааны талаархи орчин үеийн санаанууд / Молекул, генетик, микробиол. ба вирусол // 2002. №1 - хуудс 3 - 7.
28. Кутырев В.В., Ерошенко Г.А., Попов Н.В. ба бусад сээр нуруугүй амьтадтай тахал үүсгэгчийн харилцан үйлчлэлийн молекул механизмууд // Молекул, генетик., микробиол. болон вирусол. 2009. No 4. - P. 7 - 12.
29. Кутырев В.В., Коннов Н.П., Волков Ю.П. Тарваган тахал үүсгэгчийн хэт бүтэц ба вектор дахь нутагшуулалт / Ed. V.V. Кутырева. - М .: Анагаах ухаан. 2007. 224 х.
30. Кутырев В.В., Попов Ю.А., Проценко О.А. Тахал микробын эмгэг төрүүлэгч плазмидууд // Моль. генетик., микробиол., вирусол. 1986. - No 6. - С.З -11.
31. Кутырев В.В., Проценко О.А. Yersinia pestis II-ийн ангилал ба молекул генетикийн судалгаа Онцгой аюултай халдварын асуудал. 1998. - No 78. - P. 11 - 12.
32. Кутырев В.В., Смирнова Н.И., Тахал, холер, боом өвчний эмгэг төрүүлэгчдийн генийн оношлогоо, молекулын төрөл // Молекул, генетик., микробиол. болон вирусол. - 2003 - No 1. - P. 6 14.
33. Кутырев В.В., Смирнова Н.И. Тахал, холер, боомын онцгой аюултай халдварын эмгэг төрүүлэгчдийн генийн олон янз байдал, хувьсал: одоо ба ирээдүй // Биотехнологи: төлөв байдал, хөгжлийн хэтийн төлөв.-М., 2005.-Ч. 1.-С. 17.
34. Онц аюултай халдварт өвчний лабораторийн оношлогоо. Практик гарын авлага / Г.Г.Онищенко, В.В.Кутырев.-М.: Анагаах ухаан, Шико, 2009. 472 х.
35. Maniatis T., Fritsch E., Sambrook J. Молекулын клонжуулалт. М.: Мир, 1984.-480 х.
36. Мартиневский I.L. Yersinia II Mat овгийн ангилал зүй. 4-р шинжлэх ухаан conf. мөн чанарын дагуу голомт, проф. тахал - Алма-Ата, 1965. P. 142 - 148.
37. Мартиневский I.L. Тахлын биологи, генетикийн шинж чанар, ойр дотны бичил биетүүд. М.: Анагаах ухаан, 1969. - 295 х.
38. Мартиневский И.Л., Степанов В.М., Кенжебаев А.Я. Тахал ба түүнтэй холбоотой микробын эмгэг төрүүлэгчийн ангилал зүй, мутаци, генетик. Нукус. “Каракалпакстан”, 1990. - 151 х.
39. Ерөнхий бактериологийн аргууд, ed. Ф.Герхардт нар М.: Мир, 1984. -264 х.
40. Михайлова П.С. Транскавказын өндөрлөг газарт үлийн цагаан оготно дунд тархаж буй тахлын микробын ангилал зүй // Бага хурлын материал. Микроб хүрээлэнгийн 50 жилийн ой. Саратов, 1968. - P. 67 - 68.
41. Бактерийн түлхүүр Бергей, ed. Ж.Хоулт. Н.Криг, П.Снит, Ж.Стейли, Уильямс нар. - М.: Мир, 1997. 9-р хэвлэл. (2 боть). - 799 х.
42. Онищенко Г.Г., Кутырев В.В., Попов Н.В. болон бусад Кавказ, Каспийн бүс нутаг, Төв Ази, Сибирь дэх тахлын байгалийн голомт. Г.Г.Онищенко, В.В. Кутырева. -М.: Анагаах ухаан, 2004. 192 х.
43. Пейсахис Л.А., Степенов В.М. Газарзүйн бүсчлэлийн зарчмын дагуу тахал үүсгэгчийг төрөл бүрийн ангилалд оруулах // Онцгой аюултай халдварын асуудал. 1975. - Дугаар. 2. - хуудас 5 - 9.
44. Попов Ю.А. Yersinia овгийн төлөөлөгчдөд ДНХ-ийн датчикийг зохион бүтээх, ашиглах // Генетик, микробиол. лабораторийн аргуудыг боловсронгуй болгох. Оношлогоо нь ялангуяа аюултай. inf. Саратов, 1991. - P. 3-13.
45. Попов Ю.А. Плазмидуудын бүтэц, функциональ зохион байгуулалт, энэ загвар дээр генийн инженерчлэлийн бүтээн байгуулалтууд: Докторын ажил. биол. Шинжлэх ухаан. Саратов, 1991. - 248 х.
46. Попов Ю.А., Горшков О.В., Савостина Е.П. нар., Төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос Yersinia pestis омгийн генотипийг тодорхойлох // Молекул, генетик, микробиологи, вирус судлал 2000. - No 3. - P. 12-17.
47. Попов Ю.А., Проценко О.А., Анисимов П.И., Кокушкин А.М., Можаров.
48. T. Агароз гель дэх электроферезийн аргаар тахлын микробын пестициноген плазмидыг илрүүлэх // Ялангуяа аюултай өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх. инф.- Саратов, 1980.-П. 20-25.
49. Попов Н.В., Слудский А.А. Удовиков А.И. ба бусад. Тахал энзоотикийн механизмд Yersinia pestis био хальсны үүрэг // Zhurn. микробиол., эпидемиолог. иммунол. 2008. - No 4. - P. 118 - 120.
50. Попов Ю.А., Фурсов В.В., Tn1 ба Tn9 транспозоноор тэмдэглэсэн пестициногенийн плазмидын деривативын бүтцийн зохион байгуулалт // Мол. биол., генетик. ба иммунол. тахал ба холер Саратов, 1983. - хуудас 34 - 39.
51. Попов Ю.А., Яшечкин Ю.И., Дроздов И.Г. Төрөл бүрийн биоварын тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийн pFra плазмидын ДНХ-ийн бүтцийн молекул генетикийн шинжилгээ // Генетик. 1998. - T. 34. - P. 198 - 205.
52. Проценко О.А., Анисимов П.И., Можаров О.Т. ба бусад. Пестицин1, антиген I фракц ба экзотоксины "хулгана" хорт бодисын нийлэгжилтийг тодорхойлдог тахлын микробын плазмидыг тодорхойлох, тодорхойлох // Генетик. 1983. -Т. 19, № 7.-С. 1081-1090.
53. Ратнер В.А. Молекул генетик: зарчим, механизм. Новосибирск: Наука, 1983. - 256 х.
54. Розанова Г.Н., Сердюкова Т.В., Шехикян М.Т. болон бусад Кавказын хээрийн төрлийн голомтоос тахлын үүсгэгч бодис. Кавказ ба Закавказын тахлын эсрэг хүрээлэн. Ставрополь, 1987. 17 х.
55. Савостина Е.П., Попов Ю.А., Тахал үүсгэгчийн үндсэн дэд зүйлүүдийн омгийн геномын полиморфизм // Молекул, генетик, микробиологи, вирус судлал 2009. - No 4. - P. 23 - 26.
56. Смирнов Г.Б. Бактерийн геномоор генетикийн мэдээллийг олж авах, алдах механизмууд // Орчин үеийн биологийн дэвшил. 2008. - Т. 128. - No 1.-С. 52-76.
57. Смирнов И.В. Иерсиниоз ба түүнтэй холбоотой бичил биетний үүсгэгч бодис // Клин, микробиол. нянгийн эсрэг, химитер. - 2004. - T. 6, No 1. - P. 10 -21.
58. Смирнова Н.И., Кутырев В.В., Холер, тахал, боом өвчний үүсгэгч бодис дахь геномын молекул генетикийн шинж чанар, тэдгээрийн хувьслын өөрчлөлтийн харьцуулсан шинжилгээ // Молекул, генетик., микробиол. болон вирусол. 2006. - No 2. - P. 9 - 19.
59. Стыбаева Г.С., Атшабар Б.Б. Тахал үүсгэгчийн молекул генетикийн онцлог (уран зохиолын тойм) // Казахстан дахь хорио цээрийн ба зоонозын халдвар. 2003. - No 1 (7). - P. 52 - 67.
60. Сулейменов Б.М. Энзоотик тахлын механизм. Алматы, 2004. - 236 х.
61. Султанов Г.В., Козлов М.П. Тахал. Микробиологи, эмгэг жам, оношлогоо. 1-р боть. Махачкала: Акад. хөдөө Шинжлэх ухаан, 1995. 223 х.
62. Тимофеева Л.А. Тахал микробын ангилал зүйн талаар // Онцгой аюултай халдварын асуудал. 1972. - Дугаар. 1(23).- P. 15 - 22.
63. Тимофеева Л.А., Апарин Т.П., Трофименко Н.З. Сибирийн голомтод тусгаарлагдсан тахлын микробын омгийн амин хүчлүүдэд тавигдах шаардлага // Докл. Эрхүү, тахлын эсрэг хүрээлэн. Эрхүү, 1971. - Дугаар. 9. - хуудас 43 - 44.
64. Тимофеева Л.А., Жамьян Сүрэн, Сотникова А.Н. болон бусад 1969 - 1971 онд Монголоос тусгаарлагдсан тахлын нянгийн омгийн биологийн шинж чанар. // Онцгой аюултай халдварын асуудал. 1974. - No 3 (37). - P. 37 - 42.
65. Тимофеева Ж.И. А., Логачев А.И. Yersinia pestis ulegeica нь Монголд тусгаарлагдсан тахлын нянгийн шинэ дэд зүйл юм. Номонд: Монгол Улс, ЗХУ-ын онцгой аюултай халдварын тархвар судлал, урьдчилан сэргийлэх. - УБ.: Б.И., 1975. - С.63 -64.
66. Туманский В.М. Тарваган тахлын голомтот байгалийн нөхцөлд тахлын микробын хувьсах байдал // Ном: Байгаль, голомт, эпидемиологи. ялангуяа аюултай мэдээлэл - Саратов, 1959. S. 189 - 199.
67. Филиппов А.А., Кутырев В.В., Видяева Н.А. ба бусад. Yersinia pestis (Lehmann, Neumann)-ийн кальцийн хамаарлын плазмидыг клонжуулах, гаднах мембраны уургийн нийлэгжилтийг кодлох (BVM2) // Генетик. 1991. - T. 27, No 4.-S. 598-606.
68. Филиппов А.А., Солодовников Н.С., Куклева Л.М. ба бусад. Байгалийн янз бүрийн голомтоос гаралтай тахал үүсгэгч омгийн плазмидын найрлагыг судлах. 1992. - No 3. - P. 10 - 13.
69. Ценева Г.Я., Солодовникова Н.Ю., Воскресенская Е.А. Yersinia хоруу чанарын молекулын талууд // Клин, микробиол. нянгийн эсрэг, химитер. 2002. - T. 4, No 3. - P. 248 - 266.
71. Яшечкин Ю.И., Кириллина О.А., Попов Ю.А. ба бусад. 68 ppm плазмидын физик зураглал Y pestis 231 // Онцгой аюултай халдварын асуудал. -1999. -No 1 S. 26-28.
72. Achtman M., Morelli G., Zhu R. et al. Тахал нянгийн бичил хувьсал ба түүх, Yersinia pestis II Proc. Натл". Акад. Сей. АНУ. 2004. - 101. - С. 17837-17842.
73. Achtman M., Zurth K., Morelli G. et al. Тахал өвчний үүсгэгч Yersinia pestis нь Yersinia pseudotuberculosis II PNAS-ийн саяхан гарч ирсэн клон юм. 1999. - V. 96;N24. -П. 14043-14048.
74. Анисимов А.П.*, Линдлер Л.Э., Пиер Г.Б. Yersinia pestis II Clin-ийн төрөл зүйлийн доторх олон янз байдал. Микробиол. 2004. - V. 17(2). - P. 434 - 464.
75. Анисимов П.И., Попов Иу.А., Кокушкин А.М. Тарваган тахал үүсгэгч ба тахлын энзоотик дахь функциональ фенотипийн хэлбэлзэл // Мед. Паразитол. (Моск). 2001. - N2.-P. 35-40.
76. Bai G., Smith E., Golubov A., Pata J. et al. Yersinia pestis эсрэг Yersinia pseudotuberculosis-ийн дифференциал генийн зохицуулалт: гипоксийн нөлөө ба плазмидын зохицуулагчийн боломжит үүрэг // Adv. Exp. Мед. Биол. 2007. - V. 603. - P. 131 - 144.
77. Baxevanis A.D., Francis-Ouellette B.F./ Bioinformatics. Ген ба уургийн шинжилгээний практик гарын авлага / John-Willey N.Y., 2001. 470 х.
78. Bearden S.W., Sexton C., Pare J. et al. Yersinia pestis-ийн сулруулсан энзоотик (пестоидууд) тусгаарлалтууд нь идэвхтэй аспартазыг илэрхийлдэг // Микробиологи. 2009 - V.155. -П. 198-209.
79. Beale J., Lee S.Y., Iwata S., Beis K. Escherichia coli II Acta Cryst-ийн алифатик сульфонат холбох уургийн SsuA-ийн бүтэц. 2010. - V. 66. - P. 391 -396.
80. Бен-Гурион Р., Гертман Ж., Yersinia enterocolitica-ийн бактериоцинтэй төстэй материаллаг шугаман плазмид профаж ковалент хаалттай төгсгөлтэй // Молл. Микробиол. - 1958-В. 48.-П. 989-1003.
81. Bercovier H. Yersinia pestis-ийн ДНХ-ийн эрлийзжүүлэлтээр төрөл зүйл доторх ба төрөл хоорондын хамаарал ба Yersinia pseudotuberculosis II Curr-тай хамаарал. Микробиол. 1980. - Nu 4. - P. 225 - 229.
82. Bobrov A.G., Kirillina O.A., Forman S. et al. Yersinia pestis био хальсны хөгжлийн талаархи ойлголт: экзополисахаридын үйлдвэрлэлд оролцдог hms дотоод мембраны уургийн топологи ба харилцан үйлчлэл // Environ.microbiol. - 2008. V. 10, N 6.-P. 1419-1432 он.
83. Бобров А.Г., Перри Р.Д. Yersinia pestis lacZ нь ферментийн идэвхжил багатай бета-галактозидазыг илэрхийлдэг // FEMS Microbiol. Летт. 2006. - V. 255, N 1. - P. 43 -51.
84. Брубакер Р.Р. Pasteurella pestis II халдвар дахь пурины мононуклеотидын харилцан хувиргалт. Дархлаа. 1970. - V. 1. - P. 446 - 454.
85. Брубакер Р.Р. Yersinia төрөл: хоруу чанарын биохими ба генетик // Микробиол ба иммунолын өнөөгийн сэдвүүд. 1972. -N 57. - P. 293 - 299.
86. Брубакер Р.Р. Саяхан тахал гарч ирсэн нь: гэмт хэргийн хувьслын үйл явц // Микробын экологи. 2004. - V. 47. - P. 293 - 299.
87. Burrows T.W. Пастерелла хортон шавьжийн хоруу чанар ба тахлын дархлаа // Er-geb Mikrobiol Immunitatsforsch Exp Ther. 1963 - V. 37. - P. 59-113.
88. Buchrieser C., Prentice M., Carniel E. Yersinia pestis-ийн 102 килобаз тогтворгүй бүс нь дотоод зохион байгуулалтанд ордог пигментацийн сегменттэй холбоотой өндөр эмгэг төрүүлэгч аралаас бүрддэг // J. Бактерид. - 1998. - V. 180. - P. 2321-2329.
89. Cao Y., Huang H., Meng K. et al. Yersinia pestis biovar Microtus str. 91001 //Биосчи. Биотехнологи. Биохими. 2008.-V. 72, N 8. - P. 2203 - 2205.
90. Гинж P.S., Carniel E., Larimer F.W. гэх мэт. Yersinia pestis-ийн хувьслын талаарх ойлголтыг Yersinia pseudotuberculosis-тэй бүхэл бүтэн геномоор харьцуулах замаар! I Proc. Натл. Акад. Сэй. АНУ. 2004. - V. 191, N38.-P. 13826-13831.
91. Chain P. S., Hu P., Malfatti S. A. et al. Antiqua болон Nepal516-ийн Yersinia pestis омгийн геномын бүрэн дараалал: шинээр гарч ирж буй эмгэг төрүүлэгчийн генийн бууралтын нотолгоо // J. Бактерид. 2006. - V. 188, N 12. - P. 4453 - 4463.
92. Чуан Пэн / Филогтетик модыг барихад зайнаас суурилсан аргууд, х. 1-11,2007.
93. Cobbs C.G., Chansolme D.H. Тахал. // Клин. Дерматол. 2004. - V. 22(3). -П. 303-312f
94. Корнеллс Г.Р., Боланд А., Бойд А.П. гэх мэт. Антихост геном болох Йерсиниагийн хоруу чанар плазмид // Микробиол. Мол. Биол. Илч. 1998. - V. 62, №4. -П. 1315-1352.
95. Cowan C. et al., Yersinia pestis-ээр хучуур эдийн эсэд халдсан: Y. pestis-ийн өвөрмөц халдлагын нотолгоо // Infect. Дархлаа. 2000. - V. 68(8). - P. 4523 - 4530.
96. Dale C., Wang B. et al. Тахал // Прок. Натл. Акад. Сэй. АНУ. 2002. -Vol.99, No19.-P. 12397-12402.
97. Darby C., Ananth S.L., Tan L., Hinnebusch B.J. Caenorhabditis elegans био хальс ашиглан бөөс бөглөрөхөд шаардлагатай Yersinia pestis генийг gmhA тодорхойлох нь// Infect.Immun.- 2005. V.73, N11. - P. 7236 - 7242.
98. Deng W., Burland V., Plunkett G. et al. Yersinia pestis KIM-ийн геномын дараалал // J. Bacteriol. 2002 - V. 184 - P. 4601 - 4611.
99. Dennis D.T., Chow C.C. Тахал // J. Pediatr. Халдварлах. Dis. 2004. - V. 23(1). -П. 69-71.
100. DeSalle R., Giribet G., Wheeler W. / Techniques in molecular systematics and evolution / Birkhauser, 2002. 420 х.
101. Devignat R. Variétés de l'espèce Pasteurella pestis // ДЭМБ 1951. - V. 4.-P.
102. Epinger M., Guo Z., Sebastian T., Song Y., Lindl er L.E., Yang R., Ravel J. Cine дахь эндемик тахлын байгалийн голомтоос тусгаарлагдсан Yersinia pestis-ийн геномын дарааллын төсөл // J. Bacteril. 2009. - V. 191. - P. 7628 - 7629.
103. Epinger M., Rosovitz M.J., Fricke W.F. гэх мэт. Алс Дорнодын час улаан халуурлын үүсгэгч болох Yersinia pseudotuberculosis IP31758-ийн геномын бүрэн дараалал // Плос Генетик 2007. - V. 3 - P. 1508 - 1522.
104. Eppinger M., Worsham P.L., Nikolich M.P. гэх мэт. Анголын гүн үндэстэй Yersinia pestis омгийн геномын дараалал нь тахлын нянгийн хувьсал ба пангеномын талаар шинэ ойлголтыг илчилж байна // J. Bacteriol. 2010. - V. 192, N 6. - P.i1685-1699.
105. Фелек С., Цанг Т.М., Круконис Е.С. Гурван Yersinia pestis наалдамхай бодис нь эукариот эсүүдэд Yop дамжуулалтыг хөнгөвчлөх ба тахлын хоруу чанарт хувь нэмэр оруулдаг // Халдвар. Дархлаа. V. 77(2). - P. 825 - 836.
106. Felsenstein J., PHYLIP-Phylogeny Inference Package (хувилбар 3.2). Cladistics, 1989, боть. 5, х. 164 -166, http://evolution.genetics.washington.edu/philip.html.
107. Фетерстон Ж.Д., Перри Р.Д. Yersinia pestis KIM6+-ийн пигментацийн голомт нь оруулах дараалалтай бөгөөд пестицидийн мэдрэмж ба HMWP2-ийн бүтцийн генийг агуулдаг // Моль. Микробиол. 1994. - V. 13, №4. - P. 697 - 708.
108. Forman S., Wulff C. R., Myers-Morales T. et al. Yersinia pestis-ийн yadBC, хөөсөн тахлын шинэ хоруу чанарыг тодорхойлох хүчин зүйл // Infect Immun. - 2008. V. 76(2). -П. 578-587.
109. Garcia E., Worsham P., Bearden S. et al. Pestoides F, хуучин ЗХУ-ын ердийн бус Yersinia pestis омог // Adv Exp Med Biol. 2007. - V. 603. -П. 17-22.
110. Гаскуэль О. / Эволюци ба филогенезийн математик. / Кларендон хэвлэл. Оксфорд. 2004.-33 х.
111. Гинцбург А.Л., Шовадаева Г.А., Шубин Ф.Н. гэх мэт. Хромосомтой нэгтгэх - Йерсиниа дахь кальциас хамааралтай плазмидын альтернатив төлөв // Мол. Генерал. микробиол. Вирус. 1989. -Н 5. -П. 7 - 11.
112. Guiyoule A., Gerbaud G., Buchriester C. et al. Yersinia pestis II Emerg-ийн эмнэлзүйн тусгаарлалт дахь стрептомициныг шилжүүлэх боломжтой плазмидын эсэргүүцэл. Халдварлах. Dis. 2001. - Боть. 7, No 1. - P. 43 - 48.
113. Гуо Ю., Жан Л., Шиа Л. нар. Хятадын Юньнань мужийн Юлонг хошуунаас тусгаарлагдсан Yersinia pestis-ийн биохимийн шинж чанарууд // Эндэм. Dis. Бух. -2008.-В. 23.-П. 12-14.
114. Hall-Stoodley L., Costerton J.W., Stoodley P. Бактерийн био хальс: байгалийн орчноос халдварт өвчин хүртэл. Нат. Илч. Микробиол. 2004, N2. - P 95 -108.
115. Hare J.M., McDonough K.A. Yersinia pestis-ийн Конго улаан холбох мутацийн өндөр давтамжийн RecA-аас хамааралтай ба бие даасан механизмууд. H J бактериол. 1999.-В. 181(16). - P. 4896-4904.
116. Hillier S.L., Charnetzky W.T. Yersinia pestis II J.Clin.Microbiol-ийг тодорхойлоход изоцитрат лиазын идэвхийг ашигладаг шуурхай оношлогооны шинжилгээ. - 1981. V.13, N4. -П. 661-665.
117. Хиннебуш Б.Ж. Yersinia pestis II Curr-д бөөсөөр дамжих халдварын хувьсал. Асуудал Мол. Биол. 2005. - V. 7, N2. - P. 197 - 212.
118. Hinnebusch B.J., Fisher E.R., Schwan T.G. Yersinia pestis плазминоген идэвхжүүлэгч болон бусад плазмидын кодлогдсон хүчин зүйлийн бөөсийг дунд зэргийн хамааралтай бөглөрөхөд гүйцэтгэх үүргийг үнэлэх // Халдвар. Дархлаа. 1998. - V. 178. - P. 1406 -1415.
119. Hinnebusch B.J., Perry R.D., Schwan T.G. Тарваган тахлыг бүүрэгээр дамжуулахад Yersinia pestis hemin storage (hms) байршлын үүрэг // Шинжлэх ухаан. 1996. - V 273, N5273-P. 367-370.
120. Hinnebusch B.J., Rudolf A.E., Cherepanov P.et al. Бөөсний векторын дунд гэдэс дотор Yersinia pestis амьд үлдэхэд Yersinia хулганы хорын үүрэг // Шинжлэх ухаан. - 2002.-В. 296.-П. 733-735.
121. Hoiczyk E., Roggenkamp A., Reichenbecher M. et al. Yersinia YadA болон Moraxella UspAs-ийн бүтэц, дарааллын шинжилгээ нь наалдамхай бодисын шинэ ангиллыг харуулж байна // J. EMBO 2000. - V. 19(22). - P. 5989 - 5999.
122. Ириарте М., Корнелис Г.Р. Yersinia эмгэг жамын молекулын тодорхойлогч хүчин зүйлүүд // Микробиологи. 1996.-В. 12(2). - P. 267-280.
123. Жексон С., Бэрроуз Т.В. Pasteurella pestis-ийн хоруу чанартай омгийн пигментгүй мутантуудад төмрийн хоруу чанарыг нэмэгдүүлэх нөлөө // Br. J. Exp. Патол. - 1956. -Ю. 37.- P. 577-583.
124. Жошуа Г.В.П., Карлышев А.В., Смит М.П. гэх мэт. Yersinia халдварын Caenorhabditis elegans загвар: биотик гадаргуу дээр био хальс үүсэх // Микробиологи. 2003. - V. 149. - P. 3221 - 3229.
125. Kienle Z., Emody L., Svanborg C., O"Toole P.W. Yersinia pestis-ийн плазминоген идэвхжүүлэгчийн наалдамхай шинж чанарууд. II J. Gen. Microbiol. 1992. -V. 138.-1679-1687.
126. Kitching I.J., Forey P.L., Humphries C.J., Williams D.M. / Кладистик. Парсимонийн шинжилгээний онол ба практик. - Оксфордын шинжлэх ухааны нийтлэлүүд, 1998. - 223 х.
127. Кутырев В.В., Боолгакова Е.Г., Йидяева Н.А. гэх мэт. Yersinia төрлийн бактерийн янз бүрийн бүлгүүдийн харьцуулсан шинж чанар // Байгалийн халдвар. Дис.: Abst. шинжлэх ухааны. Conf. Арванхоёрдугаар сарын 6. УБ., 2001. - С. 39 - 40.
128. Кутырев В.В., Филиппов А.А., Опарина О.С. гэх мэт. Хоруу чанартай холбоотой Yersinia pestis хромосомын тодорхойлогч Pgm+ ба Pst-ийн шинжилгээ // Микроб. Па-тог. 1992.-В. 12.- P. 177-186.
129. Кутырев В.Ю., Видяева Н.А., Бобров А.Г. гэх мэт. Хулганы хорт ген нь нууцлагдсан фосфолипаза D-г кодлодог // Бактерийн уургийн хор. Жена-Штутгарт. - 1997.-П. 59-60.
130. Lahteenmaki K., Virkola R., Saren A. et al. Yersinia pestis-ийн плазминоген идэвхжүүлэгч пла-ийн илэрхийлэл нь хөхтөн амьтдын эсийн гаднах матрицад нянгийн хавсралтыг сайжруулдаг // Infect Immun. 1998. - V. 66(12). - P. 5755 - 5762.
131. Lathem W.W., Price P.A., Miller V.L., Goldman W.E. Плазминоген идэвхжүүлэгч протеаз нь уушгины хатгалгааны анхдагч тахлын хөгжлийг тусгайлан хянадаг // Шинжлэх ухаан. 2007. - V. 315 (5811). - P. 509 - 513.
132. Лазарус А.А., Декер К.Ф. Тахал // Амьсгалын тусламж үйлчилгээний эмнэлэг. Н Ам. 2004.-В. 10(1).-P. 83-98.
133. Li Y., Hauck Y., Platonov M.E. нар., Yersinia pestis-ийн генотип, шинжилгээ, ML VA: Төв Азийн тахлын голомтыг дэлхий даяар өргөжүүлэх талаархи ойлголт // PLoS ONE. 2009.-В. 4 (6)., e6000.j
134. Liang Y., Hou X., Wang Y. et al. Yersinia pestis II J. Clin-ийн бүрэн дараалсан омгийн геномын өөрчлөлт. Микробиол. - 2010. - V. 48 (5). - P. 1619-1623.
135. Lillard J.W., Fetherston J.D., Pedersen L. et al. Yersinia pestis II генийн гемин хадгалах (hms) системийн дараалал ба генетикийн шинжилгээ. - 1997. V. 193. - P. 13-21.
136. Линдлер Л.Е. Тарваган тахлын үүсгэгчийг бичих арга, Yersinia pestis II J. AOAC Int. 2009. - V. 92(4). - P. 1174 - 1183.
137. Линдлер Л.Э. Yersinia pestis - өвөрмөц плазмид pFra ба pPla // Yersinia молекул ба эсийн биологи / Ed.: E. Carniel, B.J. Иннебуш. Horison Bio-Science, 2004. - Бүлэг.
138. Мацумото Х., Залуу Г.М. Yersinia-ийн шилжүүлсэн эффекторууд // Курр. Санал. Микробиол. 2009. - V. 12(1). - P. 94 - 100.
139. McDonough K.A., Barnes A.M., Quan T.J. гэх мэт. Yersinia pestis-ийн пла генийн мутаци нь тахлын нян ба бөөс (Siphonaptera: Cerato-phyllidae) харилцан үйлчлэлийн явцыг өөрчилдөг I I Ж.Мед. Энтомил. 1993. - V. 30. - V. 772 - 780.
140. Mollaret H., Mollaret C. Yersina овгийн мелибиоз исгэх ба Y. pestis II Bull Soc Pathol Exot Filiales сортын оношлогоонд түүний ач холбогдол. 1965.-В. 58(2).-P. 154-156.
141. Mount D. W. / Bioinformatics. Дараалал ба геномын шинжилгээ. Gold Spring Harbor лабораторийн хэвлэл, 2003. - 50 х.
142. Наумов А.В., Куз"миченко И.А., Тараненко Т.М. нар. Тахал үүсгэгчийн эмгэг төрүүлэгчийн биохимийн асуудал // Мед. Паразитол. (Моск). 1995. - N 4 - P. 17-22.
143. Navid A., Almaas E. Yersinia pestis дахь бодисын солилцооны сүлжээний геномын хэмжээний сэргээн босголт, омог 91001 // Мол. Биосист. 2009. - V. 5(4). - P. 368 -375.
144. Odaert M., Berche P., Simonet M. IS200-тэй төстэй элемент ашиглан Yersinia pseudotuberculosis-ийн молекулын төрөлжүүлэлт // J. Clin. Микробиол. 1996. - V. 34(9). -П. 2231-2235.
145. Paerregaard A., Espersen F., Skurnik M. Туулайн гэдэсний эд, туулайн гэдэсний сойз хилийн мембраны цэврүүт наалдац нь Yersinia гадна мембран уураг YadA үүрэг // APMIS. 1991. - V. 99(3). - P. 226 - 232.
146. Paiva Nunes M., Suassuna I., Rocco Suassuna I. Бразилд тусгаарлагдсан Yersinia pestis дээжийн биохимийн шинж чанар // Илч. Латинам. Микробиол. 1977. -В. 19(4).-P. 189-197.
147. Пан Н.Ж., Брэди М.Ж., Леонг Ж.М., Гогуэн Ж.Д. Yersinia pestis II Antimicrob-ийн III төрлийн шүүрлийг онилдог. Агентууд Хими. 2009. - V. 53(2). - P. 385 -392.
148. Панина Е.М., Витресчак А.Г., Миронов А.А., Гельфанд М.С. Гамма-протеобактерийн үнэрт амин хүчлийн биосинтезийн зохицуулалт // J. Mol. Микробиол. Биотехнологи. 2001. - V. 3, N 4. - P. 529 - 543.
149. Пархилл Ж., Врен Б: В., Томсон Н.Р. гэх мэт. Тахал үүсгэгч Yersinia pestis-ийн геномын дараалал // Байгаль. 2001. - V. 413. - P. 523 - 527.
150. Patel C.N., Wortham B.W., Lines J.L. гэх мэт. Полиаминууд нь тахлын био хальс үүсэхэд зайлшгүй шаардлагатай // J. Bacteriol. 2006.-В. 188, N 7. - P. 2355 - 2363.
151. Пендрак М.Л., Перри Р.Д. Yersinia pestis I I Biol-ийн гемин хадгалалтын байршлын шинж чанар. Металл 1991. - V. 4. - P. 41 - 47.
152. Пендрак М.Л., Перри Р.Д. Yersinia pestis II Mol-ийн Hms+ фенотипийг илэрхийлэхэд зайлшгүй шаардлагатай уураг. Микробиол. 1993. - V.8. - P. 857 - 864.
153. Perry R.D., Pendrak M., Schuetze P. Yersinia pestis II J. Bacteriol-ийн пигментацийн фенотипт оролцдог гемин хадгалах локусыг тодорхойлох ба клончлох. 1990. - V. 172. - P. 5929 - 5937.
154. Перри Р.Д., Балбо П.Б., Жонс Х.А. гэх мэт. Yersinia pestis-аас авсан Йерсиниабактин." Сидерофорын биохимийн шинж чанар, төмрийн тээвэрлэлт, зохицуулалтад гүйцэтгэх үүрэг // Микробиологи. 1999. - V. 145, 5-р хэсэг. - P. 1181 - 1190.
155. Перри Р.Д., Фетерстон Ж.Д. Yersinia pestis тахлын этиологийн үүсгэгч // Клин. микробиол. Илч. 1997. - V. 10. - P. 35.
156. Перри Р.Д., Люсиер Т.С., Сиккема Д.Ж. et al., Yersinia pestis II-д гемин ба органик бус төмрийн агуулах нөөц. Дархлаа. - 1993. V. 61. - P. 32 - 39.
157. Perry R.D., Straley S.C., Fetherston J.D. гэх мэт. Yersinia pestis KIM5-ийн бага Ca2+ хариу үйлдэл бүхий плазмидын pCDl-ийн ДНХ-ийн дараалал ба шинжилгээ // Халдвар. Дархлаа. 1998. - V. 6, N 10. - P. 4611 - 4623.
158. Перри Р.Д. Бүүргийн тахал: Yersinia pestis II-ийн амьд үлдэх ба халдвар дамжих ASM News. 2003. - V.69, N 7. - P. 385 - 389.
159. Тахал. Мэдээллийн хуудас N267. Дэлхийн эрүүл мэндийн байгууллага, http//www.who.int/mediacentre/factssheets/fs267/en/index.htm хаягаар авах боломжтой. 2006 оны 4-р сарын 18-нд нэвтэрсэн.
160. Portnoy D.A., Moseley S.L., Falkow S. Yersinia enterocolitica эмгэг жамын плазмидын шинж чанар ба плазмидтай холбоотой тодорхойлогч хүчин зүйлүүд // Infect. Дархлаа. 1981. - V. 31. - P. 775 - 782.
161. Pouillot F., Fayolle C., Camiel E. Yersinia pseudotuberculosis-д хадгалагдаж, Yersinia pestis I I халдвараар алдагдсан хромосомын бүсүүдийн шинж чанар. Дархлаа. 2008. - V. 76(10). - P. 4592 - 4599.
162. Прасад Махаржан Р., Ю П.Л., Сеето С., Ференси Т. Глюкозын хязгаарлалтын дор өсөн нэмэгдэж буй Escherichia coli дахь изоцитрат лиаза ба глиоксилатын мөчлөгийн үүрэг // Res. Микробиол. 2005. - V. 156(2). - P. 178 - 183.
163. Prentice MB, Rahalison L. Plague // Lancet. 2007. - V. 369, N 9568. - P. 1196-1207.
164. Үнэ S.B., Cowan C., Perry R.D., Straley S.C. Yersiniapestis V эсрэгтөрөгч нь Ca2(+)-аас хамааралтай өсөлт, бага Ca2+ хариу урвалын хоруу чанарын генүүдийн хамгийн их илэрхийлэлд шаардлагатай зохицуулалтын уураг юм // J. Бактерид. 1991. - V. 173(8). - P. 2649 - 2657.
165. Rakin A., Boolgakowa E., Heesemann J. Yersinia pestis бактериоцины пестицины генийн кластерын бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалт // J. Microbiol. 1996.-В. 142.-П. 3415-3424.
166. Ричардсон D.J., Berks B.C., Russell D.A. гэх мэт. Прокариот нитратын редуктазын функциональ, биохими, генетикийн олон янз байдал // CMLS. 2001. - V. 58. - P. 165-178.
167. Снеат П.Х., Сокал Р.Р. Тоон ангилал зүй II Байгаль. 1962. - N 193. - P. 855 - 860.
168. Quan T., Van der Linden J., Tsuchiya K. Evaluation of a gualitative isocitrate lyase assay for presumptive identification of Yersinia pestis II J. Clin. Микробиол. 1982.-В. 15,N16.-P. 1178-1179.
169. Sanger F., Nicklen L., Coulson A. ДНХ-ийн дараалал нь гинжин төгсгөлийн дарангуйлагч // Proc. Натл. Акад. Шинжлэх ухаан. АНУ. 1977. - Боть. 74. - P. 5463 -5467.
170. Савостина Е.П., Попов Иу.А., Каштанова Т.Н. гэх мэт. Тахал үүсгэгч омгийн үндсэн дэд зүйлүүдийн геномын полиморфизм // Мол. Генерал. микробиол. Вирус. -2009-N4. P. 23-27.
171. Sebbane F., Jarrett C. O., Gardner D. et al. Нохойн тахал өвчний септисимик ба бубон хэлбэрийн тодорхой тохиолдлын үед Yersinia pestis плазминоген идэвхжүүлэгчийн үүрэг // Proc.Natl. AcadlSci.USA. 2006. - V.103, N 14 - P.5526 - 5530.
172. Sebbane F., Jarrett G.O., Linkenhoker J.R., Hinnebusch B.J. Бөөсний вектор ба "хөхтөн амьтдын эзэн"-ийн Yersinia pestis халдварын үүсгэгч изоцитрат лиазын үйл ажиллагааны үүргийн үнэлгээ // Infect, and Immun - 2004. V. 72, N 12. - P. 7334-7337.
173. Semple C., Steel M. / Phylogenetics. Оксфордын их сургуулийн хэвлэл, 2003. - 256 П
174. Simonet M., Riot B., Fortineau N., Berche P. Yersinia pestis-ийн Invasin үйлдвэрлэлийг inv генийн дотор IS200-тэй төстэй элемент оруулах замаар зогсооно // Infect Immun. 1996. - V. 64(1). - P. 375 - 379.
175. Skrzypek E., Straley S.C. V эсрэгтөрөгчийн шүүрэл, бага Ca2+ хариу урвалын зохицуулалт, Yersinia pestis II J. Bacteriol-ийн хоруу чанарт lcrV дахь устгалын ялгавартай нөлөө. 1995. - V. 177(9). - P. 2530 - 2542.
176. Song Y., Tong Z., Wang J. et al., Yersinia pestis 91001 омгийн бүрэн геномын дараалал, хүнд авирулент тусгаарлалт // DNA Res. 2004. - V. 11 (3). -П. 179-197.
177. Стенет Н.К., Атшабар Б.Б., Бегон М. нар. Тахал: өнгөрсөн, одоо ба ирээдүй // PLoS Med. 2008. - V. 5(1)., e3.
178. Straley et al., Yersinia дахь генийн илэрхийлэл ба эмгэг жамын хүрээлэн буй орчны модуляци // Trends Microbiol. 1995. - V. 3(8). - P. 310 - 317.
179. Sun Y.C., Hinnebusch B.J., Darby C. Yersinia pestis pseudogene-ийн хувьсал дахь сөрөг сонголтын туршилтын нотолгоо // Proc. Натл. Акад. Сэй. АНУ. 2008. V. 105, N 2. - P. 8097 - 8101.tyf
180. Surgalla M. J., Beesley E. D. Pasteurella pestis-ийн пигментаци илрүүлэхэд зориулсан Конго улаан-агар бүрэх орчин // Appl. Микробиол. - 1969. V. 18(5). - P. 834 -837.
181. Tahir Y., Skurnik M. YadA, олон талт Yersinia adhesin // Int. Ж.Мед. Микробиол. 2001. - V. 291(3). - P. 209 - 218.
182. Такахаши Х., Ватанабе Х. тахал // Ниппон Риншо. 2007. - V. 65. - P. 54-59.
183. Тибалл Р.В., Хилл Ж., Лотон Д.Ж., Браун К.А. Yersinia pestis ба тахал I I Биохим. Соц. Транс. 2003. - V. 31. - P. 104 - 107.
184. Weerasingle J.P., Dong T., Schertzberg M.R. гэх мэт. Escherichia coli II BMC микробиологи дахь аргинин биосинтетик опероны argCBH-ийн суурин фазын илэрхийлэл. 2006. - V. 6. - P. 14 - 26.
185. Уильямсон Э.Д. Тахал. // Вакцин. 2009. - V. 4. - P. 56 - 60.
186. Wren B.W. Микробын геномын шинжилгээ: хоруу чанарын талаарх ойлголт. Хост дасан зохицох ба хувьсал // Байгалийн Илч Генет. 2000. - V. 1. - P. 30 - 39.
187. Wren B.W. Yersinia нь бактерийн эмгэг төрүүлэгчийн хурдацтай хувьслыг судлах загвар төрөл//Байгалийн тойм. Микробиологи. 2003.-В.л. - Х.55-64.
188. Worsham P.L., Roy C. Pestoides F, Yersinia pestis омог нь плазминоген идэвхжүүлэгчгүй, аэрозолийн замаар хоруу чанартай // Adv. Exp. Мед. Биол. 2003. - V. 529. -П. 129-131.
189. Xiong Jin / Essential bioinformatics. Кембрижийн их сургууль. дар. 2006. 361 х.
190. Жоу Д., Хан Ю., Сүн Ю. нар. Yersinia pestis II Микробын халдварын харьцуулсан ба хувьслын геномик. 2004. - V. 6(13). - P. 1226 - 1234.
191. Жоу Д., Тун З., Сүн Ы. нар. Yersinia pestis biovars хоорондын бодисын солилцооны өөрчлөлтийн генетик ба шинэ биоварын санал, microtus // J. Bacteriol. -2004. V. 186. - P. 5147 - 5152.
Дээр дурдсан шинжлэх ухааны эх бичвэрүүд нь зөвхөн мэдээллийн зорилгоор нийтлэгдсэн бөгөөд диссертацийн эх бичвэрийг таних (OCR) ашиглан олж авсан болохыг анхаарна уу. Тиймээс тэдгээр нь төгс бус таних алгоритмтай холбоотой алдаануудыг агуулж болно.
Бидний хүргэж буй диссертаци, хураангуйн PDF файлд ийм алдаа байхгүй.
Yersinia pestis үндсэн ба жижиг дэд зүйл
02/03/03 - микробиологи
эрдмийн зэрэг олгох диссертаци
биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигч
Саратов - 2010 2
Уг ажлыг Хэрэглэгчийн эрх ашгийг хамгаалах, хүний сайн сайхны төлөөх холбооны албаны “Оросын тахал өвчний эсрэг “микроб” судалгааны хүрээлэн” Холбооны улсын байгууллагад гүйцэтгэсэн.
Шинжлэх ухааны удирдагчид:
ОХУ-ын Анагаахын Шинжлэх Ухааны Академийн корреспондент гишүүн, Анагаахын шинжлэх ухааны доктор, профессор Кутырев Владимир Викторович Биологийн шинжлэх ухааны доктор, ахлах судлаач Галина Александровна Ерошенко
Албан ёсны өрсөлдөгчид:
Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор Лидия Владимировна Карпунина Анагаахын шинжлэх ухааны доктор Наталья Ивановна Микшис
Тэргүүлэх байгууллага: ОХУ-ын Анагаахын Шинжлэх Ухааны Академийг байгуулах тухай “Гавьяат академич Н.Ф. Гамалея RAMS"
Хамгаалалт "_"2010_цагт Холбооны улсын "Оросын тахлын эсрэг судалгааны хүрээлэн "Микроб" (410005, Саратов, Университетская) дахь докторын болон нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалах Д 208.078.01 диссертацийн зөвлөлийн хурлаар явагдана. St., 46).
Диссертацийг Холбооны улсын байгууллагын "Оросын тахлын эсрэг судалгааны хүрээлэн "Микроб" шинжлэх ухааны номын сангаас олж болно.
Диссертацийн зөвлөлийн эрдэм шинжилгээний нарийн бичгийн дарга, биологийн шинжлэх ухааны доктор, ахлах эрдэм шинжилгээний ажилтан А. Слудский
АЖЛЫН ЕРӨНХИЙ ОНЦЛОГ
Хамааралтай байдаласуудлууд. Тарваган тахал бол эмгэг төрүүлэгчийн дамжих механизмтай, зоонозын байгалийн голомт, ялангуяа аюултай хорио цээрийн бактерийн халдварт өвчин юм [Черкасский, 1996]. Тарваган тахал нь хүн амд бодит аюул занал учруулж байна, зарим нь ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тарваган тахлын олон тооны байгалийн голомт байдаг [Онищенко нар, 2004]. Энэ өвчинд нэрвэгдээгүй хөрш зэргэлдээ орнуудаас болон биотеррорист үйлдлээс болж тахлын үүсгэгчийг Орост нэвтрүүлэх магадлал өндөр байна. ДЭМБ-ын мэдээлснээр дэлхий даяар жил бүр тарваган тахлын 2000 гаруй тохиолдол бүртгэгдэж, ихэнх нь үхэлд хүргэдэг. 2009 онд Хятадын Хайнань Түвдийн өөртөө засах оронд уушгины хатгалгааны томоохон дэгдэлт гарч, мөн хэд хэдэн хүн нас барсан байна. Эдгээр бүх баримтууд нь орчин үеийн технологид суурилсан тахлын эмгэг төрүүлэгчийг оношлох шинэ, өндөр үр дүнтэй арга, түүний үүсгэсэн онцгой аюултай өвчнөөс урьдчилан сэргийлэх, эмчлэх арга хэрэгслийг яаралтай боловсруулахыг шаарддаг.Өнөөг хүртэл ашигласан Yersinia pestis-ийн ангилалд зөвхөн морфологи, соёлын, биохимийн болон бусад фенотипийн шинж чанарыг харгалзан үзсэн [Безсонова, 1928; Борзенков, 1938; Туманский, 1957; Тимофеева, 1968; Кутырев, Проценко, 1998; Devignat, 1951] бөгөөд эдгээр шинж чанаруудын хувьсах чадвартай холбоотой сул тал байсангүй. Гэсэн хэдий ч генетик, молекул микробиологийн суурь ололт амжилт нь тахал үүсгэгчийг системчлэх асуудлыг шийдвэрлэхэд түүний молекул генетикийн шинж чанарыг ашиглахад үндэслэн чанарын шинэ түвшинд гаргах боломжийг олгож байна.
Одоогийн байдлаар хүлээн зөвшөөрөгдсөн дотоодын ангиллын дагуу тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгуудыг үндсэн болон 4 бага (Кавказ, Алтай, Гиссар, Улегей) дэд зүйлд хуваадаг [Тимофеева, 1985; Кутырев, Проценко, 1998]. Гадаадын өргөн тархсан ангиллын дагуу Y. pestis омгуудыг биохимийн хэд хэдэн шинж чанарын ялгаа (глицериныг исгэх, нитратыг багасгах, аммиакийг исэлдүүлэх чадвар) болон түүх, газарзүйн үндэслэлээр гурван биоварт хуваадаг: antiqua (эртний), medievalis (дунд зууны) болон orientalis ( дорно дахины). Фенотипийн шинж чанарын дагуу үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь гадаадын ангилалд хүлээн зөвшөөрөгдсөн гурван биовар (эртний, дундад зууны, дорнын) тохирч байна. Гэсэн хэдий ч ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тахлын байгалийн голомтод эргэлдэж буй Y. pestis омгууд нь тодорхой биоварт хамаарах байдлаараа системчлээгүй хэвээр байна.
Дифференциал ач холбогдолтой биохимийн шинж чанарын илэрхийлэлийн хувьд хамгийн идэвхтэй нь эртний биоварын омог юм. Тэд глицериныг исгэж, денитратжуулах үйлчилгээтэй. Дундад зууны үеийн биоварын омгууд Y.
пестис нь нитратыг бууруулах чадваргүй, харин глицерол, арабинозыг исгэх чадвартай.
Зүүн биоварын омгууд нь глицериныг исгэдэггүй, харин нитратыг идэвхтэй багасгаж, арабинозыг ашигладаг.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь дүрмээр бол өндөр хоруу чанартай бөгөөд тархалтын өндөр ач холбогдолтой байдаг. Тэд рамноз ба мелибиозыг исгэдэггүй, пестицин I-д мэдрэмтгий биш, изоцитралазын үйлдвэрлэл өндөртэй байдаг. Бага зэргийн дэд зүйлийн омгууд нь рамноз ба мелибиозыг исгэдэг, пестицин I-д мэдрэмтгий, изоцитрат-лиазын идэвхгүй, лабораторийн амьтдад сонгомол хоруу чанартай, тархалтын ач холбогдол багатай.
Y. pestis омгийг биовар болон дэд зүйл болгон хуваахад ашигласан биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн шалтгааныг өнөөг хүртэл хангалттай судлаагүй байна. Найдвартай батлагдсан цорын ганц зүйл бол зүүн биоварын омог дахь глицерол исгэх дутагдалтай байгаа шалтгаан нь глицерол-3-фосфат дегидрогеназа (glpD) генийн мутаци юм. Зүүн биоварын бүх омгууд энэ генд 93 bp-ийн делецитай болохыг харуулсан. . Уран зохиолд үндсэн ба бага дэд зүйлийн Y. pestis генийн бүтцийн ялгааг тодорхойлох, нитратыг багасгах, рамноз исгэхийг кодлох талаар цөөн хэдэн бүтээл байдаг [Куклева нар, 2008;
2009; Анисимов нар, 2004; Жоу нар, 2004].
Тарваган тахлын нянгийн омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээний хувьд нэг төрлийн бус байх шалтгаан тодорхойгүй хэвээр байна. Тарваган тахлын янз бүрийн голомтоос гаралтай омгууд нь хоол тэжээлийн хэрэгцээгээрээ ялгаатай байдаг бөгөөд энэ нь завсрын бодисын солилцооны генийн алдагдлаар тодорхойлогддог бөгөөд үүнийг Y. pestis омгийг байгалийн тахлын янз бүрийн голомтоос ялгах генетикийн схемд ашиглаж болно.
Микробиологи, биохимийн шинж чанарын янз бүрийн илэрхийлэлд тулгуурласан генийн бүтцэд гарсан өөрчлөлтийг тодорхойлох нь тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгийг ангилах генетикийн схемийг бий болгох, мөн Y-ийн өвөрмөц хувьслын үндсэн чиглэлийг тодорхойлох найдвартай үндэс суурь болно. хортон шавьж.
Ажлын зорилго. Тарваган тахал үүсгэгчийн омгийг дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндэслэлийг тодорхойлох.
Судалгааны зорилго:
ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын тахлын байгалийн голомтоос тусгаарлагдсан Y. pestis омгийг ажилд ашигласан биохимийн шинж чанараар нь (нитратыг бууруулах, изоцитрат лиаза үйлдвэрлэх, арабиноз, мелибиозыг исгэх) тодорхойлох. дэд зүйл ба биоварууд. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй омгууд нь тодорхой биоварт хамаарах эсэхийг тогтоох.
Нитратыг багасгах, арабиноз исгэх зэрэг биоваруудад хуваагдахад ашигладаг ялгаатай шинж чанарыг кодлодог генийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг судлах.
Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн болон жижиг дэд зүйлүүдийг ялгах үндэс болох мелибиозын исгэх, изоцитрат лиазын үйлдвэрлэлийг тодорхойлдог Y. pestis генийн өөрчлөлтийг тодорхойлох.
Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодорхойлох, тэдгээрийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг тогтоох.
Y. pestis омгийн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход олж авсан үр дүнг ашиглах хэтийн төлөвийг үнэлэх, энэ эмгэг төрүүлэгчийн дотоод хувьслын үндсэн чиглэлийг тогтоох.
Шинжлэх ухааны шинэлэг зүйлажил. Микробиологи, биохими, генетикийн нарийн төвөгтэй шинжилгээний мэдээлэлд үндэслэн ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй тахал төрөгчийн омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоваруудад хамаардаг болохыг тогтоожээ.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн зарим омгийн нитрат бууруулах идэвхгүй байдлын шалтгаан нь периплазмын нитрат редуктазын байрлалд нэг нуклеотидын орлуулагч G T байгаатай холбоотой болохыг анх удаа харуулсан. ген - napA нь эдгээр омгууд нь дундад зууны биоварт хамаардаг болохыг нотолж байна. Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад энэ шинж тэмдэг илрээгүй нь өөр нэг ген болох ssuA-ийн 302-р байрлалд тимин нуклеотид (+T) орсноор уншилтын хүрээ өөрчлөгдөж, унших үйл явц тасалдсантай холбоотой юм. Нитратыг багасгахад оролцдог SsuA хэмээх кодлогдсон тээврийн уургийн бүтэц.
Y-д арабиноз исгэх үйл явц байхгүй болох нь анх удаа тогтоогдсон.
Алтай, Гиссар дэд зүйлийн пестис нь генийн эхэн үеэс 773-р байрлалд гуанин нуклеотид (+G) оруулдаг арабиноз опероны - araC-ийн зохицуулалтын генийн мутацитай холбоотой байдаг. Унших хүрээн дэх өөрчлөлт, арабиноз опероны генийн транскрипцийг эхлүүлэхэд шаардлагатай зохицуулалтын уургийн AraC-ийн бүтцийг зөрчих.
Үндсэн болон бага дэд зүйлийн тарваган тахал үүсгэгчийн омог дахь изоцитрат лиазын янз бүрийн үйлдвэрлэлийн генетик үндэс анх удаа тогтоогдсон бөгөөд энэ нь зохицуулалтын генийн iclR-д хоёр нуклеотид (+CC) орсонтой холбоотой юм. 269-р байрлалд байгаа нь түүгээр кодлогдсон IclR ацетат опероны дарангуйлагч уураг идэвхгүй болоход хүргэдэг бөгөөд үндсэн дэд зүйлийн омог дахь изоцитрат лиаза ферментийн үүсгэгч нийлэгжилтийн шалтгаан болдог. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн iclR генийг агуулдаг бөгөөд изоцитрат лиазын үндсэн синтез хийх чадваргүй байдаг.
Үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омогт мелибиоз исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь галактозид нэвчилтийн ферментийг кодлодог melB генд IS285 оруулах дараалал нэвтэрсэнтэй холбоотой болох нь тогтоогдсон. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгийн хувьд melB ген дэх IS285 оруулга байхгүй байна.
Анх удаа Кавказын дэд зүйлийн омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг тодорхойлсон бөгөөд энэ нь argA ба aroF генүүдэд IS100 оруулах дараалал, 10 bp оруулгатай холбоотой юм. aroG генд тимин нуклеотидыг thiH генд оруулж 13 bp устгана. thiG генд.
Y. pestis омгийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн молекулын шинж чанарыг дэд зүйл, биовард хуваах үндсэн биохимийн шинж чанарыг кодлосон генээр олж авсан нь тахал үүсгэгчийг төрөл зүйл дотор ангилах генетикийн схемийг боловсруулах үндэс суурийг бүрдүүлдэг.
Ажлын үр дүнд үндэслэн “Тарваган тахал үүсгэгч омгийн дэд зүйлүүдийг дэс дараалалаар тодорхойлох арга” (No2009116913. Тэргүүлэх чиглэл 2009 оны 5 дугаар сарын 14-ний өдөр. Патент олгох шийдвэр хүлээн авсан) бүтээлийн мэдүүлэг. Олон талт дарааллаар бичих аргыг ашиглан Yersinia pestis омгийн дэд зүйлүүдийг ялгах (No. 2009146094) 12/11/2009 он.
Практик ач холбогдол ажил. Ажлын үр дүнд үндэслэн "Рамноз ба арабинозын исгэх үйл явцыг хянадаг rhaS ба araC генийн дараалалд үндэслэн тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийн дэд зүйлүүдийг тодорхойлох" арга зүйн зөвлөмжийг боловсруулж батлав (РосНИПЦИ-ийн захирал баталсан). “Микроб” 2009 оны 6 дугаар сарын 16-ны өдрийн 6 дугаар протокол) болон “Олон талт дараалалтай хэвлэх аргыг ашиглан Yersinia pestis-ийн дэд зүйлийн омгийг тодорхойлох” (РосНИПЦИ “Микроб” 2010 оны 2-р сарын 23-ны өдрийн 1-р протокол).
Эмгэг төрүүлэгч бактерийн улсын цуглуулгад Алтайн Y. pestis KM 910, Гиссарын KM 596, Үлэгэй дэд зүйлийн KM 1861 гэсэн гурван омог эдгээр дэд зүйлүүдийн лавлагаа омог болгон хадгалсан.
Судалгааны явцад олж авсан Y. pestis омгийн генетикийн зохион байгуулалтын талаархи мэдээллийг РосНИПЦИ "Микроб" -ын мэргэшүүлэх, ахисан түвшний сургалтанд "Тахал үүсгэгчийн генетик" сэдвээр лекц уншихад ашигладаг.
Батлан хамгаалах заалтууд:
1. ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй гол дэд зүйлийн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгууд нь эртний болон дундад зууны үеийн биоварт хамаарах нь эдгээр омгийн микробиологи, биохими, генетикийн шинж чанарын иж бүрэн шинжилгээгээр нотлогддог.
2. Y. pestis омгийг дэд зүйл болон биовард хуваахад ашигладаг биохимийн шинж чанарын өөр өөр илрэлийн үндэс нь эдгээр шинж чанарыг кодлодог генийн өөр өөр төрлийн мутаци юм. Дундад зууны үеийн биоварын үндсэн дэд зүйлийн омог дахь нитратыг бууруулах чадваргүй байгаа нь периплазмын нитрат редуктазын napA генд утгагүй мутаци (G T) байгаатай холбоотой бөгөөд Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омогтой холбоотой юм. периплазмын тээвэрлэгч уургийн SsuA-ийн ssuA генд нэг нуклеотид оруулах. Алтайн болон Гиссарын дэд зүйлийн омгуудад арабиноз исгэх байхгүй байгаа нь araC генийн дараалалд гуанин нуклеотид орсонтой холбоотой юм.
3. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн омгуудын биохимийн идэвхжил нь хэд хэдэн ялгавартай шинж чанарын дагуу ялгаатай байгаа нь тэдгээрийг үндсэн дэд зүйлд кодлох генийн бууралт, бага дэд зүйлд бүрэн бүтэн байдгаас үүдэлтэй.
Үндсэн дэд зүйлүүдийн омгуудад мелибиозын исгэх үйл явц байхгүй байгаа нь melB галактозид нэвчилтийн генд IS285-ийг нэвтрүүлсэнтэй холбоотой бөгөөд энэ дэд зүйлийн омог дахь изоцитрат лиазын үүсгэгч нийлэгжилт нь хоёр нуклеотид (CC) орсны улмаас үүсдэг. iclR зохицуулалтын генийн дараалал. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн melB ба iclR генийг агуулдаг.
4. Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн хоол тэжээлийн олон хэрэгцээний шалтгаан нь амин хүчил, витамины биосинтезийн хэд хэдэн генийг идэвхгүй болгосон явдал юм. Энэ дэд зүйлийн омгийн аргининаас хамаарал нь фенилаланины argA генд IS оруулснаас үүдэлтэй бөгөөд энэ нь 10 bp оруулснаас үүсдэг. aroG генд, тирозины хувьд - IS100-ийг aroF генд оруулах замаар, тиамин (B1) -ийг 13 bp устгах замаар. - гуяны генд нэг нуклеотид оруулах. Кавказын болон бусад дэд зүйлийн омог, түүнчлэн тахал үүсгэгчийн биоваруудын тодорхойлсон мутацийн бүхэл бүтэн цогцолбор дээр үндэслэн Y. pestis-ийн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход ашиглаж болох өвөрмөц генотипүүдийг тодорхойлсон.
Ажлын баталгаажуулалт. Диссертацийн материалыг ТУХН-ийн гишүүн орнуудын улс хоорондын шинжлэх ухаан, практикийн IX бага хуралд “Тусгаар улсуудын хамтын нөхөрлөлийн гишүүн орнуудын нутаг дэвсгэрт халдварт өвчинтэй тэмцэх дэлхийн стратегийг хэрэгжүүлэхэд орчин үеийн технологи”, Волгоград хотод танилцуулж, хэлэлцүүлэв. , 2008; Олон улсын VI бага хурал “Молекулын оношлогоо ба биоаюулгүй байдал”, М., 2009; 2010 оны 5-р сарын 25-27-ны хооронд "Биологийн аюулгүй байдлыг хангах орчин үеийн технологи" Хэрэглэгчийн эрх ашгийг хамгаалах, хүний өмгөөллийг хамгаалах холбооны албаны залуу эрдэмтэн, мэргэжилтнүүдийн эрдэм шинжилгээ, практик сургуулийн бага хурал; RosNIPCI "Microbe"-ийн жилийн эцсийн чуулганд, Саратов 2008 - 2010 он.
Диссертацийн бүтэц, хамрах хүрээ. Диссертацийг 157 хуудас бичгийн машинаар бичсэн бөгөөд танилцуулга, уран зохиолын тойм бүлэг, өөрийн судалгааны таван бүлэг, дүгнэлт, дүгнэлтээс бүрдэнэ. Бүтээлийг 11 хүснэгт, 34 зургийн хамт дүрсэлсэн болно. Ном зүйн индекс нь дотоод, гадаадын 203 эх сурвалжийг агуулна.
ҮНДСЭН БҮТЭЭЛИЙН АГУУЛГА
Материал, арга аргачлалын хувьд Y. pestis, Y. pseudotuberculosis-ийн 111 омгийг, үүнд тахлын гол үүсгэгч омог, ОХУ, ойрын болон алс хилийн чанадад тусгаарлагдсан бага зэргийн дэд зүйлийн 50 омгийг ашигласан. Янз бүрийн гаралтай Y. pseudotuberculosis-ийн 10 омгийг мөн судалсан. Омгийн соёл, морфологи, биохимийн шинж чанарыг судлахдаа уламжлалт аргуудыг ашиглан хийсэн [Аюултай халдварт өвчний лабораторийн оношлогооны практик гарын авлага, 2009]. Y. pestis омгоос ДНХ-г тусгаарлах ажлыг M.U-д заасан журмын дагуу стандарт аргаар хийсэн.1.3.2569-09 "I - IV бүлгийн эмгэг төрүүлэгч бичил биетэн агуулсан материалтай ажиллахдаа нуклейн хүчлийг олшруулах аргыг ашигладаг лабораторийн ажлыг зохион байгуулах." ПГУ-аар олж авсан бүтээгдэхүүний шинжилгээг T. Maniatis et al.-ийн удирдамжийн дагуу 0.8 – 2% агароз гель дээр хийсэн. . Генүүдийн нуклеотидын дарааллыг тодорхойлохдоо Ф.Сэнгерийн аргын дагуу “CEQ 8000” (Бекман Култер) генетик анализаторын загвар дээр хийгдсэн. Y. pestis болон Y. pseudotuberculosis-ийн геном, өсөлтийн хүчин зүйлийн биосинтезийн бодисын солилцооны замуудын харьцуулсан шинжилгээг NCBI GenBank болон KEGG Metabolic Pathways мэдээллийн сангийн BLAST алгоритмыг ашиглан хийсэн. Омгуудын филогенетик шинжилгээг Mega 4.0, PHYLIP, SplitsTree4 программууд болон зайн матрицын аргууд: UPGMA, FITCH, Kitch, Neighbor-Joining, Minimum Evolution ашиглан хийсэн.
СУДАЛГААНЫ ҮР ДҮН
1. Төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос гаралтай Y. pestis омгийн микробиологи, биохимийн шинж чанарын шинжилгээ Ажилд ашигласан бүх Y. pestis омгийн биохимийн идэвхийг судалсан: нитратыг багасгах, исгэх чадвар. глицерин, арабиноз, мелибиоз, рамноз, исацитрат лиаза үйлдвэрлэх - дэд зүйл, биовард хуваахад ашигладаг шинж чанарууд. Үндсэн дэд зүйлийн бүх судлагдсан омгууд болох Y. pestis ssp. pestis нь рамноз ба мелибиозыг исгээгүй, харин изоцитрат лиаза үүсгэдэг. Үүний эсрэгээр, Y. pestis-ийн жижиг дэд зүйлийн бүх омгууд рамноз ба мелибиозыг исгэсэн боловч изоцитрат лиаза үүсгэдэггүй. Олж авсан мэдээлэл нь тахал үүсгэгчийн үндсэн болон жижиг дэд зүйлүүдийг ялгахад ашигладаг Y. pestis омгийн биохимийн шинж чанарын талаархи уран зохиолын мэдээлэлтэй уялдаа холбоотой байв.Y. pestis омгийг биовар болгон хуваахад ашигласан биохимийн шинж чанаруудыг судлахдаа нитратыг багасгах, арабиноз ба глицериныг исгэх, эдгээр шинж чанаруудын нэг төрлийн бус байдал нь үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн омгуудад тогтоогдсон. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тусгаарлагдсан үндсэн дэд зүйлийн зарим омгууд нитратыг бууруулаагүй нь дундад зууны үеийн биоварт хамаарах болохыг харуулж байна. Бага зэргийн дэд зүйл болох Алтай, Гиссар, Өлэгэй зэрэг омгууд нитратыг бууруулаагүй бол Кавказын омгууд энэ шинж чанараараа эерэг байсан.
Хоёрдахь ялгах шинж чанар болох арабинозыг исгэхийн дагуу уг ажилд судлагдсан үндсэн, кавказ, улега дэд зүйлийн бүх Y. pestis омгууд нэгэн төрлийн байсан бөгөөд энэ моносахаридыг ашигласан. Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгууд арабинозыг исгээгүй бөгөөд энэ шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндэс нь тодорхойгүй хэвээр байв.
Глицеролыг исгэх чадваргүй байх (өөр нэг ялгаатай биохимийн шинж чанар) нь biovar orientalis омгийн онцлог шинж юм. Гэсэн хэдий ч ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад ийм омгийн байнгын эргэлттэй голомт тогтоогдоогүй байна. Эдгээр нутаг дэвсгэрт Y. pestis-ийн тусгаарлагдсан глицерин-сөрөг омгийг тусгаарласан тухай уран зохиолд зөвхөн тусгаарлагдсан тайлан байдаг [Сагымбек нар, 2003; Онишченко нар, 2004].
Biovar orientalis омгийн генетикийн шинж тэмдэг нь 93 bp-ээр устгагдах явдал юм. glpD генд - глицерин-3-фосфатдегидрогеназа.
ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн тахлын голомтоос гаралтай Y. pestis-ийн бүх омгууд glpD ген дэх дорнын биоварын 93-bp устгалын шинж чанарыг агуулаагүй нь тэдний дунд orientalis биоварын омог байхгүйг баталж байна (Зураг 1) ). Ийм омгийг зөвхөн гадаад улс орнуудаас олж авсан тусгаарлалтаас илрүүлсэн.
Зураг 1. glpD генийн праймер бүхий Y. pestis омгийн ПГУ-ын шинжилгээ: 1 – 16 – ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын тахлын байгалийн голомтоос гарсан үндсэн дэд зүйлийн омгууд; 17 – 19 – гадаад орнуудаас ирсэн зүүн биоварын омгууд; 20 - сөрөг хяналт.
Сумнууд нь үүссэн өсгөгчийн хэмжээг заана.
Ийнхүү бидний судалсан Y. pestis омгууд нь биохимийн шинж чанарын нийлбэр (глицерин исгэх, нитратын бууралт)-ын дагуу ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын нутаг дэвсгэрээс тусгаарлагдсан эртний болон дундад зууны үеийн биоваруудад хамаарах нь нийтээр хүлээн зөвшөөрөгдсөн үзэл бодолтой нийцэж байна. Эдгээр биоваруудын омгууд нь тахлын эх газрын голомтод, зүүн биоварын омгууд - далайн эрэг дагуу байрлах харх хэлбэрийн голомтоор хязгаарлагддаг.
Энэ ажлын явцад Кавказын дэд зүйлийн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгийг судлахад ихээхэн анхаарал хандуулсан, учир нь олон тооны судлаачдын үзэж байгаагаар [Бобров, Филиппов, 1997] эдгээр нь тахлын амьд үлдсэн омгийн хамгийн эртний нь юм. эмгэг төрүүлэгч ба түүний өмнөх Y-тэй хамгийн ойр байдаг.
псевдосүрьеэ. Биохимийн шинж чанарын хувьд энэ дэд зүйлийн омгууд нь Y. pestis-ийн бүх дэд зүйлүүдээс хамгийн идэвхтэй нь болсон. Тэд нитрат бууруулах үйл ажиллагаатай байсан бөгөөд исгэсэн глицерол, арабиноз, рамноз, мелибиозыг агуулдаг. Энэ дэд зүйлийн омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээний талаархи уран зохиолд зөрчилтэй өгөгдөл байсан тул [Мартиневский, 1969; Апарин, Голубинский, 1989], бид Кавказын дэд зүйлийн омгийн хоол тэжээлийн хэрэгцээг тодруулахын тулд судалгаа хийсэн.
Кавказын дэд зүйлүүдийн судлагдсан бүх омгууд нэлээд жигд байсан нь тогтоогдсон. Тэд амин хүчлийн хэрэгцээг тодорхойлсон - фенилаланин, тирозин, аргинин, витамин В1 (тиамин). Эдгээр өсөлтийн хүчин зүйлд тавигдах шаардлагаас гадна Зүүн Кавказын өндөр уулын тахлын голомтоос гаралтай омгууд нь лейцинээс хамааралтай байсан бол Ленинакан, Присеван, Зангезүр-Карабах, Араксины байгалийн голомтоос гаралтай Кавказын дэд зүйлийн омог байхгүй байв. ийм хамаарал.
Амин хүчил, витамин В1 (тиамин) дахь Кавказын дэд зүйлийн омгийн ауксотрофийн шалтгаан нь тодорхойгүй байгаа тул дараа нь бид энэ дэд зүйлийн омгийн ауксотрофийн генетик үндэслэлийн судалгааг хийсэн.
2. Тарваган тахал үүсгэгчийн биоварыг ялгахад ашигладаг биохимийн шинж чанарыг кодлодог генийн бүтэц, үйл ажиллагааны зохион байгуулалтыг тодорхойлох Нитратыг багасгах чадваргүй байх нь дундад зууны үеийн биоварын Y. pestis омгийн онцлог шинж бөгөөд тэдгээрийг омгоос ялгадаг. эртний болон зүүн биоваруудын . ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтод эргэлдэж буй тахлын бичил биетний бага зэргийн дэд зүйлийн омгууд нь деатрификаторын үйл ажиллагаагаараа ялгаатай байдаг. Гэсэн хэдий ч тэдний энэ шинж чанарын өөр өөр илрэлийн генетикийн шалтгаан нь тодорхойгүй хэвээр байна.
Y-ийн геномын харьцуулсан компьютерийн шинжилгээнд үндэслэн.
NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан pestis болон Y. pseudotuberculosis-ийн судалгаагаар нитратыг бууруулахад оролцдог генүүд нь ижил бүтэцтэй, napA-F ба napP гэсэн зургаан генээс бүрддэг nap оперонд нэгтгэгддэг болохыг тогтоожээ (Зураг 2) .
Нитратыг бууруулахад оролцдог бусад генүүдийг мөн судалсан: narP ба ssuA нь зохицуулагч уураг NarP ба тээвэрлэх уураг SsuA-г тус тус кодлодог Зураг 2. Y. pestis омог дахь nap опероны бүтэц Компьютерийн шинжилгээний үр дүнд nap опероны генүүд, энэ опероны бүх генд дан нуклеотидын орлуулалт байгаа боловч хамгийн чухал нь napA генийн эхэн үеэс эхлэн 613-р байрлалд G T нуклеотид орлуулсан нь периплазмын нитрат редуктаза болох өмнө нь тодорхойлогдсон. Y. pestis KIM болон medievalis биоварын бусад омгууд. MEGA 4.0 програмыг ашиглан компьютерийн шинжилгээний үр дүнд энэхүү мутаци нь зогсоох кодон болох GAA TAA триплетийг өөрчлөхөд хүргэдэг бөгөөд полипептидийн гинжин хэлхээний (204-р амин хүчлийн үлдэгдэлийн дараа) орчуулгыг эрт зогсооход хүргэдэг болохыг тогтоожээ. Энэ ферментийн молекул.
Бид microtus biovar (NCBI GenBank) омгийн 91001 омгийн 302-р байрлалд тимин нуклеотидыг оруулсан ssuA (генийн хэмжээ - 1123 bp) хромосомын генийн денитрификаторын идэвхжилд чухал ач холбогдолтой өөр нэг мутацийг илрүүлсэн. Mega 4.0 програмыг ашиглан компьютерийн шинжилгээний үр дүнд энэхүү мутаци нь унших хүрээний шилжилт, SsuA уургийн бүтцийг тасалдуулахад хүргэдэг.
Праймеруудыг napA ба ssuA генийн хувьсах бүсүүдэд зориулж бүтээсэн бөгөөд тэдгээрийн тусламжтайгаар эдгээр генийн хэсгүүдийг ПГУ-д олшруулж, улмаар тэдгээрийн нуклеотидын дарааллыг тодорхойлсон. Y. pestis омгийн денитрификаторын өөр өөр үйл ажиллагааны шалтгааныг тодорхойлохын тулд бид төрөл бүрийн байгалийн тахлын голомтоос үндсэн болон бага дэд зүйлийн 90 Y. pestis омог, мөн төрөл бүрийн гаралтай Y. псевдотүрьеэгийн 10 омгийг судалсан. Шинжилгээний үр дүнд ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудаас тусгаарлагдсан үндсэн дэд зүйлийн омгууд нь нитратыг бууруулах чадваргүй, биовар medievalis омгийн шинж чанартай 613-р байрлалд G T нэг нуклеотидын орлуулалттай байсан нь тогтоогдсон. кодоны өөрчлөлт (GAA TAA) ба периплазмын нитрат редуктазын молекулын трансляцийн полипептидийн гинжин хэлхээг эрт дуусгах. Гол дэд зүйлийн судлагдсан зарим омгийн 613-р байрлалд нуклеотидын орлуулалт байгаа нь medievalis биоварын генетикийн шинж тэмдэг бөгөөд тэдгээрийн денитрификаторын идэвхгүй байдал нь тэдгээрийг дундад зууны үеийнх гэж ангилах үндэс болдог. биовар.
Үүний зэрэгцээ бид нитратыг бууруулах чадваргүй Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгуудад napA генд энэ мутаци байгааг илрүүлээгүй. Эдгээр омгийн денитрификаторын идэвхгүй байдлын шалтгаан нь периплазмын зөөвөрлөх уураг SsuA-ийн ssuA генийн 302-р байрлалд тимин нуклеотид орсны улмаас үүссэн өөр нэг мутаци болох нь тогтоогдсон. Энэхүү мутаци нь зөвхөн Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгуудаас илэрсэн төдийгүй нитратыг бууруулах чадваргүй microtus biovar-ын 91001 омогоос ч илэрсэн.
Тарваган тахал үүсгэгч омгийг төрөлжүүлэн ялгахад ашигладаг биохимийн өөр нэг чухал шинж чанар бол арабиноз исгэх явдал юм. Үндсэн, Кавказ, Улега дэд зүйлийн бүх омгууд энэ нүүрс усыг ашиглах чадвартай байдаг бол Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгууд, мөн микротус биоварууд үүнийг ашиглах чадваргүй байдаг. Гэсэн хэдий ч тахал үүсгэгчийн Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омогт энэ шинж тэмдэг илрээгүйн генетикийн шалтгаан тодорхойгүй хэвээр байна.
Y. pestis болон Y-ийн геномын харьцуулсан компьютерийн шинжилгээнд үндэслэн.
Хуурамч сүрьеэ (NCBI GenBank) нь тахал болон псевдотүрьеэгийн нянгийн бүх омогт арабиноз оперон нь ижил бүтэцтэй бөгөөд зургаан генээс бүрддэг болохыг тогтоожээ. Үүнд: araA, araB, araH, araF, araG, нэг зохицуулалтын ген araC гэсэн таван бүтцийн ген багтана (Зураг 3).
Зураг 3. Y. pestis-ийн арабиноз опероны бүтэц Y. pestis ба Y. pseudotuberculosis (NCBI GenBank) омгийн арабиноз опероны ген, түүнчлэн araD генийн харьцуулсан компьютерийн шинжилгээний үр дүнд 112 bp-д делеци агуулсан aC зохицуулалтын генд мэдэгдэхүйц мутаци байгааг тогтоосон. (26 – 137) ба 91001 microtus biovar омгийн 773 байрлалд гуанин оруулсныг өмнө нь D. Zhou et al. .
Энэ генийн нуклеотидын бүрэн дарааллыг хавсаргасан давхардсан хоёр хос праймерыг araC генийн хувьсах хэсгүүдэд зориулан бүтээсэн бөгөөд түүний олшруулалтыг ПГУ-аар олж авсан.
Y. pestis болон Y. pseudotuberculosis-ийн 10 омгийн байгалийн омог дээр хийсэн araC генийн бүрэн дарааллын дарааллыг тогтооход зөвхөн Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгууд нь araC генийн мутацитай болохыг тогтоожээ. 773 байрлалд гуанин нуклеотидыг оруулснаар бусад дэд зүйл, псевдотүрьеэгийн микробын омгууд энэ генийн бүрэн бүтэн бүтэцтэй байсан. ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудаас тусгаарлагдсан судлагдсан Y. pestis омгийн хувьд microtus biovar омгийн шинж чанар бүхий 112 bp делеци илрээгүй.
Тиймээс бид анх удаа Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омгуудад арабинозыг ашиглах чадваргүй болсон нь araC генд нэг нуклеотид орсонтой холбоотой болохыг тогтоосон.
3. Тарваган тахал үүсгэгчийг үндсэн болон бага дэд зүйлд хуваахад ашигладаг ялгавартай шинж чанарыг кодлодог генийн өөрчлөлтийг тодорхойлох, түүнчлэн Y-ийн омог.
Псевдотүрьеэ нь дисахаридын мелибиозын эсрэг ферментийн идэвхжилтэй байдаг. Мелибиозыг ашиглах чадварыг Y. pestis biovar microtus-ийн омгуудад мөн илрүүлсэн. Үүний эсрэгээр үндсэн дэд зүйлийн бүх өндөр хоруу чанар бүхий Y. pestis омгууд нь мелибиозыг исгэдэггүй. Энэ биохимийн идэвхгүй байдлын генетикийн шалтгаан тодорхойгүй хэвээр байна.
NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан Y. pestis ба Y. pseudotuberculosis омгийн геномын харьцуулсан компьютерийн шинжилгээнд үндэслэн бид тарваган тахал, псевдотүрьеэгийн эмгэг төрүүлэгчдийн мелибиоз оперон нь ижил бүтэцтэй бөгөөд гурван төрлөөр төлөөлдөг болохыг тогтоосон. генүүд - melA (YP_1469), melB (YP_1470) ба melR (YP_1471) (Зураг 4).
Эдгээр генийн бүтцэд хийсэн шинжилгээний үр дүнд MelB тээврийн уураг - галактозид нэвчилтийг кодлодог melB бүтцийн генд судлагдсан шинж чанарыг илэрхийлэхэд чухал мутаци байгааг тогтоожээ. Энэ генийн нуклеотидын дараалалд үндсэн дэд зүйл болох CO92, KIM, Antiqua, Nepal516 (NCBI GenBank) омгуудад 73 нуклеотидын дараа IS285 оруулах дарааллын оруулга илэрсэн байна. Үүний эсрэгээр Y. pestis Pestoides F омог (Кавказын дэд зүйл) болон бүх Y. pseudotuberculosis омгууд нь melB генийн бүтэцтэй байдаг.
IS285 оруулах бүсийг хавсаргасан хос праймерыг melB генийн хувьсах бүсүүдэд зориулан бүтээсэн бөгөөд энэ генийн фрагментийг ПГУ-аар олшруулсан. Ажилд ашигласан үндсэн дэд зүйлийн бүх Y. pestis омгийн (51 омог) энэ хос праймерыг ашиглан олж авсан олшруулалт нь 1648 bp хэмжээтэй байсан нь IS285 (1324 bp) melB генийн дараалалд нэвтэрсэн болохыг харуулж байна. Эдгээр омгууд нь мелибиозын эсрэг ферментийн идэвхгүй байдалтай холбоотой байдаг. Үндсэн дэд зүйлээс ялгаатай нь ПГУ-ын үр дүнд үндсэн бус дэд хэвшмэл омгуудад жижиг хэмжээтэй (325 bp) өсгөгч илэрсэн нь melB генийн бүрэн бүтэн бүтцийг харуулсан бөгөөд энэ дисахаридыг исгэх чадвартай тохирч байна (Зураг 5).
Ийнхүү үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омгийн мелибиозыг исгэх чадваргүй байгаагийн шалтгаан нь IS285 оруулгатай холбоотой melB генийн бүтцийг зөрчсөнтэй холбоотой болохыг бид тогтоосон. Бага зэргийн дэд зүйлүүдийн омгууд нь бүрэн бүтэн melB генийг агуулдаг.
Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн дэд зүйлийн омгуудыг бага дэд зүйл ба псевдотүрьеэгийн микробын омгуудаас ялгахын тулд эхнийх нь изоцитрат лиаза ферментийг бүрдүүлэгч нийлэгжүүлэх чадварыг ашигладаг.
Зураг 5. Эмгэг төрүүлэгч омгийн melB генийн ПГУ-ын шинжилгээ: 1 – 3 – Кавказын дэд зүйл;
Гиссарын 4-5 дэд зүйл; 6 – 7 – Алтайн дэд зүйл; 8 – Улегай дэд зүйл; 9 - 17 - үндсэн дэд зүйл; 18 - сөрөг хяналт. Зүүн талд X174/HincII молекул жингийн маркерууд байна.
Үндсэн бус дэд зүйлийн Y. pseudotuberculosis ба Y. pestis-ийн омгууд нь үндсэн дэд зүйлийн омгуудаас ялгаатай нь энэ ферментийг үүсгэгч нийлэгжүүлэх чадваргүй болохыг харуулсан. Гэсэн хэдий ч үндсэн болон үндсэн бус дэд зүйлийн омог дахь энэ шинж чанарыг илэрхийлэх генетикийн шалтгаан одоогоор тодорхойгүй байна.
NCBI GenBank мэдээллийн санд танилцуулсан тарваган тахал болон псевдосүрьеэгийн үүсгэгчийн геномд хийсэн бидний хийсэн шинжилгээгээр тахал үүсгэгчийн бүх омгийн ацетат опероны бүтэц ижил бөгөөд гурван бүтцийн генийг агуулсан болох нь тогтоогдсон. - iclR генийн сөрөг зохицуулалтанд байдаг aceA, aceB, aceK (Зураг 6).
Зураг 6. Y. pestis омгийн ацетат опероны бүтэц Ацетат опероны генийн компьютерийн харьцуулсан шинжилгээгээр судлагдсан шинж чанарын фенотипийн илрэлтэд чухал ач холбогдолтой iclR (843 bp) зохицуулалтын генийн мутаци байгааг харуулсан. . Y. pestis омгийн CO92, KIM, Antiqua, Nepal516 (үндсэн дэд зүйл) генийн эхэн үеэс эхлэн 269-270 байрлалд хоёр нуклеотид (+CC) оруулснаар iclR ген идэвхгүй болсон нь тогтоогджээ. эдгээр омог дахь түүний хэмжээ 845 bp байв. IclR генийн 269-270-р байрлалд бидний тодорхойлсон оруулга (+CC) нь IclR дарангуйлагч уургийн полипептидийн гинжин хэлхээний орчуулгыг эрт зогсооход хүргэдэг бөгөөд энэ нь ацетат опероны генийг бүрдүүлэгч илэрхийлэлд хүргэдэг. изоцитрат лиазын синтезийн өндөр түвшин.
Хос праймерыг iclR генийн хувьсах бүсэд зориулж бүтээсэн бөгөөд түүний тусламжтайгаар Y-ийн 95 байгалийн омог дээр энэ генийн бүтцийг судалжээ.
үндсэн ба бага дэд зүйлийн пестис, псевдотүрьеэгийн үүсгэгч 10 омогт. Кавказ, Алтай, Гиссар, Улега дэд зүйлийн Y. pestis-ийн бүх омгийн iclR генийн фрагментуудын нуклеотидын дараалал ижил буюу 370 bp байна. псевдотүрьеэгийн микробын омгийн ижил төстэй дараалал, түүнчлэн Pestoides F омог (NCBI GenBank) -тай бүрэн нийцэж байгаа нь iclR генийн дараалсан бүсийн бүрэн бүтэн байдлыг илтгэж, тэдгээрийн доторх изоцитрат лиаза ферментийн идэвхжил багатай холбоотой юм. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн дэд зүйлийн омгуудаас өөр дүр зураг олдсон. iclR генд оруулга тогтоогдсон - 269 - 270 байрлалд хоёр нуклеотид (+CC) оруулах нь iclR зохицуулалтын генийг унших хүрээг өөрчлөхөд хүргэдэг бөгөөд үүний үр дүнд генийн үүсгэгч нийлэгжилтэд хүргэдэг. Үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омгийн изоцитрат лиаза фермент.
4. Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг бий болгох Дээр дурдсанчлан Кавказын дэд зүйлийн бүх омгууд өөрсдийн өсөлтөд амин хүчлүүд шаардлагатай байдаг: аргинин, тирозин, фенилалани, витамин В1 - тиамин. Гэсэн хэдий ч Y. pestis ssp.caucasica омгийн ауксотрофийн генетикийн шалтгааныг хараахан судлаагүй байна.
Эхний шатанд бид KEGG Metabolic Pathways мэдээллийн санд орсон Y. pestis, Y. pseudotuberculosis омгийн аргинин, тирозин, фенилалан, витамин В1 (тиамин)-ийн биосинтезийн замд компьютерийн шинжилгээ хийж, гол ферментүүдийг тодорхойлсон. Эдгээр өсөлтийн хүчин зүйлийн биосинтез ба тэдгээрийн генийг кодлох. BLAST алгоритмыг ашиглан аргинин, тирозин, фенилалан, витамин В1 (тиамин)-ийн биосинтезийн генүүдийн нуклеотидын дарааллын харьцуулсан шинжилгээг Y. pestis болон Y. псевдотүрьеэгийн омог (NCBI GenBank)-д хийсэн. Компьютерийн шинжилгээний үр дүнгээс харахад генийн эхэн үеэс эхлэн 196-р нуклеотидын дараа IS100 оруулах дарааллын оруулга болох Nacetylglutamate синтазын argA-ийн бүтцийн генийн Pestoides F омогоос бидний олж илрүүлсэн мутаци гарсан байна. Аргинины хамаарлын илрэлийн хувьд чухал ач холбогдолтой.
IS100-ийг нэвтрүүлсэн хос праймерыг ашиглан ПГУ-ын шинжилгээ хийхэд үндсэн, Алтай, Улега дэд зүйл, псевдо-сүрьеэгийн тахал үүсгэгчийн бүх омог дахь argA генийн үүсгэсэн фрагментийн хэмжээ, 215 bp байсан нь генийн бүтцэд нийцэж байна. Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омог дахь argA генийн хэлтэрхийнүүд нь IS100 оруулгатай тул генийг идэвхгүй болгоход хүргэсэн том молекул жинтэй (2143 bp) байсан.
Үнэрт амин хүчлүүдийн биосинтезд оролцдог генийн шинжилгээ нь Pestoides F омог дахь DAGPS изоферментийг (3-дезокси-дарабиногептулосонат-7-фосфатын синтаза) кодлодог aroG ген (1053 bp) нь генийг оруулснаар идэвхгүй болсон болохыг харуулж байна. нуклеотидууд (820 - 829 байрлалд) нь унших хүрээг өөрчлөх, фенилаланины нийлэгжилтийг тасалдуулахад хүргэдэг.
Үндсэн болон бага дэд зүйлийн 95 байгалийн омог дахь aroG фрагментийг дарааллаар нь судлахад үндсэн, Алтай, Гиссар, Үлэгэй дэд зүйлийн тахлын микробын омгуудад энэ ген нь бүрэн бүтэн бүтэцтэй, DAGPS функциональ уургийг кодлодог болох нь тогтоогджээ. -. Үүний эсрэгээр, Y. pestis-ийн Кавказын дэд зүйлийн омгуудад aroG генд 10 bp оруулга илэрсэн. 820-829 байрлалд байгаа нь унших хүрээг өөрчлөх, ферментийн бүтцийг тасалдуулахад хүргэдэг.
Кавказын дэд зүйлийн бүх омогт энэ мутаци байгаа нь фенилаланиныг нэгтгэх чадваргүйтэй холбоотой байв.
Pestoides F омгийн DAGPSTyr изоферментийг кодлодог өөр нэг бүтцийн ген болох aroF (1071 bp) нь генийн эхэн үеэс эхлэн 888 нуклеотидын дараа IS100 оруулах дарааллыг нэвтрүүлснээр идэвхгүй болж, улмаар синтез хийх чадвараа алддаг. ПГУ-ын шинжилгээгээр үндсэн, Алтай, Гиссар, Өлэгэй дэд зүйлийн омгуудаас генийн бүрэн бүтцэд тохирсон 563 bp хэмжээтэй aroF генийн өсгөгчийг гаргаж авсан. Кавказын дэд зүйлийн омгуудад ПГУ-д aroF генийн тодорхой олшруулалт хийгдээгүй бөгөөд энэ нь IS100 оруулгын дарааллыг нэвтрүүлсний дараа түүний фрагмент алдагдсаныг илтгэж, бодисын солилцооны генийн бүтцийн шинжилгээтэй холбоотой байв Витамин В (тиамин)-ийн биосинтезийн судалгаагаар тиазолын синтаза ферментийг кодлодог генүүд - thiG ба thiH-д мэдэгдэхүйц мутаци илэрсэн бөгөөд эдгээр нь Pestoides F омогт 13 bp устгалаар идэвхгүй болдог.
384 – 396 байрлалд, 552 байрлалд тимин нуклеотид (+T) оруулах.
Y. pestis-ийн байгалийн омог дахь гуя, гуяны хэлтэрхийнүүдийг бид дарааллаар нь судалснаар үндсэн, Алтай, Гиссар, Өлэгэй дэд зүйлийн омгуудад эдгээр генийн бүтэц бүрэн бүтэн байгаа нь В1 витаминыг нийлэгжүүлэх чадвартай хамааралтай болохыг илрүүлсэн. Бусад дэд зүйлээс ялгаатай нь Кавказын дэд зүйлийн омгууд нь thiH генийн 552-р байрлалд тимин нуклеотидын оруулгатай, 13 bp-ээр устгагдсан байна. гуяны генийн 384-396 байрлалд байгаа нь тиаминыг нийлэгжүүлэх чадваргүйтэй давхцаж байв.
Ийнхүү бид анх удаа Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг тодорхойлсон. Аргинины ауксотрофийг argA генд IS100, фенилаланиныг aroG-д нуклеотид оруулснаар, тирозин - IS100-ийг aroF-д оруулснаар, В1 витамин - 13 bp-ээр хасагдсанаар үүсдэг болохыг тогтоожээ. thiG болон thiH-д тимин нуклеотид оруулах замаар. Ийм мутаци нь бусад дэд зүйлийн (үндсэн, Алтай, Гиссар, Өлэгэй) Y. pestis омогт тохиолддоггүй тул Кавказ омгийн генетикийн шинж тэмдэг болгон ашиглаж болно.
5. Тарваган тахал үүсгэгчийг төрөл зүйл дотор нь ангилах генетикийн схемийг бий болгохын тулд олж авсан өгөгдлийг ашиглах хэтийн төлөвийн үнэлгээ Бид судалгааны үр дүнд Y. pestis-ийг хуваахад ашигласан биохимийн шинж чанарыг өөр өөр илэрхийлэх генетикийн үндэслэлийг бий болгосон. омог нь дэд зүйл болон биоварт ордог. Энэхүү ажлын явцад тодорхойлогдсон napA, ssuA, araC, melB, iclR, argA, aroH, aroF, thiH, thiG генүүдийн хувьсах чадвар, glpD генийн өмнө нь тогтоогдсон хувьсах чадвар, түүнчлэн rhaS зохицуулалтын генийн хувьсах чадвар. рамноз опероны [Куклева нар, 2008] нь тахлын эмгэг төрүүлэгч омгийг биовар болон дэд зүйлд ангилах генетикийн схемийн үндэс болгон ашиглаж болно. Эдгээр генүүдийн дарааллыг харьцуулсан дүн шинжилгээнд үндэслэн бид Y. pestis-ийн үндсэн (эртний, дундад зууны, дорнын биоварууд) болон жижиг дэд зүйлүүдийн генетикийн онцлогийг тодорхойлсон (хүснэгт). Бид дифференциал биохимийн шинж чанарыг кодлодог генүүдийн нуклеотидын дарааллын хэлбэлзэл, түүнчлэн төрөл бүрийн өсөлтийн хүчин зүйлийн биосинтезийг ашиглан Y. pestis омгийн хувьслын хамаарлыг тодорхойлж, Mega 4.0, PHYLIP, Splits matrix4 ашиглан компьютерийн программуудыг ашиглан филогенетик модыг бий болгосон. аргууд: UPGMA , FitchMargulis жигнэсэн дундаж квадратууд, Kitch, Neighbor-Joining.
Хүснэгт. ОХУ-ын болон хөрш зэргэлдээ орнуудын байгалийн голомтоос гаралтай үндсэн болон бага дэд зүйлийн Y. pestis омгийн генетикийн шинж чанар.
Үндсэн p/v Зураг 7-оос үзэхэд сонгосон ДНХ-ийн зорилтуудыг ашиглах нь тахал, псевдосүрьеэгийн эмгэг төрүүлэгчдийн омгийг бүрэн ялгах, түүнчлэн Y. pestis омгийг зөвхөн биовар төдийгүй үндсэн болон жижиг дэд зүйлүүдэд хуваах, гэхдээ бас энэ эмгэг төрүүлэгчийн тусдаа дэд зүйлүүдэд.
Филогенетик өгөгдлийн дүн шинжилгээ нь тахлын микробын хувьслын хамгийн эртний салбар бол Кавказын дэд зүйлүүдийн омгууд бөгөөд өмнөх үеийн псевдосүрьеэгийн микробтой генетикийн хувьд хамгийн төстэй байдаг (Зураг 8) гэсэн таамаглалыг баталж байна.
Бусад бага зэргийн дэд зүйлүүд – Алтай, Гиссар, Улега нь филогенетикийн хувьд бие биентэйгээ ойрхон бөгөөд Y. pestis-ийн хувьслын өөр нэг эртний салбарыг бүрдүүлдэг.
Хятадын судлаачдын саяхан бие даасан биовар гэж тодорхойлохыг санал болгосон микротусын омгууд нь Алтай, Гиссарын дэд зүйлийн омгийн бүлэгт хамаарах бөгөөд тэдгээрийн төрөл зүйл болохыг бидний мэдээлэл харуулж байна.
Зураг 7. Үндсэн (эртний, дундад зууны, дорнод биоварууд) болон бага (Кавказ, Алтай, Гиссар, Үлэгэй) дэд зүйлийн Y. pestis омгийн дендрограмм (Mega 4.0 програм, арга: A - UPGMA ба B - Хөрш залгах) түүнчлэн Y. pseudotuberculosis-ийн омгууд.
Зураг 8. Y. pestis-ийн төрөл зүйл доторх хувьслын бүдүүвч Энэ ажилд хийгдсэн судалгаанууд нь тахал үүсгэгчийн молекул ангилал зүйг боловсруулах үндэс суурь болж байгаа бөгөөд түүний зорилго нь Y. pestis-ийн төрөл зүйлийн доторх бүрэн ангилал зүйг бий болгох явдал юм. тахлын нянгийн ялгаатай ач холбогдолтой микробиологи, биохимийн шинж чанарын генийн хэлбэлзэл.
ДҮГНЭЛТ
1. Байгалийн төрөл бүрийн тарваган тахлын голомтоос гаралтай байгалийн Y. pestis омгийн биохими, генетикийн шинж чанарыг иж бүрэн судалсны үндсэн дээр ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад эргэлдэж буй үндсэн дэд зүйлийн омгууд эртний болон дундад зууны үеийн биоварт хамаарах нь тогтоогдсон.2. Дифференциал биохимийн шинж чанар илэрхийлэгдэхгүй байгаа шалтгаан - ОХУ болон хөрш зэргэлдээ орнуудад тахлын байгалийн голомтод тусгаарлагдсан үндсэн дэд зүйлийн Y. pestis омгийн нитратын бууралт нь мутаци - нэг нуклеотидыг солих явдал юм. периплазмын нитрат редуктазын napA ген, Алтай, Гиссар дэд зүйлийн омог - перплазмын зөөвөрлөх уургийн ssuA генд нэг нуклеотидын оруулга.
3. Тарваган тахлын нянгийн үндсэн болон бага дэд зүйлийн омог дахь мелибиозын исгэх шинж чанар, изоцитрат лиазын нийлэгжилт өөр өөр илэрхийлэгдэх генетикийн үндсийг анх удаа тогтоов. Үндсэн дэд зүйлийн омог дисахаридын мелибиозыг исгэх чадваргүй байгаа нь галактозид нэвчилтийг кодлодог melB бүтцийн генийн дараалалд IS285 орсонтой холбоотой болохыг харуулсан. Тарваган тахлын нянгийн үндсэн дэд зүйл болох изоцитрат лиазын үүсгэгч нийлэгжилт нь iclR дарангуйлагч генийн 269-270-р байрлалд хоёр нуклеотид (+CC) оруулснаар үүсдэг нь тогтоогдсон.
4. Алтай, Гиссар дэд зүйлийн Y. pestis омгийн арабино-сөрөг байдлын шалтгаан нь энэ генийн 773-р байрлалд нэг гуанин нуклеотид орсны улмаас арабиноз опероны - araC-ийн зохицуулах генийн мутаци юм. .
5. Кавказын дэд зүйлийн Y. pestis омгийн ауксотрофийн генетикийн үндсийг анх удаа тогтоов. Аргинины ауксотроф нь argA генд IS100, фенилаланины хувьд 10 r.n оруулснаар үүсдэг болохыг тогтоожээ. aroG-д, тирозины хувьд – aro F-д IS100 оруулах замаар, В1 витамины хувьд – гуяндаа 13 bp-ээр, thiG-д тимин оруулах замаар.
6. Тарваган тахал үүсгэгчийн үндсэн (эртний, дундад зууны, дорнын биоварууд) болон бага дэд зүйлүүдийн онцлог генотипийг тодорхойлсон бөгөөд тэдгээрийн хэрэглээ нь Y. pestis-ийг төрөл зүйл дотроо ялгах боломжийг олгодог. Y. pestis омгийн төрөл зүйлийн доторх ангилалд зориулсан генетикийн схемийг бий болгоход олж авсан үр дүнг ашиглах хэтийн төлөвийг харуулав.
ЖАГСААЛТДИССЕРТАЦИЙН МАТЕРИАЛД СУУРИЛСАН БҮТЭЭЛҮҮД
1. Куклева Л.М., Ерошенко Г.А., Куклев В.Е., Краснов Я.М., Гусева Н.П., Одиноков Г.Н., Кутырев В.В. Үндсэн болон бага дэд зүйлийн тахлын эмгэг төрүүлэгчийн омгууд дахь rhaS генийн нуклеотидын бүрэн дарааллыг харьцуулах // Онцгой аюултай inf-ийн асуудал. – 2008. – Дугаар. 3 (97). – P. 38 – 42.2. Одиноков Г.Н., Ерошенко Г.А., Видяева Н.А., Краснов Я.М., Гусева Н.П., Кутырев В.В. Янз бүрийн дэд зүйлийн Yersinia pestis-ийн нойрны опероны генийн бүтэц, функциональ шинжилгээ // Ялангуяа аюултай inf-ийн асуудал. – 2008. – Дугаар. 4 (98). – P. 12 – 16.
3. Ерошенко Г.А., Куклева Л.М., Видяева Н.А., Одиноков Г.Н., Шавина Н.Ю., Кутырев В.В. Тарваган тахал үүсгэгчийн бага зэргийн дэд зүйлүүдийн генетик шинж чанар // Тусгаар улсуудын хамтын нөхөрлөлийн гишүүн орнуудын нутаг дэвсгэрт халдварт өвчинтэй тэмцэх дэлхийн стратегийг хэрэгжүүлэх орчин үеийн технологи. ТУХН-ийн гишүүн орнуудын Улс хоорондын шинжлэх ухаан, практикийн IX бага хурлын материал. – Волгоград, 2008. – P. 71 – 73.
4. Ерошенко Г.А., Видяева Н.А., Одиноков Г.Н., Куклева Л.М., Краснов Я.М., Гусева Н.М., Кутырев В.В. Төрөл бүрийн гаралтай Yersinia pestis омог дахь araC генийн бүтэц, үйл ажиллагааны шинжилгээ // Молекул. генетик, микробиол. болон вирусол. – 2009. – №3. – P. 36 – 40.
5. Куклева Л.М., Одиноков Г.Н., Ерошенко Г.А., Кутырев В.В. RhaS ба araC генийн хэлбэлзэлд үндэслэн үндсэн болон жижиг дэд зүйлийн Yersinia pestis омгийг ялгах нь // "Молекулын оношлогоо ба биоаюулгүй байдал" олон улсын VI бага хурлын материалын цуглуулга. М., 2009. – P. 124.
6. Ерошенко Г.А., Одиноков Г.Н., Куклева Л.М., Шавина Н.Ю., Краснов Я.М., Гусева Н.П., Кутырев В.В. NapA, aspA, rhaS, zwf, tcaB генүүдийн хувьсах локусууд нь Yersinia pestis омгийг генотиплэх үр дүнтэй ДНХ-ийн зорилтууд // Ялангуяа аюултай inf-ийн асуудал. – 2010. – Дугаар. 2 (104). – P. 57 – 59.
7. Одиноков Г.Н., Ерошенко Г.А. Үндсэн болон бага дэд зүйлийн Yersinia pestis омгийн биохимийн ялгах генетикийн онцлог // Мат.
шинжлэх ухааны - практик сургууль - conf. залуу эрдэмтэд, мэргэжилтнүүд Холбооны . хэрэглэгчийн эрх ашгийг хамгаалах, хүний сайн сайхны төлөөх хяналтын алба “Биологийн аюулгүй байдлыг хангах орчин үеийн технологи”, 2010 оны 5-р сарын 25-27, 289-291-р хуудас.
Формат 60 х 84 1/16 Лазер хэвлэх оффисын цаас Холбооны улсын байгууллагын РосНиПЧИ "микроб" физик, математикийн шинжлэх ухааны Саратов 2012 оны хэвлэлийн тоног төхөөрөмж дээр хэвлэсэн 1 Ажил нь Оренбург мужийн дээд мэргэжлийн боловсролын холбооны улсын төсвийн боловсролын байгууллагад хийгдсэн. Наносистемийн биохимийн физикийн шинжлэх ухаан, боловсролын төвийн их сургууль. Эрдэм шинжилгээний удирдагч: Бердинский Виталий Львович...”
« КУЛИКОВСКИЙ МАКСИМ СЕРГЕЕВИЧ ОРОСЫН ЕВРОП ХЭСЭГИЙН ЗАРИМ ШПАГНУУДЫН ДИАТОМ ЗАМАГ 03.00.05 – Ургамал судлал Уралдаанд ирүүлсэн диссертацийн хураангуйБиологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалсан Санкт-Петербург 2007 он 2 Уг ажлыг Дотоод усны биологийн хүрээлэнгийн нэрэмжит хүрээлэнд гүйцэтгэсэн. I.D. Папанин РАС Шинжлэх ухааны удирдагч, биологийн шинжлэх ухааны доктор Генкал Сергей Иванович Албан ёсны өрсөлдөгчид: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор, Трифонова Ирина Сергеевна Биологийн шинжлэх ухааны доктор...”
« СИЛАЧЕВ ДЕНИС НИКОЛАЕВИЧ ШИНЭ МЭДРИЙН ХАМГААЛАГЧДЫН ГОЛОМТОЙ ТАРХИНЫ ИШЕМИЙН ЗАГВАРЫН СУДАЛГАА 03.00.13 – физиологи Уралдаанд ирүүлсэн диссертацийн хураангуйбиологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалсан Москва - 2009 А.Н.-ийн нэрэмжит Физик-химийн биологийн судалгааны хүрээлэнгийн митохондрийн бүтэц, үйл ажиллагааны лабораторид уг ажлыг гүйцэтгэсэн. Белозерскийн нэрэмжит Москвагийн Улсын их сургууль. М.В. Ломоносов (тэргүүн - биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор Д.Б. Зоров), Москвагийн Улсын Их Сургуулийн биоинженер, биоинформатикийн факультетэд. М.В. Ломоносов (декан -..."
“Биологийн шинжлэх ухааны докторын зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй Санкт-Петербург - 2012 2 Энэхүү ажлыг ОХУ-ын ШУА-ийн Амьтан судлалын хүрээлэнгийн Холбооны улсын төсвийн хүрээлэнд гүйцэтгэсэн. Албан ёсны өрсөлдөгчид: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор. Медведев Сергей Глебович Доктор...”
« ХАЛИЕВА Анна Сергеевна ДЭЭД УРГАМЛЫН ӨРГӨХ ҮЙЛ ЯВЦ, ХҮНД НӨХЦӨЛИЙН ХӨРСИЙГ ФИТОРЕМЕДИАЦУУЛАХ ҮЙЛДВЭРТ БАЙНГИЙН СОРОНЗНЫ ТАЛБАЙ ба хэт ягаан туяаны НӨЛӨӨЛӨЛ.МЕТАЛ, ГАЗРЫН ГАЗРЫН БҮТЭЭГДЭХҮҮН Мэргэжил 03.02.08 – экологи (биологи) Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалах диссертацийн хураангуй Пенза - 2013 Энэ ажлыг Холбооны улсын төсвийн боловсролын дээд сургуулийн Энгельсийн нэрэмжит технологийн хүрээлэн (салбар) дээр гүйцэтгэсэн. Мэргэжлийн боловсрол Гагарины нэрэмжит Саратов улсын техникийн их сургууль Ю.А. дээр...”
« Калмыкова Ольга Геннадьевна БУРТИНСКАЯ ТАЛЫН (ОРЕНБУРГИЙН УЛСЫН Нөөц газар) ТАЛЫН УРГАМАЛЫН ТАРХАЛТЫН ЗАГВАР 03.00.16 – Экологи ХураангуйБиологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалах диссертаци Санкт-Петербург - 2008 ОХУ-ын ШУА-ийн Уралын салбарын Тал хээрийн хүрээлэнгийн био газар зүй, биологийн олон янз байдлын мониторингийн лабораторид гүйцэтгэсэн. Шинжлэх ухааны удирдагч: Биологийн шинжлэх ухааны доктор. Сафронова Ирина Николаевна Албан тушаалтан..."
« Астафьева Оксана Витальевна ГЛИЦИРРИЗА ГЛАБРА Л., АХИЛЛЕА МИКРАНТА УИЛЛЫН ХЭРЭГЛЭЭ. БА ХЕЛИЧРИСУМ АРЕНАРИУМ Л.БАктерийн эсрэг шинж чанар 01/03/06 - биотехнологи (бионанотехнологийг оруулаад) Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалах диссертацийн хураангуй Ставрополь - 2013 Уг ажлыг Астрахан хотын дээд мэргэжлийн боловсролын Холбооны улсын төсвийн боловсролын байгууллагад гүйцэтгэсэн...”
« HOANG THI MINH NGUET Цагаан шар буурцгийн дэлбээнээс уураг, нүүрс усны бүтээгдэхүүн гаргаж авах үйл явцын судалгаа Мэргэжил 03.00.23 – биотехнологиТехникийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй Москва 2009 Энэхүү ажлыг Оросын Хими-Технологийн Их Сургуулийн Биотехнологийн тэнхимд гүйцэтгэсэн. Д.И. Менделеев. Эрдэм шинжилгээний удирдагч: Химийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигч, дэд профессор Алла Альбертовна Красноштанова Албан ёсны өрсөлдөгчид: Доктор...”
« НОВОСЕЛОВ Сергей Владимирович Тиоредоксин ба глутаредоксин системийн шинэ тиол оксидоредуктазууд. Редокс тэнцвэрийг зохицуулахад тэдний үүрэгэс 03.00.04 – биохими 03.00.03 – молекул биологи Пущино, 2008 он Биологийн шинжлэх ухааны докторын зэрэг хамгаалсан диссертацийн АВСТРАТ 1 ОХУ-ын ШУА-ийн эсийн биофизикийн хүрээлэн, Пущино болон Небраскагийн их сургуульд гүйцэтгэсэн ажил. Линкольн (UNL), Биохимийн тэнхим, Линкольн, Небраска, АНУ-ын албан ёсны...”
« Виноградова Галина Юрьевна АЛЛИУМ РАМОСУМ Л. БА АЛЛИУМ SCHOENOPRASUM L. (FAMILY ALLIACEAE) ДАХЬ POLYEMBRIONY 03.00.05 – Ботаник диссертацийн хураангуйБиологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг олгох уралдаан Санкт-Петербург 2009 2 Энэхүү ажлыг Оросын ШУА-ийн нэрэмжит Ботаникийн хүрээлэнгийн хүрээлэнгийн үр хөврөл, нөхөн үржихүйн биологийн лабораторид гүйцэтгэсэн. В.Л. Комарова RAS-ийн шинжлэх ухааны удирдагч Биологийн шинжлэх ухааны доктор, RAS-ийн корреспондент гишүүн Батыгина Т.Б. Албан ёсны..."
« Волкович Марк Габриелевич POLYCESTINAE дэд овгийн цох хорхойнууд (COLEOPTERA, BUPRESTIDAE): МОРФОЛОГИ, ФИЛОГЕНИ, АНГИЛАЛ 02/03/05 – энтомологиБиологийн шинжлэх ухааны докторын зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй Санкт-Петербург - 2012 2 Энэхүү ажлыг ОХУ-ын ШУА-ийн Амьтан судлалын хүрээлэнгийн Холбооны улсын төсвийн хүрээлэнгийн шавьжны ангилал зүйн лабораторид гүйцэтгэсэн. Албан ёсны өрсөлдөгчид: Доктор Биологийн шинжлэх ухаан, профессор,...”
« Торгашина Ирина Геннадьевна ЭКОЛОГИЙН БИОЛЮМИНЕСЦЕНТИЙН ШИНЖИЛГЭЭНИЙ ХӨДӨЛГӨӨГҮЙ ФЕРМЕНТИЙН УРВАЛЖИЙН МЭДРЭМЖИЙН СУДАЛГАА 03.00.16 –экологи Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй Красноярск - 2007 Энэ ажлыг Сибирийн Холбооны Улсын Их Сургуулийн Шинжлэх ухааны дээд мэргэжлийн боловсролын Холбооны Улсын боловсролын байгууллагын Байгаль, хүмүүнлэгийн хүрээлэнгийн биофизикийн тэнхимд гүйцэтгэсэн. удирдагч: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор Кратасюк Валентина Александровна...”
« МАЙЕР НИКОЛАЙ КОНСТАНТИНОВИЧ ТРИТИФИКИЙН ҮНДЭС ДЭЭР ТАРАА НИЙТЛЭХИЙГ ЭСЭРГҮҮЦЭХ МОЛЕКУЛАР ГЕНЕТИК МАРКЕРИЙН ХЭРЭГЛЭЭ Мэргэжил: 02/03/07 –генетик, 01/03/06 – биотехнологи (бионанотехнологийг оруулаад) Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалах диссертацийн хураангуй Москва 2011 Уг ажлыг генетик, биотехнологийн тэнхим, молекул биотехнологийн шинжлэх ухаан, боловсролын төвд гүйцэтгэсэн. Оросын улсын хөдөө аж ахуйн ... "
« Эрдэм шинжилгээний удирдагч: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор Борис Иванович Колупаев Албан ёсны өрсөлдөгчид: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, ЕЛЕНА ПУЗАТКИНААЛЕКСАНДРОВНА Профессор Соколина Флюра Мухаметгалеевна; Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор Роза Яхиевна Дыганова Тэргүүлэх байгууллага: Нижний Новгородын Улсын Их Сургуулийн нэрэмжит. Н.И.Лобачевскийн НӨЛӨӨ...”
« Смирнова Людмила Олеговна Овъёосны генийн олон янз байдал ФОТОПЕРИОДЫН МЭДРЭМЖИЙН БА эрт боловсорч гүйцсэн байдал Мэргэжилтнүүд: 01/06/05 – сонголт бахөдөө аж ахуйн ургамлын үрийн үйлдвэрлэл, 01/03/05 – ургамлын физиологи, биохими Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй, Санкт-Петербург 2011 Диссертацийн ажлыг овъёос, хөх тариа, үр тарианы генетик нөөцийн хэлтэст гүйцэтгэсэн. арвай, Бүх Оросын ургамлын физиологийн тэнхим...” гэж бичжээ.
« Безжонова Оксана Владимировна Орос болон хөрш зэргэлдээ орнуудад Anopheles (Diptera, Culicidae) овгийн цус сорох шумуулын зүйлийн цогцолборууд Мэргэжил 02/03/05 –энтомологи ба 02/03/07 - генетик Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн эрдмийн зэрэг хамгаалсан диссертацийн АВСТРАТ МОСКВА - 2011 Ажил нь М.В. Ломоносов болон тус байгууллагын Малын харьцуулсан генетикийн лабораторид...” гэж бичжээ.
« РАХИМОВ Илгизар Ильясович БАЙГАЛИЙН ГАЗРЫН АНТРОПОГЕНИЙН ӨӨРЧЛӨЛТИЙН НӨХЦӨЛД ДУНД Ижил мөрний бүсийн АВИФАУНА Мэргэжил 03.00.16 -экологи Биологийн шинжлэх ухааны докторын зэрэг хамгаалсан диссертацийн хураангуй Москва - 2002 Ажил нь Москвагийн Багшийн Улсын Их Сургуулийн Биологи-химийн факультетийн Амьтан судлал, экологийн тэнхимд хийгдсэн Эрдэм шинжилгээний зөвлөх: Биологийн шинжлэх ухааны доктор, профессор. В.М.Константинов..."
« САЛАХОВА ГУЛЬНАРА МИРЗАЛИФОВНА ГАЗРЫН ГАЗРЫН БОХИРДУУЛАЛТ, НӨХӨН СӨНГӨЛӨЛТИЙН НӨХЦӨЛИЙН УРГАМАЛ, ҮНДСЭН БӨЛБӨРИЙН МИРОБИОТЫН ЭКОЛОГИ, ФИЗИОЛОГИЙН ҮЗҮҮЛЭЛТИЙН ӨӨРЧЛӨЛТХӨРС Мэргэжил 03.00.16 - Экологи 03.00.12 - Ургамлын физиологи, биохими Биологийн шинжлэх ухааны нэр дэвшигчийн зэрэг хамгаалах диссертацийн хураангуй Уфа - 2007 Энэ ажлыг Улсын дээд боловсролын байгууллагын биохими, биотехнологийн тэнхимд гүйцэтгэсэн. Мэргэжлийн боловсрол Башкир...”
