L’ébullition des solutions enzymatiques provoque l’inactivation de leur biochimie. Inactivation des enzymes sous l'influence de l'oxygène

La quantité d'enzyme présente dans les tissus à un moment donné est déterminée par les taux relatifs de sa synthèse et de sa dégradation, ainsi que par les concentrations de divers types d'inhibiteurs et d'activateurs. En règle générale, la dégradation des enzymes et la diminution de leur quantité dans le milieu se produisent lentement. L'inhibition et l'activation des enzymes peuvent être réalisées assez rapidement, en quelques secondes.

Il existe de nombreuses méthodes pour déterminer et exprimer l’activité d’enzymes individuelles. Cela est dû à la diversité des enzymes, à la présence et à l'utilisation de divers substrats pour déterminer leur activité.

L'Union biochimique internationale a proposé la définition suivante d'une unité enzymatique : " Une unité d'une enzyme est considérée comme la quantité qui catalyse la conversion d'une micromole de substrat par minute dans des conditions standard données. ». Le nombre de micromoles sera égal au nombre d'unités standards . La Commission internationale a suggéré, si possible, que l'activité enzymatique soit déterminée à 30 °C et à des valeurs de pH et des concentrations de substrat optimales pour l'activité enzymatique.

Sont communs propriétés des enzymes écouler de par leur nature protéique . Enzymes thermolabile, leur activité dépend du pH et de l'humidité , dans lequel ils opèrent, ainsi que de influence des activateurs et des inhibiteurs .

Lorsque la température atteint certaines limites, l'activité enzymatique augmente. Lorsque la température optimale pour l’enzyme est atteinte, son activité catalytique est à son maximum. La température optimale pour de nombreuses enzymes se situe le plus souvent à entre 40 et 50 °C (la température optimale pour les enzymes végétales est de 50 à 60 °C et pour les enzymes d'origine animale de 40 à 50 °C). Cependant, la température optimale n'est pas strictement constante et dépend de nombreuses raisons, et notamment de la durée de chauffage. Plus l’action de l’enzyme est longue, plus la température optimale doit être basse. .

Dans la plage de température de 0 à 50 °C, avec une augmentation ou une diminution de la température tous les 10 °C, l'activité enzymatique augmente ou diminue, respectivement, de 1,4 à 2 fois. Avec un chauffage supplémentaire, l'activité enzymatique diminue et à 80 – 100 °C, les enzymes perdent généralement complètement leurs propriétés catalytiques en raison de la dénaturation des protéines .

La température d'inactivation (perte d'activité) est différente pour différentes enzymes. Ainsi, l'inactivation de l'enzyme amylase en solution se produit à 70 °C, la sucrase - à 59 °C, la trypsine et la pepsine - à 65 °C. À l’état sec, les enzymes peuvent tolérer un chauffage à des températures plus élevées. Mais à des températures très élevées, l’inactivation des enzymes se produit instantanément. La pasteurisation, la stérilisation, le blanchiment et l'ébullition détruisent les enzymes .

Après inactivation thermique, certaines enzymes rétablissent leur activité catalytique. Un exemple est la peroxydase qui, même chauffée pendant 60 s à 150 °C, ne perd pas complètement ses propriétés catalytiques. La peroxydase est donc considérée comme l’enzyme la plus thermostable.

À des températures inférieures à 0 °C, l'activité catalytique des enzymes diminue fortement, mais reste maintenue même lorsque les aliments sont congelés.

La réaction de l'environnement a un impact significatif sur l'activité catalytique des enzymes. Les enzymes modifient leur solubilité, leur pression osmotique, leur viscosité et d'autres propriétés sous l'influence du pH de l'environnement. On pense que les changements d'activité enzymatique en fonction du pH de l'environnement sont associés à des changements ionisation enzymes, substrat ou complexe enzyme-substrat .

Les enzymes ne présentent une activité optimale que dans certaines limites de pH qui leur sont inhérentes.. Ainsi, la pepsine, qui est libérée dans le milieu très acide de l'estomac, présente un optimum d'activité à pH 1,5 et 2,5. Dans le même temps, les protéases sécrétées par le pancréas dans le duodénum ont une activité optimale dans la zone de pH alcalin et l'action optimale de la trypsine se situe dans la plage de pH de 8 à 9. À une valeur de pH supérieure ou inférieure à l'optimum, l'activité enzymatique diminue .

La plupart des enzymes sont plus actives dans des environnements neutres, légèrement alcalins ou légèrement acides. À mesure que la valeur du pH passe d’optimale à acide ou alcaline, l’activité enzymatique diminue.

Activateurs et inhibiteurs(paralysants) des enzymes peuvent ainsi renforcer ou affaiblir et même arrêter leur activité. Activateurs les enzymes sont des ions métalliques : Na + , K + , Rb + , Mg 2+ , Ca 2+ , Cu 2+ , Fe 2+ et composés contenant des groupes sulfhydryle : SH, HCN, H 2 S . La présence de ces métaux ou composés dans une solution à une certaine concentration contribue à la manifestation de la pleine activité de certaines enzymes.

Toutes les enzymes sont susceptibles d'être inhibées en raison de la dénaturation ou de la destruction de la protéine enzymatique..

L'essence de l'action des inhibiteurs dans la plupart des cas est qu'ils se combinent avec des groupes actifs ou des centres actifs de la molécule enzymatique. Distinguer inhibiteurs généraux et spécifiques . À inhibiteurs généraux lequel inhiber l'action de toutes les enzymes , inclure sels de métaux lourds (plomb, argent, mercure), acide trichloroacétique et tanin . Souvent, l'inhibition ou l'arrêt de l'action des enzymes sous l'influence de métaux lourds est réversible, et si des substances qui forment des composés avec ces métaux sont ajoutées au milieu, l'activité des enzymes est restaurée.

Inhibiteurs spécifiques n'agissent que sur certaines enzymes. Ainsi, l'acide cyanhydrique n'agit que sur les enzymes oxydatives contenant du fer ou du cuivre dans le centre actif. L'acide cyanhydrique se combine avec les métaux et l'enzyme perd son activité.

Dans une cellule vivante, la régulation de l'action des enzymes s'effectue non seulement à l'aide d'activateurs et d'inhibiteurs spécifiques, mais également en liant les enzymes à diverses structures colloïdales du protoplasme. Cette liaison des enzymes entraîne leur perte d'activité. La libération de l'enzyme du composé restaure à nouveau son activité catalytique.

Enzymes inactivé à très haute pression . Cependant, une fois la pression supprimée, les enzymes rétablissent leur activité catalytique.

L'action des enzymes est fortement ralentie dans les aliments secs, mais ne s'arrête pas complètement. Les résultats de l'activité enzymatique peuvent se manifester par des changements dans la qualité du produit - son noircissement, sa détérioration de l'arôme, de son goût, de sa consistance, etc.

La vitesse de la plupart des réactions enzymatiques est proportionnelle à la concentration de l’enzyme, du moins dans les premiers stades. Au-delà des étapes initiales, la vitesse des réactions enzymatiques diminue.

L'enzyme forme un complexe avec le substrat, qui se dissocie en enzyme libre et en produit de réaction final :

où E est l'enzyme ; S – substrat ; ES – complexe enzyme-substrat ; P – produit final.

La quantité de substrat est très importante par rapport à la quantité d’enzyme et, par conséquent, la concentration du substrat influence grandement la vitesse des réactions enzymatiques. Si le substrat est contenu en excès significatif, alors la quantité de produit formée est proportionnelle au temps. À mesure que la concentration du substrat diminue, la quantité de produit final (P) formée par unité de temps diminue.

La présence d'une enzyme dans une solution se juge par son action. Ainsi, la présence d'amylase dans la salive peut être jugée par la capacité de la salive à saccharifier l'amidon, la présence de pepsine gastrique - par sa capacité à dissoudre le blanc d'œuf ou la fibrine à une vitesse suffisante.

En régulant l'activité des enzymes en créant un environnement de réaction approprié, vous pouvez contrôler la vitesse des réactions qu'elles catalysent, ainsi que l'activité des enzymes contenues dans les produits alimentaires, ce qui permet d'effectuer des mesures de stockage des céréales, des pommes de terre. , fruits et légumes, la production d'un certain nombre de produits (vin, thé, etc. .).

Nomenclature et classification des enzymes

Dans la période initiale de développement de l'étude des enzymes, on leur donnait des noms sans système spécifique, basé sur des caractéristiques aléatoires, le nom du substrat ou le type de réaction catalysée. Ainsi, l'enzyme pepsine tire son nom du mot grec « pepsis » - je digère, papaïne - du jus de la papaye, riche en enzyme. Il est arrivé que des auteurs individuels donnent des noms différents à la même enzyme.

Dans le cadre du développement rapide de la science des enzymes - la fermentologie, en 1961, le comité permanent des enzymes de l'Union biochimique internationale a développé une nomenclature et une classification modernes des enzymes. Conformément à cette classification, le nom de l'enzyme était composé du nom chimique du substrat et du nom de la réaction réalisée par l'enzyme. Au nom latin de la racine du substrat sur lequel agit l'enzyme (saccharose - saccharase), ou au nom du processus catalysé par cette enzyme (hydrolyse - hydrolases), fin ajoutée"aza". Outre les nouveaux noms de nombreuses enzymes, d'anciens noms bien établis dans la littérature scientifique (pepsine, trypsine, papaïne, etc.) ont été conservés.

Selon la classification moderne, toutes les enzymes sont divisées en six Des classes: les oxydoréductases; transferts; les hydrolases ; lyases; les isomérases; ligases (synthétases) . La classification des enzymes repose sur la nature de leur action.

Chaque classe est divisée en sous-classes et chaque sous-classe est divisée en groupes.

Oxydoréductases

Ce sont des enzymes qui catalysent Réactions redox qui se produisent dans les organismes vivants. Les réactions d'oxydation des substances dans les organismes sont toujours accompagnées de réactions de réduction. Les oxydoréductases sont divisées en 14 sous-classes (la classe d'enzymes la plus étendue).

L'oxydation se produit comme le processus d'élimination de l'hydrogène (électrons) du substrat, et la réduction se produit comme l'ajout d'atomes d'hydrogène (électrons) à l'accepteur. Cette réaction peut être schématiquement représentée comme suit :

AN 2 + B = A + VN 2,

où AN 2 est une substance qui cède son hydrogène et est appelée donneur ; B est une substance qui élimine l’hydrogène et est appelée accepteur.

Diverses substances peuvent subir une oxydation : glucides, graisses, protéines, acides aminés, vitamines, etc.

Le rôle des oxydoréductases dans les tissus vivants est assuré par de nombreux groupes déshydrogénases Et oxydases , qui sont nommés en fonction du substrat qu'ils oxydent. Ainsi, l'enzyme qui déshydrate l'acide malique est appelée malate déshydrogénase, l'enzyme qui déshydrogéne l'alcool éthylique est appelée alcool déshydrogénase, etc.

Dans la classe des oxydoréductases, les principales sont les déshydrogénases, qui réalisent la réaction de déshydrogénation. Toutes les déshydrogénases sont divisées en deux groupes : anaérobies et aérobies, appelées oxydases .

Déshydrogénases anaérobies sont des enzymes spécifiques qui catalysent captage d'hydrogène de certains produits chimiques et en le transmettant à d'autres enzymes - porteurs d'hydrogène. Ces déshydrogénases sont des enzymes à deux composants dans lesquelles le coenzyme se sépare facilement de la partie protéique. En tant que coenzyme Les déshydrogénases anaérobies peuvent contenir deux substances : le nucléotide nicotine amide adénine ( AU-DESSUS DE ) ou phosphate de nucléotide amide adéline de nicotine ( PNDA ). Ces deux substances ont des propriétés redox réactives exceptionnellement élevées.

Il existe de nombreuses déshydrogénases anaérobies connues qui catalysent l'oxydation de divers composés organiques. Ainsi, la lactate déshydrogénase catalyse l'oxydation de l'acide lactique en acide pyruvique, l'isocitrate déshydrogénase - l'oxydation de l'acide isocitrique en acide oxalique-succinique.

Au groupe déshydrogénases aérobies (oxydases) inclure des enzymes qui contiennent comme coenzyme inclus vitamine B2 , (riboflavine ), c'est pourquoi ces enzymes sont appelées flavine . Les enzymes flavines sont capables d'éliminer l'hydrogène de la substance en cours d'oxydation et de le transférer à d'autres composés ou à l'oxygène de l'air :

2H 2 O 2 → 2H 2 O + O 2.

En prenant l'hydrogène de la substance en cours d'oxydation et en le transférant à l'oxygène de l'air, l'oxydase peut former de l'eau ou du peroxyde d'hydrogène (H 2 O ou H 2 O 2). Ce groupe d'enzymes comprend la polyphénol oxydase, l'ascorbate oxydase et la glucose oxydase.

Polyphénol oxydase est une déshydrogénase aérobie pour laquelle L'accepteur d'hydrogène est de l'oxygène gazeux .

Il agit sur les o-diphénols, les polyphénols, les tanins et la tyrosine. La polyphénol oxydase est largement distribuée dans les champignons et les plantes supérieures, notamment dans les feuilles de thé vert. L'action de la polyphénol oxydase explique le noircissement de la chair coupée des fruits et légumes, des pommes de terre, ainsi que le noircissement des feuilles de thé fraîches lorsqu'elles sont roulées. La polyphénol oxydase joue un rôle important en tant qu'intermédiaire dans la respiration des plantes.

Enzyme peroxydase avec la polyphénol oxydase et la cytochrome oxydase, il participe activement aux processus de respiration des plantes et aux réactions de défense des plantes contre les micro-organismes pathogènes des plantes.

Le groupe actif de la peroxydase contient fer . Utilisation de l'enzyme peroxydase à cause du peroxyde d'hydrogène et certains autres peroxydes organiques, une oxydation des composés organiques se produit. La peroxydase forme un composé organique complexe, à la suite duquel le peroxyde est activé et acquiert la capacité d'agir comme un accepteur d'hydrogène :

De nombreux composés organiques réagissent avec l’oxygène atmosphérique et forment des peroxydes. Les peroxydes se forment particulièrement facilement lorsque des composés comportant des liaisons insaturées sont oxydés par l'oxygène atmosphérique : caroténoïdes, acides gras insaturés et certains hydrocarbures.

Enzyme catalase catalyse le processus de division du peroxyde d'hydrogène en eau et oxygène :

La molécule de catalase, comme la peroxydase, contient fer . L'objectif principal de la catalase dans le corps est de détruire le peroxyde d'hydrogène, nocif pour les cellules, formé lors de la respiration.

Enzyme lipoxygénase catalyse la formation de peroxydes et d'hydroperoxydes lors de la détérioration oxydative des graisses.

Comme on peut le voir sur la Fig. 46, pour la plupart des systèmes, il est possible d'identifier une période de temps pendant laquelle le taux de défaillance est constant :

λ(t) = λ = const.

Si le taux de défaillance sur une période de temps donnée est constant et n'est pas fonction du temps, alors selon l'équation (3.64), la fonction de fiabilité a la forme

P(t) = e -λt . (3,70)

Cette loi exponentielle est très largement utilisée en théorie de la fiabilité.

Évidemment, le danger d'échec λ dans ce cas a la signification de la constante du taux d'inactivation de l'enzyme k et est associé à un certain processus physico-chimique dans le centre actif de l'enzyme, conduisant à la perte de l'activité catalytique.

Ainsi, l'exposant dans l'équation (3.70) permet deux interprétations. Du point de vue de la cinétique chimique, il s'agit de la constante de vitesse de la réaction monomoléculaire de conversion de l'enzyme E en la forme inactive E i ; en termes de théorie de la fiabilité, c'est le taux d'échec. Il est évident que dans leur signification physique, ces concepts sont équivalents et représentent la fréquence des actes élémentaires d'inactivation des molécules enzymatiques.

Le temps statistique moyen de fonctionnement de toutes les molécules d'un catalyseur inactivées selon la loi exponentielle est égal à

T 0 = 1/k. (3,71)

L'application de la théorie de la fiabilité permet de tirer très facilement un certain nombre de conclusions qualitatives importantes sur les modèles cinétiques d'inactivation de systèmes multienzymatiques complexes. Les travaux examinent les modèles cinétiques d'inactivation des systèmes multienzymatiques en supposant que chaque enzyme est inactivée selon une loi exponentielle.

Considérons un système multienzymatique avec la participation de n enzymes inactivées selon une loi exponentielle. Pour les systèmes multienzymatiques qui convertissent le substrat initial en produit de réaction final, l'inactivation de l'une des enzymes entraîne la perte de la fonction catalytique de l'ensemble du système. Si les enzymes sont inactivées indépendamment les unes des autres, la probabilité de fonctionnement sans panne de l'ensemble du système dans son ensemble sera égale au produit des probabilités de fonctionnement sans panne de chaque enzyme de la chaîne séparément. La fonction de fiabilité a la forme

P(t) = P 1 (t) ... P je ... P n (t).(3.72)

Si l'inactivation de chaque enzyme se produit avec intensité

P i (t) = e -λ i t , (3.73)

la substitution de l'équation (3.73) dans l'équation (3.72) conduit à la fonction

La durée moyenne de fonctionnement sera

(3.75)

La plus grande contribution à la somme (le dénominateur de cette équation) est apportée par les processus cinétiques d'inactivation les plus rapides et, par conséquent, le fonctionnement moyen sans défaillance des systèmes multienzymatiques est déterminé par la stabilité des protéines les plus labiles. Si la chaîne enzymatique contient une protéine labile qui s'inactive plus rapidement que les autres protéines du système multienzymatique, l'inactivation de cette enzyme particulière se manifestera par la cinétique d'inactivation de l'ensemble du système.

Considérons un système d'enzymes travaillant en parallèle, catalysant la même réaction et s'inactivant à des rythmes différents. Dans le cas d'un nombre arbitraire de fractions enzymatiques différant en activité et en stabilité, l'analyse de la fonction de fiabilité correspondante conduit à l'équation

(3.76)

où a j, λ j sont respectivement les activités initiales et les constantes de taux d'inactivation de chaque fraction enzymatique ; Et 0 est la somme des activités initiales ou l'activité catalytique enregistrée du système à l'instant initial.

Il est important de noter que le fonctionnement moyen sans défaillance d’un système d’enzymes fonctionnant en parallèle est déterminé par la fraction enzymatique la plus active (le plus grand a j) ou la plus stable (le plus petit λ j). Cela distingue ce système d'un système de catalyseurs fonctionnant de manière séquentielle, dans lequel la fiabilité est déterminée par la protéine la plus labile.

Les enzymes, réunies en systèmes et effectuant une chaîne de transformations séquentielles de substrats, ont généralement une résistance différente aux influences inactivantes. De ce fait, lors du processus d'inactivation du système multienzymatique, un changement dans l'étape limitante peut se produire. Imaginons que l'enzyme qui travaille le plus lentement, dont la vitesse de réaction détermine l'activité de l'ensemble du système, soit assez stable. De plus, si l'une des enzymes de la chaîne perd rapidement son activité, une situation se présente où la vitesse du processus est déterminée par l'activité de cette enzyme particulière et la plus labile. Ainsi, à mesure que le système est inactivé, le stade limite change. Cela devrait affecter la cinétique d’inactivation.

Considérons une chaîne multienzymatique linéaire. Selon l'analyse, dans certaines conditions, le taux d'équilibre d'un processus impliquant n enzymes est décrit par l'équation

(3.77)

où [S] 0 est la concentration initiale du premier substrat ; υ i, K i - vitesse maximale et constante de Michaelis de chaque section de la chaîne. Considérons le cas où il y a deux enzymes dans la chaîne qui ont des paramètres cinétiques maximaux et comparables K i /υ i . Si les valeurs du paramètre K i /υ i pour les enzymes restantes de la chaîne sont nettement inférieures à la valeur de ce paramètre pour deux enzymes, l'équation du taux stationnaire aura la forme

(3.78)

où les indices i et j caractérisent les paramètres de chaque enzyme.

Supposons que l'inactivation des deux enzymes se produit selon une loi exponentielle, c'est-à-dire que chaque enzyme est inactivée avec un taux d'échec λ i et λ j constant dans le temps. La fonction de fiabilité a la forme

(3.79)

où A je = k chat, je 0 .

Le comportement cinétique du système pendant le processus d'inactivation est déterminé par le rapport des paramètres cinétiques

(3.80)

et la différence dans les taux d'échec des deux enzymes. Considérons les trois cas particuliers les plus importants :

1. Les taux de défaillance des deux enzymes de la chaîne sont égaux.

λ je = λ j (3,81)

La fonction de fiabilité a la forme

P(t) = e -λ je t .(3,82)

La cinétique du processus est déterminée par le taux de défaillance de l'une des enzymes, quelle que soit l'enzyme qui limite la vitesse de la réaction multienzymatique. C'est le cas le plus simple.

2. Le processus est limité par l'enzyme j de la chaîne, qui est inactivée beaucoup plus rapidement que les autres. Cela remplit les conditions

α = (A i /K i)/(A j /K j) >> 1 ; λi

La fonction de fiabilité est donnée par l'équation

P(t) = e -λ j t . (3,84)

La cinétique d'inactivation du système est exponentielle. La fiabilité et la durée de fonctionnement moyenne du système sont déterminées par le taux de défaillance de l'enzyme limitante.

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INSTITUT VÉTÉRINAIRE DE LVIV

Cet article présente les résultats d'une étude comparative de l'activité de l'adénosine triphosphatase, de la phosphohexoisomérase, de la phosphoglucomutase, de l'aldolase et de la fructose-1,6-biphosphatase dans le sperme de taureau et de verrat, ainsi que l'influence du régime d'exploitation sexuelle des producteurs sur l'activité. des enzymes étudiées.

La répartition des enzymes entre les cellules germinales et le plasma n’est pas non plus la même.<...>Cette enzyme se trouve dans le sperme des deux espèces animales.<...>(L'enzyme P a diminué.<...>Teneur élevée en enzyme ATPase en 10.<...>L'effet de l'insuline sur l'activité de certaines enzymes du sperme de taureau.

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IDENTIFICATION ET QUELQUES CARACTÉRISTIQUES DU COMPLEXE PROTÉOLYTIQUE DES ACTINOMYCÈTES ABSTRAIT DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

Objectifs du travail. Ce travail est consacré à l'étude de certaines caractéristiques du complexe protéolytique des actinomycètes

.; :,"Ces enzymes jouent un rôle régulateur essentiel dans la coordination du chiffre d'affaires (décomposition £r=5 synthèse<...>";. "Les sources d'enzymes sont des oligooïdes ""v7 ;>^ ".;"." -" .<...>La purification préliminaire du complexe enzymatique faisant bouillir le lait a été réalisée selon la méthode généralement acceptée<...>La valeur pH optimale pour la manifestation de ".-. : activité enzymatique. . . " " " " " ".<...>les ateliers d'actinomie-.;..^, comme les enzymes similaires d'autres micro-organismes, avaient des intervalles plus larges

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ACTIVITÉ BIOLOGIQUE DES SOLS SODD-PODZOL ET SON CHANGEMENT SOUS L'INFLUENCE DE MÉLANGES MINÉRAUX DE TOURBE RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES AGRICOLES

ORDRE BÉLARUSIEN DE LA BANNIÈRE ROUGE DE L'ACADÉMIE AGRICOLE DU TRAVAIL

ACTIVITÉ BIOLOGIQUE DES SOLS SODD-PODZOL ET SON CHANGEMENT SOUS L'INFLUENCE DE MÉLANGES MINÉRAUX DE TOURBE

Dépendance de l'activité enzymatique du sol aux conditions environnementales L'activité enzymatique dépend d'un certain nombre de facteurs<...>C’est là que se manifeste l’une des propriétés caractéristiques des enzymes : la labilité.<...>Cependant, si pour les enzymes du corps ces dépendances sont tout à fait claires, alors pour les enzymes du sol<...>Les conditions environnementales ont un impact significatif sur l’activité enzymatique du sol.<...>Au contraire, une diminution de l'humidité du sol entraîne une diminution de l'activité de ses enzymes.

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JUSTIFICATION PHYSIOLOGIQUE DE LA COMBINAISON DE L'ALIMENTATION FOLIAIRE DES PLANTES AGRICOLES AVEC LEUR DÉSHERBAGE CHIMIQUE (SUR L'EXEMPLE DU MAÏS ET DU MIL) RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

Nous avons tenté d'étudier les bases physiologiques de la combinaison de l'alimentation foliaire des plantes agricoles avec leur désherbage chimique en lien étroit avec les problématiques de biochimie, de biophysique et de culture végétale. Cette thèse est consacrée à la théorie et à la pratique de l'utilisation conjointe d'engrais minéraux et d'herbicides dans les cultures de maïs et de mil.

13,9 14,8 L « 100 135,1 143,3 152,6 Les expériences ont également montré une augmentation de l'activité d'autres enzymes respiratoires<...>Dans nos expériences, l'intensité de la respiration correspondait, en règle générale, à l'activité des enzymes oxydatives<...>À l'avenir, l'activité de ces enzymes augmente : Ajout d'engrais azoté à la solution herbicide<...>adoucit l'effet initiateur de l'acide 2,4-dichlorophénoxyacétique sur l'activité des enzymes oxydatives<...>les plantes : "échange d'eau, photosynthèse, synthèse de phytochromes, respiration et activité de certaines enzymes oxydatives

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QUELQUES INDICATEURS DU METABOLISME DES HYDRATES DE GLUCIDES CHEZ LES POULETS EN FONCTION DE L'ÂGE ET DE L'ÉTAT PHYSIOLOGIQUE DU CORPS RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

INSTITUT VÉTÉRINAIRE DE KHARKIV

Cet article présente les résultats d'études sur certains aspects du métabolisme des glucides chez les poulets blancs russes à la fin de l'embryogenèse et pendant une période relativement longue de leur ontogenèse postnatale.

Dynamique liée à l'âge de la teneur en principaux métabolites glucidiques et de l'activité des enzymes glucidiques<...>Le métabolisme des glucides dans l'oviducte, ainsi que l'activité des enzymes correspondantes dans<...>L'activité enzymatique a été exprimée en µg de phosphore pour 100 mg de tissu.<...>Ainsi, au cours de l’embryogenèse, l’activité enzymatique est relativement faible.<...>C'est connu. que cette enzyme joue également un rôle dans la synthèse du glycogène./. .

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MÉTHODES D'IMMUNISATION CHIMIQUE DU TABAC CONTRE LA POURRITURE NOIRE DES RACINES RÉSUMÉ DE DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

ORDRE DE KHARKIV DE LA BANNIÈRE ROUGE DE L'INSTITUT AGRICOLE DU TRAVAIL NOMME D'APRÈS V. V. DOKUCHAEV

PROCÉDÉS D'IMMUNISATION CHIMIQUE DU TABAC CONTRE LA POURRITURE NOIRE DES RACINES

Le traitement avant le semis active les enzymes VV des plantes, ce qui a un effet positif sur le flux de<...>Lorsqu'elle est affectée par la pourriture noire des racines, il y a une modification de l'activité des enzymes respiratoires des plantes.

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GLYCOGÈNE PHOSPHORYLASE MUSCULAIRE DE LAPIN - STRUCTURE QUATERNAIRE ET PROPRIÉTÉS RÉGLEMENTAIRES RÉSUMÉ DIS. ... DOCTEUR EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : ORDRE DE LÉNINE INSTITUT DE BIOCHIMIE NOMME D'APRÈS A. N. BACH

La présente étude avait principalement les objectifs suivants. 1. Etude des conditions de dissociation des phosphorylases B et A des muscles du lapin en sous-unités afin d'obtenir des informations complémentaires sur la structure quaternaire de l'enzyme, les propriétés des sous-unités et la nature des connexions entre elles. 2. Clarifier la question de la participation du pyridoxal-5-phosphate au maintien de la structure quaternaire de la phosphorylase.

La phosphorylase appartient à la classe des enzymes régulatrices de structure "... quaternaire".<...>Cela peut s'expliquer par l'effet spécifique de la cystéine sur la structure de l'enzyme.<...>Le troisième type de couches s'observe principalement sur les préparations enzymatiques préparées à base de betterave.<...>Activité optique induite de certaines enzymes pyridoxales.<...>Modification chimique des enzymes comme l'un des moyens de réguler leur activité.

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Une étude a été réalisée sur la cinétique d'inactivation thermique de la glutathion peroxydase de type I, une enzyme qui joue un rôle clé dans le système de défense antioxydant de l'organisme. Il a été démontré qu'à une température de 37°C, la glutathion peroxydase oligomère est inactivée par un mécanisme monomoléculaire. Une méthode efficace de stabilisation de l'enzyme utilisant des polyélectrolytes de nature différente a été proposée.

C'est à cette valeur de pH que les modèles cinétiques d'inactivation enzymatique ont été étudiés, ce qui<...> <...>Il a été établi qu'en présence d'excès de 1, 10 et 100 fois des polymères ci-dessus, l'inactivation de l'enzyme<...> <...>

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ÉTUDE DU MÉCANISME D'INACTIVATION PHOTODYNAMIQUE DES ENZYMES RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

Le but de cette étude était de tester expérimentalement cette hypothèse, de prouver l'existence de dommages cachés au substrat protéique lors de la PDE, d'étudier leur nature et leur contribution aux dommages globaux, ainsi que d'étudier l'efficacité des dommages photodynamiques sur les protéines (rendement quantique). , une question pratiquement sous-développée, mais néanmoins importante pour élucider à la fois le mécanisme de la réaction photodynamique de la cellule et les caractéristiques structurelles du substrat protéique

<...>KONDAKOVA Etude du mécanisme d'inactivation photodynamique des enzymes Résumé de la thèse<...>L'éclairage de solutions de myosine avec du bleu de méthylène dans l'air conduit à l'inactivation de l'enzyme selon la loi<...>La restauration de la couleur s'accompagne d'une inactivation partielle de l'enzyme (effet « oxygène ») dans<...>À cette fin, les dépendances de Vine en matière d'inactivation enzymatique ont été étudiées dans une large gamme de leurs concentrations :

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ÉTUDE DU MÉCANISME D'INACTIVATION PAR RAYONNEMENT DES ENZYMES RÉSUMÉ DIS. ... DOCTEUR EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : INSTITUT DE PHYSIQUE BIOLOGIQUE DE L'ACADÉMIE DES SCIENCES DE L'URSS

À partir de la comparaison et de l’analyse des résultats présentés dans la thèse, le processus en deux étapes d’inactivation par rayonnement des enzymes est présenté comme suit (Chapitre 13). Au premier stade d'inactivation, une redistribution de la charge électronique se produit dans la molécule protéique avec formation et localisation d'une lacune électronique.

E I D U S ÉTUDIANT LE MÉCANISME D'INACTIVATION PAR RAYONNEMENT DES ENZYMES Résumé de la thèse pour concours scientifique<...>EI DUS ÉTUDIANT LE MÉCANISME D'INACTIVATION PAR RAYONNEMENT DES ENZYMES Résumé de la thèse pour concours scientifique<...>Ainsi, pour inactiver les enzymes sous les effets « indirects » et « directs » des rayonnements<...>(Dommages cachés lors de l'inactivation par rayonnement des enzymes).<...>Participation de l'oxygène à l'inactivation par rayonnement des enzymes sèches. Radiobiologie. 4, 44. Eidus L. X. 1964.

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Résumé. La résistance aux antibiotiques chez les micro-organismes de la famille des Enterobacteriaceae est causée par une combinaison de plusieurs mécanismes, par exemple une surproduction de bêta-lactamases, une diminution de la perméabilité de la membrane externe de la cellule microbienne (généralement associée à la perte de protéines porines), et la présence d'un système d'efflux. Une attention particulière mérite les métallo-bêta-lactamases (MBL), dont la présence détermine la résistance des micro-organismes à Gram négatif à tous les antibiotiques bêta-lactamines (dans certains cas, à l'exception de l'aztréonam). Actuellement, il n’existe aucun inhibiteur MBL des micro-organismes résistants aux carbapénèmes approuvé pour une utilisation clinique. La recherche d'inhibiteurs MBL efficaces de micro-organismes résistants aux carbapénèmes, approuvés pour une utilisation clinique et renforçant l'effet des carbapénèmes, a servi de base à cette étude. Le travail a été réalisé en 3 étapes : 1) création d'un système modèle utilisant un réactif standard de l'enzyme métallo-bêta-lactamase recombinante de P. aeruginosa, exprimée dans E. coli, pour évaluer l'augmentation des concentrations minimales inhibitrices (CMI ) des carbapénèmes contre des souches de micro-organismes à Gram négatif auparavant sensibles in vitro ; 2) évaluation de l'efficacité d'inhibiteurs de MBL prometteurs en présence du même réactif enzymatique standard ; 3) évaluation de la capacité des inhibiteurs identifiés à renforcer l'effet des carbapénèmes contre les isolats cliniques de micro-organismes à Gram négatif produisant du MBL, sur la base de la CMI et de l'indice de concentration fractionnaire inhibiteur (FIC). La méthode standard en damier a été modifiée pour évaluer l’utilisation combinée d’un antibiotique carbapénème et d’un inhibiteur potentiel de la MBL, un médicament bisphosphonate, l’acide étidronique. À l’aide d’un réactif standard pour l’enzyme métallo-bêta-lactamase recombinante de P. aeruginosa exprimée dans E. coli, un système modèle a été créé qui nous permet d’évaluer les perspectives de nouveaux inhibiteurs MBL de micro-organismes à Gram négatif. Un effet dose-dépendant de l'augmentation du niveau de CMI de méropénème sur la quantité de réactif MBL dans le système modèle a été révélé par rapport aux souches de référence de micro-organismes auparavant sensibles à l'antibiotique. L'inactivation de l'enzyme MBL a été constatée même avec de faibles doses de bisphosphonate ; des études ont montré un retard dans l'apparition de la phase de croissance logarithmique de la culture test P. aeruginosa ATCC 27853 jusqu'à 12 heures par rapport au contrôle. Dans le même temps, des doses maximales d'acide étidronique de 50 000 à 100 000 μg/ml ont complètement inhibé la MBL et l'absence de phase logarithmique de croissance microbienne a été observée en raison de l'action du méropénem au niveau de la valeur de sensibilité de référence (2 μg /ml). Un effet synergique a été révélé (indice FIC

L'inactivation de l'enzyme MBL a été constatée même avec de petites doses de bisphosphonate. Les études ont montré un retard ;<...>A partir du 4ème rang, l'intensité d'inactivation par l'enzyme a diminué, et au 8ème rang l'absence de<...>À partir du 5ème rang, l'intensité de l'inactivation enzymatique a diminué et au 8ème rang, un manque de croissance a été noté.<...>Dans les cellules sans acide étidronique, la croissance de la souche testée a été observée en raison de l'inactivation de l'antibiotique par l'enzyme.<...>L'inactivation de l'enzyme MBL a été révélée même avec de petites doses de bisphosphonate.

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LIPASE DE GERME DE BLÉ : PRODUCTION PRÉPARATIVE, PROPRIÉTÉS, RÉGULATION DE L'ACTIVITÉ RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

UNIVERSITÉ D'ÉTAT DE VORONEJ

Le but du travail de thèse était d'obtenir la lipase de germe de blé dans un état homogène, d'étudier ses caractéristiques physico-chimiques, la régulation de son activité, ainsi que le développement et la justification du stockage et de l'utilisation rationnelle du germe de blé dans l'industrie alimentaire, en tenant compte des propriétés catalytiques de la lipase.

Détermination de l'activité enzymatique.<...>L'inactivation acide et thermique a été étudiée dans la plage de pH de 4 à 8,5 et à des températures de 20 à 60 °C.<...>L'augmentation de la température à 60 °C a conduit à une inactivation plus spectaculaire de l'enzyme : après 1 heure d'incubation à<...>L'étude de la cinétique d'inactivation acide a permis de calculer les constantes de vitesse d'inactivation dans les milieux étudiés.<...>En figue. La figure 3 montre des tracés d'Arrhenius indiquant l'inactivation thermique de la lipase.

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ACTIVITÉ LIPOLYTIQUE DES PRÉPARATIONS DE COAGULATION DU LAIT ET SON RÔLE DANS LA FORMATION DE LA QUALITÉ DU FROMAGE ABSTRAIT DIS. ... CANDIDAT DES SCIENCES TECHNIQUES

INSTITUT TECHNOLOGIQUE DE LENINGRAD DE L'INDUSTRIE DU FROID

Nouveauté scientifique de l'ouvrage. Pour la première fois, un système de critères permettant d'évaluer l'aptitude des préparations coagulantes du lait à la fabrication du fromage sur la base de leurs propriétés lipolytiques a été développé (A.S. n° 1040702 URSS). L'activité lipase de médicaments d'origines diverses et sa dépendance au pH et à la température ont été étudiées. La cinétique d'inactivation de la coagulation et des activités lipolytiques de certains médicaments sous l'influence de la température et de l'irradiation ultraviolette a été étudiée. La spécificité des lipases des médicaments coagulant le lait a été établie. Une relation a été mise en évidence entre les paramètres de lipolyse et la qualité des fromages.

La cinétique d'inactivation de la coagulation et des activités lipolytiques de certains médicaments sous<...>Cinétique d'inactivation - en mesurant l'activité résiduelle des enzymes (I.B. Berezin, L.L.<...>complexe) et une inactivation thermique accrue de l’enzyme à des températures suffisamment élevées.<...>ou inactivation d'enzymes sous l'influence d'une irradiation UV (tableau 4).<...>Aucune inactivation notable des enzymes lipolytiques sous l'influence de l'irradiation ultraviolette n'a été détectée.

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ÉTUDE DU RÔLE DU FACTEUR D'INFORMATION DANS LA PHOTOINACTIVATION DES PROTÉINES RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

INSTITUT DE BOTANIQUE EXPÉRIMENTALE DE L'ACADÉMIE DES SCIENCES DE LA BSSR

Le but de ce travail était 1) une étude systématique de la relation entre l'état conformationnel des molécules protéiques et le niveau de leur phosphosensibilité ; 2) vérification expérimentale de la possibilité d'utiliser l'énergie d'excitation électronique, désactivée le long d'un trajet non radiatif, pour la photoinactivation de protéines.

En règle générale, le rendement quantique d'inactivation des protéines étudiées diminuait avec l'ajout de sels.<...>De nombreux auteurs notent la stabilité accrue des enzymes dans les complexes enzyme-substrat selon<...>inactivation sur fond de protection et d'activation.<...>L'inactivation de l'Y n'apparaît qu'à des doses assez importantes de lumière Y.<...>À propos de l'effet protecteur du substrat lors de l'inactivation ultraviolette de certaines enzymes.

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Un biocatalyseur hétérogène à base d'inulinase immobilisée sur le sorbant non ionique Stirosorb a été proposé. Une inactivation thermique et acide de l'inulinase libre et immobilisée a été réalisée. Les valeurs correspondantes des constantes d'inactivation ont été calculées. Une augmentation de la stabilité thermique de l’enzyme immobilisée par rapport à celle libre a été révélée. L'effet de l'inactivation thermique sur la structure de l'enzyme a été examiné par spectroscopie IR.

L'inactivation thermique et acide des enzymes natives et immobilisées a été réalisée par thermostatisation.<...>La figure 1 montre la dynamique du processus d'inactivation de l'enzyme libre et immobilisée à des températures<...>L'inactivation enzymatique est dans la plupart des cas une réaction de premier ordre et est décrite par l'équation<...>Pour l'enzyme immobilisée, une diminution de la constante d'inactivation a été constatée par rapport à l'enzyme native.<...>Les spectrogrammes de l'enzyme après inactivation (70 °C) pendant 30 minutes ont montré une augmentation significative

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N° 3 [Bulletin de l'Université de Moscou. Série 2. Chimie, 2014]

La revue publie des articles rédigés par des membres du personnel universitaire et des auteurs d'autres organisations en Russie et dans le monde. Les publications couvrent toutes les branches de la chimie.

Sur la base des données sur le mécanisme d'inactivation enzymatique, des compositions de tensioactifs non ioniques ont été développées<...>Sur la base des données sur le mécanisme d'inactivation de l'enzyme antistaphylococcique LysK, des approches pour<...>T. 55. N°3 d'où il ressort clairement que l'inactivation de l'enzyme se produit au premier ordre avec une constante d'inactivation<...>Les valeurs des constantes d'inactivation augmentent de manière significative avec l'augmentation des rapports molaires PLPEG:enzyme<...>La valeur constante d'inactivation de l'enzyme en présence d'acide polyacrylique diminue d'environ

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En utilisant les méthodes de Dixon et la modification chimique, le rôle du groupe imidazole de l'histidine, des groupes w-carboxyle des acides aspartique et glutamique et des groupes sulfhydryle de la cystéine dans l'hydrolyse des triglycérides a été révélé. Il a été démontré que l'éthylènediaminetétraacétate est un inhibiteur non compétitif de la lipase.

le bleu devrait conduire à l’inactivation de l’enzyme, ce qui a été observé dans nos expériences.<...>Le traitement de la lipase par le dithionitrobenzène entraîne une modification des groupes SH de l'enzyme et son inactivation.<...>Lorsque les groupes SH étaient bloqués par le p-chloromercuribenzoate, une inactivation partielle de la lipase était observée.<...>L'inactivation partielle de l'enzyme lors du blocage des groupes sulfhydryle indique leur contribution à<...>Le rôle des groupes fonctionnels protéiques dans les enzymes // Enzymes. M. : Sciences. 1964. pp. 101-118.

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L'inactivation thermique de la glucoamylase a été étudiée par la méthode spectrophotométrique, les méthodes numériques d'analyse thermique différentielle (ATD), etc. La stabilité thermique de cette enzyme a été démontrée sur une large plage de températures. La présence d'une structure quaternaire de glucoamylase, représentée par deux sous-unités, a été confirmée

ETUDE DU PROCESSUS D'INACTIVATION THERMIQUE DE LA GLUOAMYLASE VESTNIK VSU.<...>Série chimie, biologie, pharmacie 2003. N° 1. p. 57 – 60 UDC 577.154.31 RECHERCHE DU PROCÉDÉ D'INACTIVATION THERMIQUE<...>Nous avons étudié l'inactivation thermique de la glucoamylase à des températures de 50, 60, 70 0C.<...>Le taux d'inactivation des enzymes en solution augmente rapidement avec l'augmentation de la température de 500 C à 700 C.<...>Les données obtenues indiquent que l'inactivation thermique de la glucoamylase est un problème typique.

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INFLUENCE DU REMPLACEMENT DES RÉSIDUS Met PAR LES RÉSIDUS Leu SUR LES PROPRIÉTÉS CATALYTIQUES, LA STABILITÉ OXYDATIVE ET TEMPÉRATURE DE LA LEVURE D-AMINO ACIDES OXYDASE [Ressource électronique] / Atroshenko [et al.] // Bulletin de l'Université de Moscou. Série 2. Chimie.- 2016.- N°4.- P. 47-57.- Mode d'accès : https://site/efd/373180

La stabilité oxydative des enzymes est déterminée principalement par les résidus Cys et Met. Dans le cas de la D-aminoacide oxydase (DAAO, EC 1.4.3.3) de la levure Trigonopsis variabilis (TvDAAO), trois mutéines avec substitutions ponctuelles du résidu Met au résidu Leu ont été obtenues par mutagenèse dirigée. Le choix des positions d'introduction des substitutions a été effectué sur la base d'un alignement multiple de séquences d'acides aminés DAAO provenant de différentes sources, ainsi que de l'analyse de la structure tridimensionnelle de TvDAAO. Les propriétés catalytiques, ainsi que la température et la stabilité oxydative, ont été étudiées pour les mutants obtenus. Dans tous les cas, le remplacement a entraîné une modification du profil de spécificité du substrat des enzymes mutantes. Il y a une augmentation notable des constantes de Michaelis pour les petits substrats et une diminution du KM pour les acides D-aminés avec un radical latéral volumineux. Il a été démontré qu'à la suite de l'une des substitutions, la stabilité en température de TvDAAO augmente de 2 à 3 fois par rapport à l'enzyme de type sauvage. Une méthode a été développée pour déterminer la stabilité du TvDAAO à l’action du peroxyde d’hydrogène. La stabilité oxydative de l'enzyme de type sauvage et du mutant TvDAAO résultant a été étudiée. Il a été constaté que dans tous les cas, le remplacement du résidu Met par un résidu Leu avait un léger effet sur la stabilité oxydative de l'enzyme.

L'inactivation du mutant TvDAAO et de l'enzyme de type sauvage en présence de peroxyde d'hydrogène a été étudiée à 0,05 M.<...>deux fonctions exponentielles, et le taux d'inactivation de l'enzyme dépend de sa concentration

Le seul magazine mensuel scientifique, technique et analytique en Russie et dans les pays de la CEI sur les développements scientifiques et techniques dans tous les domaines de la réfrigération, des équipements et technologies cryogéniques, de la climatisation et de la ventilation, de l'automatisation et du contrôle, du transport réfrigéré, des processus et appareils de production alimentaire. , substances actives, problèmes environnementaux et économies d'énergie. Depuis plus de 100 ans, la revue est la principale source d'informations sur les travaux fondamentaux et appliqués d'éminents scientifiques nationaux et étrangers, ainsi qu'une publication pour la publication des résultats des thèses pour les diplômes scientifiques de candidat et de docteur ès sciences. La revue est incluse dans la base de données internationale de résumés Agris et est enregistrée dans le Russian Science Citation Index (RSCI).

Mots clés : traitement aux micro-ondes, inactivation de la peroxydase et de l'oxydase, pommes de terre fraîchement coupées, modes<...>Dans ce cas, il est conseillé de régler le moment optimal pour le traitement par champ micro-ondes afin que le processus d'inactivation<...>les enzymes n'ont pas conduit à un ramollissement excessif du tissu du produit.<...>L'inactivation de la peroxydase à la surface et à l'intérieur des pièces ne s'est produite qu'au bout de 3 minutes (Fig. 3, D), avec<...>Ainsi, d'après les résultats d'études sur l'inactivation des enzymes et des micro-organismes par le régime optimal

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"LE PROBLÈME DE LA "RECONNAISSANCE" : AMINOACYL-ARNT SYNTHÉTASES ET LEUR INTERACTION AVEC L'ARNT" RÉSUMÉ DIS. ... DOCTEUR EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : ORDRE DE LÉNINE INSTITUT DE BIOCHIMIE DU NOMMÉ D'APRÈS L'ACADÉMIE DES SCIENCES A. N. BACH URSS

PRINCIPALES conclusions 1 . Le point de départ de l'étude expérimentale du problème de la reconnaissance est le développement de fondements méthodologiques pour l'étude des aminoacyl-ARNt synthétases et de l'ARNt.

"Tableau Influence des substrats sur le taux de thermoinactivation des ARSases du foie de rat, Inactivation thermique<...>Cependant, lorsqu'ils sont présents ensemble dans des conditions de formation de valyladinyle, "l'inactivation de l'enzyme<...>L'augmentation de "l'inactivation observée en présence de "!<...>L'effet de l'ARNt sur l'activité photochimique de l'APCae du foie de rat. inactivation en l'absence d'ARNt<...>: selon la nature du substrat et de l'APCase, inactivation accrue, effet protecteur ou

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Dispositions générales L'insuffisance pancréatique exocrine (PIN) est souvent rencontrée dans la pratique des médecins, tant thérapeutes que pédiatres. Classification Par origine : primaire (congénitale), secondaire (acquise). Par mécanisme : absolu et relatif. L'insuffisance pancréatique exocrine (IPE) primaire (congénitale) se forme pendant la période prénatale et est causée par des troubles de l'embryogenèse et/ou des défauts génétiques. L'EPN secondaire (acquis) est associé à des maladies se développant au cours de la période postnatale.

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BIOSYNTHÈSE ET PROPRIÉTÉS DE LA GLUOAMYLASE ASPERGILUFS AWAMORI ABSTRACT DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : ORDRE DE LÉNINE INSTITUT DE BIOCHIMIE DU NOMMÉ D'APRÈS L'ACADÉMIE DES SCIENCES A. N. BACH URSS

CONCLUSIONS 1. Parmi le grand nombre de souches de champignons étudiées, le champignon ASPERGILUFS AWAMORI, avec lequel ce travail a été réalisé, possède une grande capacité à former de la glucoamylase. L'activité des enzymes amylolytiques dans la culture immergée de fisp a été déterminée. awnon d'âges différents. Il a été constaté que dans un milieu contenant du nitrate de sodium, la formation de glucoamylase atteint un maximum dans une culture de 5 jours lors de la culture du champignon en laboratoire, dans des flacons sur une chaise à bascule et dans une culture de 3 jours lors de la culture en fermenteurs. .

Inactivation de la c-amylase et de la glucosyltransférase Pour isoler une préparation de glucoamylase hautement purifiée<...>Utilisation de la résistance à la glucoamylase #sp. awna-t dans un environnement acide et inactivation complète de la *-amylase à<...>Pour une inactivation complète de la glycosyltransférase, Soley a nécessité une exposition prolongée d'au moins 24 heures.<...>Une méthode a été développée pour inactiver la glucosyltransférase et l'α-amylase dans le filtrat de culture d'Aspergillus.<...>Transglycosylase formée dans la culture profonde du champignon Nap/olup et procédés pour son inactivation.

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PROTÉINASES DU PANCRÉAS ET LEURS INHIBITEURS (ÉTUDE DE L'INTERACTION DES PROTÉINASES AVEC DES INHIBITEURS DU SANG. ÉTUDES BIOCHIMIQUES DU MÉCANISME D'ACTION ANTI-INFLAMMATOIRE. APPLICATION CLINIQUE) RÉSUMÉ DU DIS. ... DOCTEUR EN SCIENCES BIOLOGIQUES

ACADÉMIE DES SCIENCES DE LA RSS D'UKRAINIE

1. Sur la base du schéma classique d'isolement des protéinases, développer une méthode d'obtention de préparations médicales de trypsine cristalline et de chymotrypsine pour injections intramusculaires et leur donner une évaluation physico-chimique et pharmacologique. 2. Dans une expérimentation sur des animaux, étudier l'effet anti-inflammatoire, en particulier anti-œdémateux, de la trypsine ichnmotrnisine lorsqu'elle est administrée par voie parentérale, ainsi que les questions liées à l'élucidation de certains aspects du mécanisme de cette action.

Il a été établi que l'inactivation de la trypsine par le sérum se produit rapidement et est généralement entièrement réalisée.<...>Il s'est avéré que la trypsine est protégée de l'inactivation spontanée par un inhibiteur sérique.<...>Cela ne peut pas être attribué à une inactivation spontanée de l’enzyme ; il est probablement retenu par les tissus.<...>L'inhibiteur II provoque une inactivation générale de l'enzyme.<...>principalement avec l'inhibiteur II, qui prédomine quantitativement sur l'inhibiteur I et provoque une inactivation générale

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PROPRIÉTÉS DES ARN SYNTHÉTASES AMINOACTION PRÉSENTES EN FRACTIONS D'ENZYMES PH5 E. COLI B. ABSTRAIT DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : INSTITUT DE CHIMIE BIOLOGIQUE ET MÉDICALE Académie des Sciences Médicales de l'URSS

PROPRIÉTÉS DES SYNTHÉTASES D'AMINOACINE-ARN PRÉSENTES EN FRACTIONS D'ENZYMES PH5 D'E. COLI B.

Il s'est avéré que le temps nécessaire à l'inactivation thermique des enzymes activatrices étudiées était de 50 £,<...>Le temps d'inactivation thermique pour 50 £ de tyrosyl ARN synthétase était de 30 secondes.<...>que la diminution de l'activité dans les régions acides (par rapport au pH optimal) est causée par une inactivation irréversible<...>stabilité différente des amineacyl-GNA synthétases lorsque la préparation enzymatique est incubée à 0°. 1" inactivation thermique<...>La baisse d'activité lorsque le pH passe dans une région acide par rapport au pH optimal est causée par une inactivation irréversible.

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ÉTUDIER LA DÉPENDANCE ENTRE LES CHANGEMENTS PHYSIQUES ET CHIMIQUES DES PROTÉINES ENZYMATIQUES NATIVES ET LEUR ACTIVITÉ CATALYTIQUE RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

INSTITUT DE BIOCHIMIE, Académie des Sciences de la RSS d'Ukraine

Conclusions 1. La présence d'urée dans le mélange d'incubation à une concentration allant jusqu'à 0,166 M n'affecte pas l'activité de l'aldolase. Une augmentation de sa teneur entraîne une diminution de l'activité enzymatique, qui dépend directement de la concentration en urée. 2. L'activité de l'aldolase conservée dans une solution d'urée 0,5 M pendant une heure augmente de 14,2 %...

La question se pose : une inactivation partielle et irréversible des enzymes a-t-elle lieu ici ou se produit-elle seulement ?<...>urée à une concentration de 1 M, nous pensons que dans une solution aqueuse ce n'est pas une dénaturation de l'enzyme qui se produit, mais une inactivation<...>On peut supposer que cette combinaison de molécules en complexes protège l'enzyme d'une inactivation irréversible.<...>formation d'agrégats, une inactivation irréversible de la glycérophosphate déshydrogénase se produit, qui est associée<...>propriétés enzymatiques et physico-chimiques.

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Fondamentaux de la chimie et de la technologie pour la production et la transformation des graisses. Partie 1. Technologie d'obtention des huiles végétales Manuel pédagogique et méthodologique

Université d'État de technologie chimique d'Ivanovo

Le manuel de formation décrit les opérations préparatoires au stockage et à la transformation des matières premières oléagineuses, les opérations technologiques de préparation des graines pour l'extraction de l'huile, expose les fondements théoriques et technologiques de l'obtention des huiles végétales par pressage et extraction, et aborde les questions de purification primaire de l'huile extraite. . Destiné aux étudiants de la spécialité 260401 Technologie des graisses, des huiles essentielles et des produits de parfumerie et cosmétique.

Les conditions doivent garantir la moindre dénaturation des protéines et l'inactivation des enzymes, la détoxification des gâteaux<...>Il contient l'ensemble des enzymes caractéristiques d'une graine vivante.<...>Dans ce cas, les enzymes du groupe phospholipase et l'enzyme lipase sont inactivées.<...>Neutraliser les substances indésirables et inactiver les enzymes qui catalysent les processus de formation<...>Il est plus difficile d’inactiver les enzymes et autres substances indésirables contenues dans les graines de soja.

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ÉTUDES BIOCHIMIQUES DES PRODUITS D'AUTOLYSE DE LEVURES DE VIN RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : ORDRE DE LÉNINE INSTITUT DE BIOCHIMIE DU NOMMÉ D'APRÈS L'ACADÉMIE DES SCIENCES A. N. BACH URSS

But et objectifs de la recherche. - étudier l'évolution de l'activité enzymatique des levures et du vin au cours de l'autolyse ; - examiner les produits d'autolyse, les substances azotées,

Le vieillissement ultérieur entraîne une légère inactivation de l'enzyme.<...>Ces enzymes sont principalement libérées dans le vin.<...>Pendant le traitement thermique, parallèlement à la libération d'enzymes, une inactivation des enzymes se produit.<...>processus dans phénomènes ikhayug de décomposition thermique des substances chimiques, dénaturation thermique des protéines, inactivation<...>Lors du traitement thermique, ainsi que du passage des substances de la levure au vin, on observe une inactivation des enzymes

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Le travail est consacré à l'étude du réactif ATP, qui contient de la luciférase thermostable mutante des lucioles Luciola mingrelica, de la luciférine, du MgS0_4, des composants d'une solution tampon et des stabilisants et est largement utilisé pour déterminer les concentrations nano- et picomolaires d'adénosine-5"- phosphate (ATP) dans divers échantillons biologiques. Évaluation de l'activité, de la stabilité et des caractéristiques analytiques du réactif ATP en solution en présence et en l'absence de gélatine à 5 % et dans un gel de gélatine à une concentration de gélatine de 5 % et une température >. = 30°, une solution de réactif ATP a été obtenue, et en dessous de 30°, une gélification se produit. Les solutions du réactif ATP ont été étudiées à 30°C, et de minces films de gélatine avec le réactif ATP ont été étudiés à 22°C. Les ajouts de gélatine ont été légèrement réduits. l'activité et la stabilité de la luciférase. La sensibilité de la détermination de l'ATP (au-dessus de 0,96) ne dépendait pas de la présence de gélatine et de l'état d'agrégation des systèmes. Les limites de détection étaient de 2 * 10(-12), 7 * 10(-. 13), 7 * 10(-14) M ATP lors de l'utilisation du réactif ATP dans des films de gélatine et en solution en présence de 5% de gélatine et en son absence en conséquence. Il a été démontré que le stockage du réactif ATP à 22°C dans un gel de gélatine préserve non seulement l'activité enzymatique, mais protège également l'enzyme de la contamination bactérienne, entraînant une perte de l'activité luciférase.

Pendant ce temps, l'inactivation du réactif ATP dans le tampon n'était que de 8 %.<...>Les courbes cinétiques d'inactivation montrent (Fig. 2) que dans tous les cas le processus se déroule selon le premier<...>Ensuite, l'inactivation se déroule dans le premier ordre.<...>L'inactivation de l'enzyme à 4° s'est produite au premier ordre et ne dépendait pas du fait que l'enzyme se trouvait ou non dans un tampon.<...>Berezin I.V., Klyachko N.L., Levashov A.V. et autres // Enzymes immobilisées. M., 1987.

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N°1 [Industrie alimentaire et de transformation. Revue de résumés, 2002]

En 1999, le premier numéro de la revue de résumés « Food and Processing Industry » a été publié. Depuis 2000, la Bibliothèque centrale de recherche scientifique paraît trimestriellement. Le magazine est un organe d'information actuelle sur la littérature nationale et étrangère sur l'industrie alimentaire. La publication est destinée aux scientifiques, spécialistes et praticiens de l'industrie alimentaire et peut servir d'outil de référence pour les bibliothécaires et les travailleurs des organismes d'information scientifique et technique. Le volume annuel de RJ est d'environ 1 200 publications. La publication comprend des informations sur les articles les plus significatifs des revues et collections scientifiques et scientifiques et pratiques reçues par la Bibliothèque centrale de recherche scientifique et reflétant le flux documentaire mondial dans tous les secteurs de l'industrie alimentaire.

C, l'enzyme est stable entre 4 et 30°C, puis la stabilité diminue, et après 60°C une inactivation rapide se produit<...>à une inactivation incomplète de la PPO.<...>Il a été noté que 1 et 2 ne provoquent pas d'inactivation enzymatique, 3 de manière minime et 4a et 4b inactivent sélectivement.<...>inactivation rapide de la PPO.<...>Il a été noté que 1 et 2 ne provoquent pas d'inactivation enzymatique, 3 de manière minime et 4a et 4b de manière sélective.

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Base biotechnologique pour l'utilisation de préparations de synthèse microbiologique pour la transformation de viande crue aux propriétés fonctionnelles et technologiques réduites, monographie

L'ouvrage résume les résultats de nombreuses années de recherche et systématise les informations caractérisant les perspectives et les possibilités potentielles d'utilisation de préparations enzymatiques protéolytiques complexes pour corriger les propriétés des matières premières carnées de mauvaise qualité, ainsi que pour les viandes présentant des écarts dans la nature du déroulement des transformations autolytiques. La monographie a été préparée au Département de technologie de production alimentaire de l'Université technologique d'État de Kazan.

au substrat, et de l'autre - le résultat de l'inactivation enzymatique.<...>dans l'industrie alimentaire n'est possible que s'il est complètement inactivé dans le produit fini, car<...>Comme le montrent les résultats obtenus (Fig. 2.4), l'inactivation de l'enzyme commence à pH 8,0 et de manière intensive<...>Une nouvelle augmentation de la température d'incubation jusqu'à 600C a permis de terminer

Le but de cette étude était d'étudier l'influence du matériel végétal introduit dans le sol forestier gris et les conditions de son humidité sur l'activité des enzymes rédox.

sol La stérilisation des échantillons de sol avec de la matière organique introduite par rayonnement \ a conduit à une inactivation complète<...>dans des échantillons de sol et pour compléter l'inactivation de la préparation enzymatique dans le sable de quartz.<...>Une inactivation significative de l'enzyme s'est produite dans le sable de quartz.<...>La stérilisation du sol par rayonnement gamma et haute température conduit à une inactivation complète des déshydrogénases,<...>Il a été démontré que l'inactivation des préparations d'enzymes catalase et peroxydase introduites dans les sols forestiers gris

Ainsi, le but du blanchiment est d'inactiver les enzymes indésirables présentes dans les légumes,<...>Copyright OJSC "CDB "BIBKOM" & LLC "Agency Kniga-Service" 61 n° 10/2015 entre la température et le temps d'inactivation<...>sa forme, sa taille, sa structure, son degré de maturité et surtout sur le type de systèmes enzymatiques soumis à l'inactivation<...>à basse température est parfois utilisé pour améliorer la texture du produit grâce à une inactivation sélective<...>La peroxydase est l'une des enzymes les plus thermostables.

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GRAINES D'ARGINASE VIKI SHORNOY RÉSUMÉ DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : INSTITUT PÉDAGOGIQUE D'ÉTAT DE MOSCOU NOMME D'APRÈS V. I. LÉNINE

Conclusions 1. L'hydrolyse de l'arginine en présence de préparations d'arginase issues de graines de vesce uniquement dans les premiers stades de l'incubation obéit aux conditions d'un processus monomoléculaire. À mesure que la réaction progresse, les vitesses empiriques sont en retard par rapport à celles calculées pour la condition de réaction de premier ordre.

pour calculer les constantes d'inhibition enzymatique par le produit de réaction (ornthine).<...>substrats et produits de réaction ; 2) inactivation thermique de l'enzyme pendant la réaction.<...>L'ensemble des points définit une courbe et nous pouvons donc supposer que l'inactivation thermique est l'enzyme<...>Puisqu'il a été démontré que l'inactivation thermique des médicaments ne se produit pas pendant la réaction, il faut supposer<...>Inactivation de l'arginase végétale lors de l'hydrolyse enzymatique de l'arginine.

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Les radicaux libres, qui comprennent les métabolites activés de l'oxygène et l'oxyde nitrique, lorsqu'ils sont produits en excès, peuvent jouer un rôle important dans l'apparition de conditions pathologiques du système reproducteur : endométriose, mastopathie diffuse, induction de carcinogenèse de diverses localisations. Il existe des preuves étayant le rôle du stress oxydatif dans l’infertilité féminine. Les résultats des études précliniques et cliniques confirment la faisabilité de l'utilisation d'antioxydants pour la prévention et le traitement de ces maladies. Les vitamines A, C, E, en raison de leur disponibilité, de leur prévalence dans la nature, de leur meilleure étude et de leur affinité pour le corps humain, sont le plus souvent incluses dans une thérapie complexe. Il existe de nombreuses preuves de l'efficacité de l'utilisation de vitamines antioxydantes pour le traitement des maladies du système reproducteur. L'efficacité plus élevée de la pharmacothérapie complexe utilisant des antioxydants s'explique non seulement par l'effet sur la peroxydation lipidique comme l'un des maillons de la pathogenèse de la maladie, mais également par une modification de l'intensité du métabolisme des médicaments prescrits simultanément avec des antioxydants dus à la réduction du cytochrome P450 3A4. L'analyse électrochimique de l'activité catalytique du cytochrome P450 3A4 a montré que les vitamines A, C et E affectent la réduction du cytochrome P450 3A4 en raison de leur effet antioxydant.

Ces processus sont contrôlés par des enzymes, éliminant ainsi les fuites de produits réactifs.<...>entraîne une violation de ses fonctions régulatrices en relation avec les processus les plus importants du métabolisme cellulaire : inactivation<...>Les ROS peuvent interagir avec le cytochrome P450, provoquant une inactivation enzymatique.<...>Les vitamines C, E et le bêta-carotène fournissent à l'organisme une AOD non enzymatique due à leur inactivation à différents niveaux.<...>Le bêta-carotène, associé à l'inactivation des espèces réactives de l'oxygène à différents niveaux, est capable de restaurer

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RÉGULATION ET PROPRIÉTÉS DU SYSTÈME VITROGENASE RODOBACTER CAPSULATUS ABSTRACT DIS. ... CANDIDAT EN SCIENCES BIOLOGIQUES

M. : INSTITUT DE MICROBIOLOGIE DE L'ACADÉMIE DES SCIENCES DE L'URSS

Le but de ce travail était d'étudier les propriétés de régulation du système nitrohécase de la bactérie violette non soufrée Rhodobaoter сapaulatua souche BIO

Par conséquent, le passage de la nitrogévase de cette bactérie en NGR-phory est une inactivation de l'enzyme en tant que telle.<...>Un rôle essentiel est l'inactivation de la nitrogénase et du Pd I de R.capaula « inactivation de cette enzyme / puisqu'elle conserve son activité. in vivo et inviSiw lorsqu'il est utilisé<...>La nitrate réductase de B. capeulatua est une enzyme de type diosimilatoire. 8.<...>Un rôle important dans l'inactivation des molécules de nécrgénase et de ferrédoxine I : les produits jouent

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La teneur en héparine libre dans le plasma sanguin des patients atteints de polycythémie essentielle et la fréquence des symptômes neurologiques cérébraux [Ressource électronique] / Gaidukova, Tkachenko, Bublii // Hématologie. Transfusiologie. Europe de l'Est.- 2016.- N°1.- P. 47-57.- Mode d'accès : https://site/efd/478925

Pertinence. La polycythémie vraie (PV) est une maladie du groupe des néoplasies myéloprolifératives dont les manifestations cliniques sont caractérisées par une tendance aux saignements et à la thrombose. Objectif : étudier la teneur en héparine libre dans le plasma sanguin des patients atteints de PV et déterminer. la structure des symptômes cérébraux dans cette maladie. Matériels et méthodes. 32 patients atteints d'IP ont été examinés. Parmi les patients examinés, 18 étaient des hommes et 14 des femmes. L'âge moyen des patients examinés était de 57,2 ± 1,2 ans. Le deuxième groupe d'observation était composé de 52 patients examinés pour suspicion de maladies sanguines myéloprolifératives, mais après un examen clinique et hématologique approfondi, ces maladies ont été exclues et l'état du sang périphérique a été considéré comme SE absolu, en raison de la présence de certaines maladies somatiques. . Parmi les patients examinés, il y avait 30 hommes et 22 femmes. L'âge moyen des patients du groupe 2 était de 55,7 ± 3,6 ans. Le groupe témoin était composé de 35 individus pratiquement en bonne santé et du même âge. La détermination quantitative de la teneur en fraction libre d'héparine a été réalisée par analyse électrophorétique selon la méthode de B.V. Mikhaïlichenko, S.V. Vydybortsa (2000). Résultats et conclusions. Chez les patients atteints d'IP, il existe un déséquilibre dans le métabolisme de l'héparine libre, qui se manifeste par une augmentation de sa teneur dans le plasma sanguin. La discussion présente des données sur le rôle physiologique de l'héparine. Il a été démontré que son action consiste non seulement dans la régulation de l'hémostase, mais aussi dans le contrôle de l'angiogenèse, des réactions immunitaires, de la régulation du métabolisme des graisses et des glucides, de l'activité antibactérienne, antivirale et anti-inflammatoire. Les mécanismes possibles d'apparition des violations identifiées sont discutés.

Tout d'abord, le travail examine les questions suivantes : 1. Les propriétés de l'ARN polymérase changent-elles lorsqu'elle est combinée à l'ADN avant même le début de la synthèse de l'ARN ? 2. Quelle est la stabilisation de la polymérase en présence d'ADN et de NTP associée à : l'acte d'initiation, c'est-à-dire connexion des premiers NTP, avec le processus de synthèse de longues chaînes de polynucléotides ou avec l'effet stabilisant des NTP sur l'ARN polymérase, non associé à la connexion des nucléotides entre eux. 3. Est-il important pour la stabilisation de la polymérase lors de la synthèse de l'ARN de préserver la taille et la structure native double brin de l'ADN matrice ?

Conditions d'incubation g I enzyme libre ; 2 enzyme + ADN) 3 enzyme + ADN + NTP.<...>Tableau 7 Inactivation de la trypsine ARN polymérase en fonction des conditions de sa préincubation Durant la préincubation<...>Ce résultat, ainsi que les données sur inactivation

Les travaux ont étudié l'effet de températures élevées dommageables (45°C) pendant deux et douze heures sur les plantes de G. max et G. soja en modifiant les spectres électrophorétiques de la peroxydase et de la catalase. Les changements quantitatifs et qualitatifs dans les spectres électrophorétiques des feuilles provoqués par le stress thermique dépendaient du génotype, de la phase de développement du soja et de la durée du facteur de stress. Il a été démontré que le stress thermique à court terme n’entraîne pas de changements quantitatifs dans les spectres électrophorétiques de la peroxydase et de la catalase dans les feuilles de soja. Une exposition prolongée à des températures élevées et nocives provoque l'inactivation principalement des formes de peroxydase et de catalase avec une mobilité électrophorétique moyenne. Formes stables de peroxydase avec Rf 0,02 ; 0,10 ; 0,21 (G.max) et Rf 0,02 ; 0,10 ; 0,40 (G. soja), catalase avec Rf 0...0,04 (G. max) et Rf 0...0,04 ; 0,22…0,24 (G. soja), ainsi que les formes sédentaires activées à haute température, assurent le fonctionnement des plantes en conditions de stress

Une exposition prolongée à des températures élevées et nocives provoque l'inactivation principalement des formes de peroxydase.<...>Une exposition prolongée à un choc thermique entraîne une inactivation des enzymes.<...>De multiples formes moléculaires d’enzymes jouent un rôle important dans les mécanismes d’adaptation thermique du soja.<...>L'exposition à des températures élevées et dommageables pendant douze heures provoque principalement l'inactivation<...>Le rôle des enzymes dans la résistance des plantes / K.N. Sarsenbaev, F.A. Polimbetova // Académie des sciences de la RSS du Kazakhstan, Chef Bot. jardin.

La vitesse d'une réaction enzymatique, autrement dit l'activité de l'enzyme, est également déterminée par la présence d'activateurs et d'inhibiteurs dans le milieu : les premiers augmentent la vitesse de réaction et la modifient parfois, les seconds inhibent la réaction. Parmi les composés chimiques qui affectent l'activité des enzymes, il existe diverses substances. Ainsi, HC1 active l'action de la pepsine, des acides biliaires - lipase pancréatique ; certaines enzymes tissulaires (oxydoréductases, cathepsines, arginase), protéinase végétale papaïne, etc. sont activées de manière significative par des composés contenant des groupes SH libres (glutathion, cystéine), et certaines également par la vitamine C. Les ions servent surtout souvent d'activateurs de métaux divalents et parfois monovalents . De nombreuses enzymes ne sont pas actives du tout en l’absence de métaux. Ainsi, lors de l'élimination du zinc, l'anhydrase carbonique est pratiquement dépourvue d'activité enzymatique ; De plus, lors de l’action de cette enzyme, le zinc ne peut être remplacé par aucun autre métal. On connaît des enzymes dont l'action est activée par un certain nombre de métaux, notamment l'énolase (voir Métabolisme des glucides) est activée par Mg 2+, Mn 2+, K +. Dans le tableau 18 montre des exemples de participation de métaux à l'action de certaines enzymes.

Concernant le rôle des métaux dans l'action activatrice des enzymes, les données disponibles indiquent que dans certains cas les ions métalliques (Co 2+, Mg 2+, Zn 2+, Fe 2+) remplissent les fonctions de groupes prothétiques d'enzymes. Dans d'autres cas, ils contribuent à la fixation du substrat sur le site actif et à la formation d'un complexe enzyme-substrat. Par exemple, les ions Mg 2+, à travers un groupe phosphate chargé négativement, assurent l'ajout d'esters monophosphoriques de substances organiques au centre actif des phosphatases qui catalysent l'hydrolyse de ces composés. Dans certains cas, le métal se combine au substrat, formant le véritable substrat sur lequel agit l’enzyme. En particulier, les ions Mg 2+ activent la créatine phosphokinase en raison de la formation du véritable substrat et du sel de magnésium de l'ATP. Enfin, il existe des preuves expérimentales de la participation directe des métaux (par exemple, les ions Ca 2+ dans la molécule d'amylase salivaire) à la formation et à la stabilisation du centre actif et de l'ensemble de la structure tertiaire de la molécule d'enzyme. Il convient également de noter que les métaux jouent souvent un rôle de modulateurs allostériques (voir Fig. 59). En interagissant avec le centre allostérique, un tel métal (modulateur) favorise la formation de la configuration spatiale la plus favorable de l'enzyme et du complexe enzyme-substrat actif.

Les anions à des concentrations physiologiques sont généralement inefficaces ou ont peu d'effet activateur sur les enzymes. Les exceptions sont la pepsine, certaines oxydoréductases activées par les anions, ainsi que l'amylase salivaire, qui catalyse l'hydrolyse de l'amidon, dont l'activité est augmentée par les ions chlore, et l'adénylate cyclase, qui est activée par les anions halogènes.

Inhibiteurs Il est d'usage d'appeler des substances qui provoquent une inhibition partielle ou complète des réactions catalysées par les enzymes. Puisque les enzymes sont des protéines, tous les agents provoquant la dénaturation des protéines (chaleur, acides, alcalis, sels de métaux lourds) conduisent à l'inactivation de l'enzyme. Cependant, une telle inactivation est relativement peu spécifique. Cela n’est pas lié au mécanisme d’action des enzymes. Un groupe beaucoup plus large est constitué d'inhibiteurs dits spécifiques, qui agissent sur une enzyme ou un groupe d'enzymes apparentées. La recherche sur ces inhibiteurs est importante pour plusieurs raisons.

Premièrement, les inhibiteurs peuvent fournir des informations précieuses sur la nature du site actif de l’enzyme, ainsi que sur ses groupes fonctionnels et ses liaisons chimiques qui assurent la formation du complexe enzyme-substrat. On connaît des substances qui lient spécifiquement l'un ou l'autre groupe dans une molécule d'enzyme, l'excluant de la sphère d'une réaction chimique. En particulier, l'iodoacétate ICH 2 -COOH, son amide et son ester éthylique, le parachloromercuribenzoate ClHg - C 6 H 4 -COOH et d'autres réactifs entrent relativement facilement dans des liaisons chimiques avec certains groupes SH d'enzymes. Si de tels groupes sont essentiels à l'acte de catalyse, alors l'ajout de tels inhibiteurs entraîne une perte totale de l'activité enzymatique :

R-SH + ICH 2 -COOH --> HI + R-S-CH 2 -COOH

Un certain nombre d'autres enzymes (cholinestérase, trypsine et chymotrypsine) sont fortement inhibées par certains composés organophosphorés, en particulier le fluorophosphate de diisopropyle (DFP), en raison du blocage du groupe hydroxyle clé de la sérine dans le site actif (voir ci-dessus).

Deuxièmement, les inhibiteurs ont été largement utilisés en enzymologie pour étudier la nature de multiples formes d'enzymes et d'isoenzymes qui diffèrent moins par la mobilité électrophorétique que par la différence de réactions au même inhibiteur.

À l'aide d'inhibiteurs qui désactivent sélectivement certaines étapes d'un processus métabolique en plusieurs étapes, la séquence des réactions chimiques et la nature des enzymes impliquées peuvent être déterminées avec précision. En particulier, grâce à l'utilisation d'iodoacétate, de fluorure et d'autres inhibiteurs, la voie glycolytique des transformations redox du glucose en acide lactique dans le tissu musculaire a été déchiffrée (voir Métabolisme des glucides), qui comporte 11 étapes impliquant 11 enzymes et 10 intermédiaires métabolites.

Le mécanisme d'action de nombreuses toxines et poisons sur l'organisme repose sur l'inhibition enzymatique. Ainsi, on sait qu'en cas d'intoxication à l'acide cyanhydrique, la mort survient en raison de l'inhibition complète des enzymes respiratoires (cytochrome oxydase), notamment des cellules cérébrales. L'effet toxique de certains insecticides sur le corps humain et animal est dû à l'inhibition de l'activité de la cholinestérase, une enzyme qui joue un rôle primordial dans l'activité du système nerveux.

Chimiothérapie rationnelle - l'utilisation consciente des médicaments en médecine doit être basée sur une connaissance précise du mécanisme de leur action, de la biosynthèse des enzymes ou de leur travail dans l'organisme. Parfois, le traitement des maladies humaines implique l’utilisation d’inhibiteurs sélectifs. Ainsi, l'inhibiteur de la trypsine, de la chymotrypsine et de la kallicréine, le trasylol, est largement utilisé dans le traitement de la pancréatite aiguë. L'effet inhibiteur sélectif sur les enzymes de certains composés naturels et synthétiques (appelés antimétabolites) sert actuellement de base au développement de méthodes efficaces pour la synthèse de médicaments chimiothérapeutiques. Cette voie ouvre de larges possibilités pour réguler à la fois la synthèse des enzymes et l'intensité du métabolisme.

Types d'inhibitions. Bien que le mécanisme d’action de la plupart des inhibiteurs ne soit pas clair, une distinction est généralement faite entre l’inhibition réversible et irréversible. Si une molécule inhibitrice provoque des changements ou une modification permanents des groupes fonctionnels de l’enzyme, alors ce type d’inhibition est dit irréversible. Le plus souvent, cependant, une inhibition réversible se produit, qui peut être étudiée quantitativement sur la base de l'équation de Michaelis-Menten. L'inhibition réversible, à son tour, est divisée en compétitive et non compétitive, selon qu'il est possible ou non de surmonter l'inhibition de la réaction enzymatique en augmentant la concentration du substrat. Dans le second cas, l’augmentation de la concentration en substrat ne modifie pas le degré d’inhibition enzymatique.

L'inhibition compétitive peut être provoquée par des substances qui ont une structure similaire à celle du substrat, mais légèrement différente de la structure du véritable substrat. Un exemple classique de ce type d'inhibition est l'inhibition de l'activité de la succinate déshydrogénase par l'acide malonique. Cette enzyme catalyse l'oxydation en déshydrogénant l'acide succinique en acide fumarique selon le schéma :

Si de l'acide malonique (inhibiteur) est ajouté au milieu, alors en raison de sa similitude structurelle avec le véritable substrat acide succinique (présence de deux des mêmes groupes carboxyle ionisés), il réagira avec le centre actif pour former un inhibiteur enzymatique. complexe (voir schéma), cependant, dans ce cas, le transfert d'hydrogène du malonate ne se produit pas. Étant donné que les structures du substrat - l'acide succinique et l'inhibiteur - le malonate sont encore quelque peu différentes, elles entrent en compétition pour la liaison au site actif, et le degré d'inhibition sera déterminé par le rapport des concentrations de malonate et de succinate, et non par la concentration absolue de l'inhibiteur. Ce type d'inhibition est parfois appelé inhibition de l'antagonisme métabolique (Fig. 56).

De manière générale, la réaction entre un inhibiteur et une enzyme peut être représentée par l'équation suivante :

Le complexe résultant, appelé complexe enzyme-inhibiteur (EI), contrairement à ES, ne se décompose pas pour former des produits de réaction. La constante de dissociation du complexe EI ou constante d'inhibition (K 1) peut, selon la théorie de Michaelis-Menten, être déterminée comme le rapport des constantes des réactions inverse et directe :

c'est-à-dire que la constante d'inhibition est directement proportionnelle au produit de la concentration de l'enzyme et de l'inhibiteur et inversement proportionnelle à la concentration du complexe EI.

La méthode d'inhibition compétitive a trouvé une large application dans la pratique médicale. On sait, par exemple, que les sulfamides sont utilisés pour traiter certaines maladies infectieuses causées par des bactéries. Il s'est avéré que ces médicaments sont structurellement similaires à l'acide para-aminobenzoïque, que la cellule bactérienne utilise pour synthétiser l'acide folique, qui fait partie intégrante des enzymes bactériennes. En raison de cette similitude structurelle, le sulfamide, par exemple, bloque l'action de l'enzyme en déplaçant l'acide para-aminobenzoïque du complexe avec l'enzyme qui synthétise l'acide folique, ce qui entraîne une inhibition de la croissance bactérienne.

Certains analogues de la vitamine B6 et de l'acide folique, en particulier la désoxypyridoxine et l'aminoptérine (voir Vitamines), agissent comme des inhibiteurs compétitifs de coenzyme (ou antivitamines), inhibant de nombreux processus biochimiques dans l'organisme.

Inhibition non compétitive est causée par des substances qui n'ont aucune similitude structurelle avec les substrats et qui se lient souvent non pas au centre actif, mais ailleurs dans la molécule enzymatique. Le degré d'inhibition est dans de nombreux cas déterminé par la durée d'action de l'inhibiteur sur l'enzyme. Avec ce type d'inhibition, en raison de la formation d'une liaison covalente stable, l'enzyme subit souvent une inactivation complète, puis l'inhibition devient irréversible. Des exemples d'inhibition (inactivation) non compétitive sont l'action de l'iodoacétate, du fluorophosphate de diisopropyle, ainsi que du phosphate de diéthyl-n-nitrophényle et de l'acide cyanhydrique, qui consiste à lier et à désactiver des groupes fonctionnels ou des ions métalliques dans la molécule d'enzyme.

Pour clarifier la question du type d'inhibition, utilisez l'équation de Michaelis-Menten, le graphe de Lineweaver-Burk et d'autres équations plus avancées, par exemple l'équation d'Edie-Hofstee :

v = - K m (0/[S]) + V max

et les graphiques correspondants en coordonnées rectilignes. Dans les graphiques ci-dessous, tracés en coordonnées v et [S], ainsi qu'en coordonnées 1/v et 1/[S], ​​​​V est la vitesse de réaction maximale, V 1 est la vitesse maximale en présence d'un inhibiteur , K 1 est la constante d'inhibition ; tous les autres symboles ont été présentés ci-dessus.

On voit qu'avec une inhibition de type compétitif (Fig. 57), l'inhibiteur augmente la valeur de K m (d'une quantité égale à la différence de longueur des segments coupés de l'axe des x), sans affecter la vitesse maximale. Cela signifie qu'à une concentration de substrat suffisamment élevée [S], l'inhibiteur est déplacé par les molécules de substrat du complexe EI. En cas d'inhibition non compétitive (Fig. 58), l'inhibiteur réduit la vitesse maximale. Si la valeur de K m ne diminue pas, on parle alors d'inhibition totalement non compétitive. Un type d'inhibition similaire se produit lors de la formation de complexes EI et (ou) EIS inactifs et difficiles à dissocier. Cependant, il existe souvent un type d'inhibition mixte (parfois appelé type partiellement non compétitif), dans lequel une diminution de Vmax est combinée à une augmentation de Km. Cela signifie que le complexe EI conserve une activité partielle, c'est-à-dire la capacité de former un complexe ternaire intermédiaire EIS, dans lequel le substrat subit une transformation catalytique retardée. Dans de rares cas, le degré d'inhibition de l'activité enzymatique peut augmenter avec l'augmentation de la concentration du substrat ; Pour ce type d'inhibition, le terme plutôt imprécis de non-compétitive (de l'anglais uncompetitive) a été proposé. L'un des mécanismes d'une telle inhibition est dû à la possibilité de combiner l'inhibiteur avec le complexe ES pour former un complexe ESI ternaire inactif ou à réaction lente.

Ainsi, en analysant graphiquement les taux de réaction enzymatique en fonction des concentrations de substrat, des informations précieuses sur la cinétique des réactions enzymatiques peuvent être obtenues, éclairant ainsi le mécanisme possible de la catalyse enzymatique.

Régulation de l'activité enzymatique

Il a été indiqué ci-dessus que l'une des propriétés uniques des organismes vivants est leur étonnante capacité à équilibrer les processus cataboliques (biodégradatifs) et anabolisants (biosynthétiques). Bien que les processus de synthèse, de décomposition et d'interconversion de centaines et de milliers de substances diverses se déroulent simultanément dans les cellules, il existe de nombreux mécanismes de régulation qui assurent la constance de l'environnement interne de l'organisme. Certains de ces mécanismes de régulation, parmi lesquels les mécanismes régulant l'activité enzymatique jouent un rôle important, seront discutés ci-dessous.

L'influence de la loi de l'action de masse. Dans une réaction chimique réversible catalysée par une enzyme, par exemple A + B C + D, la concentration des composants de la réaction et, par conséquent, la direction de la réaction seront régulées par l'influence de la loi d'action de masse. En particulier, il peut être mis en évidence dans la réaction de transamination réversible catalysée par l'alanine aminotransférase :

Alanine + α-cétoglutarate Pyruvate + Glutamate.

Ce type de régulation ne joue évidemment qu'un rôle limité, puisque dans des conditions réelles la réaction se déroule généralement dans un sens, puisque les produits résultants peuvent s'avérer être des substrats pour l'action d'autres enzymes et sont éliminés de la réaction ; dans ces cas, un état stable (stationnaire) est établi plutôt qu’un véritable équilibre.

Modification de la quantité d'enzyme. Chez les bactéries, le phénomène de synthèse induite d'enzymes a été bien étudié lorsqu'elles sont cultivées dans un milieu où la seule source de carbone et d'énergie est l'un ou l'autre glucide, par exemple le glucose. Le remplacement du glucose dans le milieu par du lactose conduit à la synthèse induite ou adaptée (après une courte période de phase de latence) de l'enzyme galactosidase (programmée par le gène du lactose, voir Synthèse des protéines), qui décompose le lactose en glucose et galactose. Dans les tissus animaux, une synthèse aussi rapide d'enzymes est observée relativement moins fréquemment, et le mécanisme induisant la synthèse n'a été étudié que pour un petit nombre d'enzymes (tyrosine transaminases, sérine et thréonine déshydratases, tryptophane pyrrolase, etc.). Cependant, lorsque certains poisons, substances cancérigènes, alcaloïdes, insecticides, etc. pénètrent dans l'organisme, on observe au bout de quelques jours une forte augmentation de l'activité (respectivement de la quantité) des enzymes - hydroxylases du réticulum endoplasmique lisse des cellules hépatiques ; oxydant les substances étrangères en produits non toxiques pour l’organisme. D'autre part, des cas ont été décrits où, sous l'action de telles hydroxylases, des substances étrangères sont transformées dans l'organisme en composés plus toxiques. Ce phénomène, à l’opposé de la détoxification, est appelé synthèse létale.

Proenzymes. Les enzymes protéolytiques du tractus gastro-intestinal et du pancréas sont synthétisées sous forme inactive, sous forme de proenzymes (zymogènes). La régulation dans ces cas se résume à la conversion des proenzymes en enzymes actives sous l'influence d'agents spécifiques. Ainsi, la trypsine est synthétisée dans le pancréas sous forme de trypsinogène. Cette dernière est transformée en trypsine active dans l'intestin sous l'action d'une autre enzyme protéique, l'entérokinase, découverte pour la première fois dans le laboratoire d'I. P. Pavlov. Il a été établi que l'effet activateur de l'entérokinase est réduit au clivage d'un hexapeptide du trypsinogène, conduisant à la formation de la structure tertiaire native de la trypsine et de son centre actif (voir ci-dessus) ; une autocatalyse est également observée. La conversion du pepsinogène inactif en pepsine active se produit de manière autocatalytique en raison d'une protéolyse limitée en présence de HC1 et est également associée au clivage du premier inhibiteur spécifique de nature polypeptidique (voir Métabolisme des protéines simples). La synthèse de protéinases sous une forme inactive et d'un certain nombre d'autres protéines précurseurs inactives a évidemment une certaine signification biologique, empêchant la destruction des cellules d'organes dans lesquelles se forment les proenzymes.

Modification chimique de l'enzyme. Il a été indiqué ci-dessus (voir Chimie des protéines) qu'un certain nombre de protéines subissent des modifications post-synthétiques au cours de la formation de leur structure tertiaire. Il s'est avéré que les enzymes clés du métabolisme énergétique - phosphorylase, glycogène synthétase, etc. - sont également contrôlées par la phosphorylation et la déphosphorylation réalisées par des enzymes spécifiques - protéine kinase et protéine phosphatase, dont le niveau d'activité est à son tour régulé par des hormones. (voir Métabolisme des glucides). Le niveau d'activité des enzymes clés et, par conséquent, l'intensité des processus métaboliques seront déterminés par le rapport des formes phosphorylées et déphosphorylées de ces enzymes.

Régulation de l'activité enzymatique selon le principe du feedback. Dans de nombreuses réactions strictement biosynthétiques, le principal type de régulation du taux d'un processus enzymatique à plusieurs étapes est la rétro-inhibition, lorsque le produit final de la chaîne biosynthétique supprime l'activité de l'enzyme catalysant la première étape.

Supposons qu'un processus de biosynthèse en plusieurs étapes se déroule dans les cellules, dont chaque étape est catalysée par sa propre enzyme :

La vitesse d'une telle séquence totale de réactions est largement déterminée par la concentration du produit final (P), dont l'accumulation au-dessus du niveau admissible a un puissant effet inhibiteur sur la première étape du processus, respectivement sur l'enzyme E. 1.

L'existence d'un tel mécanisme de contrôle de l'activité enzymatique par les métabolites a été démontrée pour la première fois chez E. coli lors de l'étude de la synthèse de l'isoleucine et de la cytidine triphosphate (CTP). Il s'est avéré que l'isoleucine, qui est le produit final, supprime sélectivement l'activité de la thréonine déshydratase, qui catalyse la première étape du processus de conversion de la thréonine en isoleucine, qui comprend cinq réactions enzymatiques. De même, le CTP, en tant que produit final de la voie biosynthétique, a un effet inhibiteur sur la première enzyme (aspartate transcarbamoylase), régulant ainsi sa propre synthèse. Ce type d’inhibition est appelé rétroinhibition ou rétroinhibition. Son existence a été prouvée dans tous les organismes vivants et est actuellement considérée comme l'un des principaux types de régulation de l'activité enzymatique et du métabolisme cellulaire en général 1. (1 Il convient de souligner que la vitesse de réaction (ainsi que l'activité enzymatique) dans les processus purement biodégradatifs (cataboliques) est régulée par des produits intermédiaires qui sont des indicateurs de l'état énergétique de la cellule (nucléotides puriques, pyrophosphate, phosphate inorganique, etc.) .)

En revanche, dans les processus amphiboliques (voir Introduction au métabolisme et à l'énergie), qui remplissent simultanément des fonctions biosynthétiques et biodégradatives 2, l'existence d'une régulation a été prouvée à la fois par le type de rétroinhibition et par les macroergs - indicateurs de l'état énergétique du cellule. (2 Les processus amphiboliques incluent des voies telles que la glycolyse, la glycogénolyse, le cycle de l'acide tricarboxylique, la voie de l'hexose monophosphate, la transamination des acides aminés (voir Métabolisme).). Pour les processus amphibols, un type de régulation unique, qui leur est propre, est en outre l'activation par un précurseur, lorsque le premier métabolite d'une voie à plusieurs étapes active l'enzyme qui catalyse la dernière étape. Ainsi, l'effet activateur du glucose-6-phosphate, précurseur du glycogène, sur l'enzyme glycogène synthétase a été prouvé.

Des types similaires d'inhibition par le produit final et d'activation par le premier produit sont caractéristiques des enzymes allostériques (régulatrices) (voir ci-dessus), lorsque l'effecteur, structurellement différent du substrat, se lie à un centre (allostérique) spécial de la molécule d'enzyme, spatialement éloigné du centre actif. Par conséquent, il est courant de distinguer le type de régulation allostérique, qui comprend à la fois l’inhibition allostérique et l’activation allostérique. Les interconversions d'enzymes allostériques actives et inactives sous une forme simplifiée, ainsi que les changements de conformation observés lors de la fixation du substrat et des effecteurs, sont présentés sur la Fig. 59.

On constate que l'attachement d'un effecteur négatif au centre allostérique provoque des changements importants dans la configuration du centre actif de la molécule enzymatique et, par conséquent, une perte de l'affinité de l'enzyme pour son substrat (formation d'un complexe inactif) .

Les interactions allostériques se manifestent dans la nature des courbes de dépendance de la vitesse de réaction initiale sur la concentration du substrat ou effecteur, en particulier dans la forme en S des courbes (écart par rapport à la courbe hyperbolique de Michaelis-Menten). Cela signifie que la liaison d’une molécule de substrat facilite la liaison d’une seconde molécule au centre allostérique, augmentant ainsi la vitesse de la réaction. De plus, les enzymes régulatrices (allostériques) sont caractérisées par une dépendance non linéaire de la vitesse de réaction sur la concentration en enzyme.

Autres types de régulation de l'activité enzymatique. Il existe un certain nombre d'autres mécanismes qui contrôlent le taux des processus métaboliques et l'activité des enzymes intracellulaires. De tels mécanismes peuvent inclure la compétition entre enzymes pour un substrat commun, l'arrêt de l'activité de l'une des enzymes (sous plusieurs formes d'enzymes), l'influence des concentrations de cofacteurs et de leur forme (en particulier les ions métalliques) et le phénomène de compartimentation. Le mécanisme de compartimentation joue apparemment un rôle biologique important, séparant spatialement les enzymes de leurs substrats à travers des biomembranes (par exemple, les enzymes lysosomales : protéinases, phosphatases, ribonucléases et autres enzymes hydrolytiques, des substances sur lesquelles elles agissent dans le cytoplasme) ou mutuellement incompatibles dans les processus métaboliques. processus en même temps. Un exemple de ce dernier peut être les voies de synthèse des acides gras, qui se produisent principalement dans la fraction soluble du cytoplasme, et les voies de dégradation des acides gras, concentrées dans les mitochondries.

Détermination de l'activité enzymatique

La détermination de la teneur quantitative en enzymes des objets biologiques présente certaines difficultés car, à de rares exceptions près, les enzymes dans les tissus sont présentes en concentrations négligeables. Par conséquent, la quantité d’enzymes est jugée par la vitesse de la réaction catalysée, dans certaines conditions de mesure convenues. Dans des conditions optimales de température, de pH du milieu et de saturation complète de l'enzyme avec le substrat, le taux est proportionnel à la concentration de l'enzyme. La vitesse d'une réaction enzymatique est jugée soit par la vitesse de perte du substrat, soit par la vitesse de formation du produit de réaction.

Pour exprimer la concentration d'une enzyme, la Commission des enzymes de l'Union biochimique internationale recommande une unité standard (E). Une unité de toute enzyme est considérée comme la quantité qui, dans des conditions optimales, catalyse la conversion de 1 µmol de substrat par minute (µmol/min). Une nouvelle définition de l'unité internationale d'enzyme catal (kat) a été proposée, correspondant à la quantité d'enzyme capable de provoquer la conversion d'1 mole de substrat en produit en 1 s (1 mol/s). La relation entre l'unité internationale (E) et le katal peut être exprimée comme suit :

ou 1 E = 1 µmol · min -1 = (1/60) µmol · s -1 = (1/60) µkat = 16,67 nkat. Ainsi, 1E de l'enzyme correspond à 16,67 ncat.

Il est également recommandé de mesurer les unités enzymatiques à 25°C, le pH optimal et la concentration en substrat supérieure à la concentration de saturation. Dans ces cas, la vitesse correspond à une réaction d'ordre zéro par rapport au substrat et dépendra uniquement de la concentration de l'enzyme.

Pour exprimer l'activité d'une enzyme, on utilise la définition de l'activité spécifique et moléculaire. L'activité spécifique d'une enzyme est généralement exprimée en nombre d'unités d'activité enzymatique pour 1 mg de protéine (ou en nombre de catals pour 1 kg de protéine active). Le nombre de molécules de substrat converties par une molécule d'enzyme par minute est généralement appelé nombre de tours ou activité moléculaire. Ainsi, une molécule de catalase érythrocytaire est capable de décomposer 5 · 10 6 molécules de peroxyde d'hydrogène en 1 minute. (1 Pour qu'un atome de fer inorganique, qui catalyse également la décomposition de H 2 O 2 , décompose le nombre de molécules de H 2 O 2 que la catalase décompose en 1 s, il faudrait plus de 300 ans. Cet exemple met clairement en évidence l’une des principales propriétés des enzymes : leur forte activité catalytique.)