Travaux de laboratoire en biologie identifiant l'activité catalase. Détection de substances organiques

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Les notes de cours présentées à votre attention ont pour but de préparer les étudiants universités de médecine passer des tests et des examens. Le livre comprend cours complet conférences sur l'anesthésiologie et la réanimation, écrites par langue accessible et sera un assistant indispensable pour ceux qui souhaitent se préparer rapidement à l'examen et le réussir.

Marina Alexandrovna Kolesnikova

Conférence n°1. Le concept de réanimation

Conférence n°2. Manipulations de base en réanimation

1. Trachéotomie

2. Conicotomie

3. Ponction de la cavité pleurale

4. Ponction et cathétérisme de l'espace péridural

5. Ponction lombaire

Conférence n°3. Troubles aigus de la conscience

Conférence n°4. Réanimation cardio-pulmonaire

Conférence n°5. Conditions d'urgence en pneumologie

1. Laryngospasme

2. Embolie pulmonaire

3. Asthme bronchique

Conférence n°6. Conditions d'urgence en cardiologie

1. Infarctus du myocarde

2. Choc cardiogénique

3. Crise hypertensive

4. Troubles du rythme cardiaque, potentiellement mortels

Conférence n°7. Insuffisance rénale aiguë

Conférence n°8. Insuffisance hépatique aiguë

Conférence n°9. Choc

Conférence n°10. Intoxication aiguë

1. Empoisonnement alcool méthylique

2. Empoisonnement alcool éthylique

3. Intoxication à l’éthylène glycol (antigel)

4. Intoxication au dichloréthane

5. Intoxication aux champignons vénéneux (agaric mouche, faux champignons, morilles, champignon vénéneux)

6. Empoisonnement des serpents

7. Intoxication aux acides concentrés (nitrique, acétique, sulfurique)

8. Intoxication à l'arsenic et à ses composés

9. Intoxication alcaline

10. Intoxication à l'atropine

11. Intoxication au cannabis (haschisch, marijuana, marijuana, plan)

12. Intoxication à la cocaïne et à la dicaine

13. Intoxication aux analgésiques narcotiques (morphine, omnopon, dropéridol)

Conférence n°11. Douleur et analgésiques

2. Analgésiques médicaments

Conférence n°12. Anesthésie. Types et étapes de l'anesthésie

1. Théories de l'anesthésie

2. Préparer le patient à l'anesthésie

3. Anesthésie intraveineuse

4. Anesthésie par inhalation

5. Étapes de l'anesthésie

6. Méthodes de surveillance de l'anesthésie

7. Complications de l'anesthésie

Conférence n°13. Anesthésie locale

1. Anesthésie superficielle

2. Anesthésie régionale

3. Anesthésie du plexus cervical (APC)

4. Anesthésie du plexus brachial (BPA)

5. Anesthésie des nerfs périphériques au niveau du poignet

6. Anesthésie des membres inférieurs

7. Anesthésie péridurale

8. Anesthésie lombaire

9. Blocus vagosympathique cervical selon A. V. Vishnevsky

Cours n°14. Évaluation de la gravité des patients et suivi

Conférence n°15. Ventilation artificielle

Conférence n°16. Thérapie par perfusion

1. Transfusion sanguine

2. Nutrition parentérale

3. Thérapie de désintoxication

Marina Alexandrovna Kolesnikova

Anesthésiologie et réanimation. Notes de lecture

Conférence n°1. Le concept de réanimation

La réanimation est une section médecine clinique, étudiant les problèmes de revitalisation du corps, développant des principes de prévention des affections terminales, des méthodes de réanimation et de soins intensifs. Méthodes pratiques la revitalisation du corps est unie par la notion de « réanimation ».

La réanimation (du latin « revitalisation » ou « animation ») est un système de mesures visant à restaurer les fonctions vitales gravement altérées ou perdues. fonctions importantes organisme et son retrait de l’état terminal et décès clinique. Les mesures de réanimation efficaces comprennent les compressions thoraciques et la ventilation artificielle. S'ils sont inefficaces dans les 30 minutes, la mort biologique est déclarée.

Les soins intensifs sont un ensemble de mesures utilisées pour traiter des affections graves mettant la vie en danger et prévoient une utilisation selon les indications. grand complexe mesures thérapeutiques, notamment perfusions intraveineuses, ventilation artificielle à long terme, stimulation cardiaque, méthodes de dialyse, etc.

Une condition critique est l’impossibilité de maintenir l’intégrité des fonctions du corps à la suite d’un dysfonctionnement aigu d’un organe ou d’un système nécessitant un remplacement médicamenteux ou matériel-instrumental.

Un état terminal est un état limite entre la vie et la mort, une extinction réversible des fonctions corporelles, y compris les étapes de préagonie, d'agonie et de mort clinique.

La mort clinique est une condition terminale dans laquelle il n'y a pas de circulation sanguine ni de respiration, l'activité du cortex cérébral cesse, mais les processus métaboliques sont préservés. En cas de décès clinique, il reste possible mise en œuvre efficace mesures de réanimation. La durée de la mort clinique est de 5 à 6 minutes.

Mort biologique- c'est une cessation irréversible processus physiologiques dans les organes et tissus, dans lesquels la réanimation est impossible. Elle est déterminée par une combinaison de plusieurs signes : absence de mouvements spontanés, contractions du cœur et du pouls dans les grosses artères, respiration, réaction à des stimuli douloureux, réflexe cornéen, dilatation maximale des pupilles et absence de leur réaction à lumière. Les signes fiables de décès sont une diminution de la température corporelle jusqu'à 20°C, l'apparition de taches cadavériques et une rigidité musculaire.

Cours n°2. Manipulations de base en réanimation

Ponction percutanée et cathétérisme de la veine principale (sous-clavière). Indications : thérapies infusion-transfusionnelles en grands volumes, nutrition parentérale, thérapie de désintoxication, antibiothérapie intraveineuse, sondage et contraste cardiaques, mesure de la pression veineuse centrale, implantation d'un stimulateur cardiaque, impossibilité de cathétérisme des veines périphériques. Contre-indications : violation du système de coagulation sanguine, processus inflammatoire et purulent au site de ponction et de cathétérisme, traumatisme de la zone de la clavicule, syndrome de la veine cave supérieure, syndrome de Paget-Schretter. Instruments et accessoires de ponction et de cathétérisme : aiguille de ponction, jeu de cathéters en plastique, jeu de conducteurs, seringue pour injections intramusculaires volume 10 ml, ciseaux, porte-aiguille, aiguille chirurgicale et ligature en soie, sparadrap. Technique. Le cathétérisme est réalisé dans le respect des règles d’asepsie et d’antisepsie, en nettoyant les mains de l’opérateur, le champ opératoire et en le recouvrant de matériel stérile. Le patient est positionné horizontalement sur le dos, les bras ramenés au corps et la tête tournée vers l'intérieur. le côté opposé. Une anesthésie locale est utilisée - solution à 0,5-1% de novocaïne. Il est préférable d'effectuer la ponction à droite, car lors de la ponction de la veine sous-clavière gauche, il existe un risque d'endommager le canal lymphatique thoracique. Le point de ponction se situe à la limite du tiers interne et médian de la clavicule, à 2 cm en dessous. L'aiguille est insérée lentement selon un angle de 45° par rapport à la clavicule et de 30 à 40° par rapport à la surface. poitrine entre la clavicule et la première côte en direction du bord supérieur de l'articulation sternoclaviculaire. Lors du passage de l'aiguille, le piston de la seringue est périodiquement relevé pour déterminer s'il est entré dans la veine, et la novocaïne est injectée le long de l'aiguille. Lorsqu’une veine est percée, on a parfois une sensation d’enfoncement. Après avoir pénétré dans la veine, la seringue est déconnectée de l'aiguille et la canule est fermée avec le doigt. Ensuite, un fil guide est inséré dans l’aiguille sur une longueur de 15 à 20 cm et l’aiguille est retirée. Un cathéter du diamètre approprié est passé le long du conducteur et, avec le conducteur, est inséré dans la veine de 6 à 8 cm, après quoi le conducteur est soigneusement retiré. Pour vérifier que le cathéter est correctement positionné, une seringue y est fixée et 2 à 3 ml de sang y sont prélevés, après quoi un bouchon est placé ou un traitement par perfusion est démarré. Le cathéter est fixé à la peau avec une ligature en soie. Pour ce faire, un manchon est réalisé à partir d'un pansement adhésif sur le cathéter à 3 à 5 mm de la peau, sur lequel de la soie est nouée, puis passée dans les oreilles du cathéter et nouée à nouveau. Après fixation du cathéter, le site de ponction est recouvert d'un autocollant aseptique. Complications : ponction de l'artère sous-clavière, embolie gazeuse, ponction de la cavité pleurale, atteinte du plexus brachial, atteinte du canal lymphatique thoracique, atteinte de la trachée, du thymus et de la glande thyroïde, suppuration au site de ponction.

1. Trachéotomie

Indications : obstruction du larynx et de la trachée supérieure due à une obstruction par une tumeur ou un corps étranger, paralysie et spasme cordes vocales, gonflement brutal du larynx, détresse respiratoire aiguë, aspiration de vomissements, prévention de l'asphyxie en cas de blessures graves à la poitrine. Instrumentation : 2 scalpels, 2 pinces anatomiques et chirurgicales chacune, plusieurs pinces hémostatiques, un élévateur, une sonde cannelée, 2 crochets émoussés et 1 crochet pointu monodent, un dilatateur Trousseau ou Deschamps, des aiguilles chirurgicales avec porte-aiguille.

Technique

Le patient est allongé sur le dos, avec un coussin sous les épaules et la tête renversée. Si le patient est en état d'asphyxie, le coussin n'est placé qu'au dernier moment, avant l'ouverture de la trachée. L'anesthésie locale par infiltration est réalisée avec une solution de novocaïne à 0,5 à 1 % additionnée d'adrénaline. En cas d'asphyxie aiguë, l'intervention chirurgicale peut être réalisée sans anesthésie. Points d'identification : l'angle du cartilage thyroïde et le tubercule du cartilage cricoïde. Une incision dans la peau, le tissu sous-cutané et le fascia superficiel est pratiquée à partir du bord inférieur du cartilage thyroïde jusqu'à l'échancrure jugulaire strictement le long de ligne médiane cou. La veine médiane du cou est repoussée ou ligaturée, retrouvant ligne blanche, le long duquel les muscles sont brutalement écartés et l'isthme de la glande thyroïde est exposé. Les bords de l'incision sont écartés à l'aide d'un écarteur Trousseau, des ligatures sont appliquées sur le bord de la plaie et soigneusement insérées...

Travaux de laboratoire № 1

RÔLE DES ENZYMES DANS L'ACCÉLÉRATION DES RÉACTIONS DANS LA CELLULE

(DÉTECTION DE L'ACTIVITÉ CATALASE)

Cible: détecter l'action de l'enzyme catalase dans les cellules végétales et animales, comparer l'activité enzymatique des cellules naturelles et endommagées par l'ébullition.

Équipement: Solution de peroxyde d'hydrogène à 3%, morceaux de pommes de terre crues et bouillies et viande (foie, poumons), éprouvettes.

Détection de l'activité catalase

La catalase est une enzyme qui catalyse la décomposition du peroxyde d'hydrogène pour former oxygène moléculaire, libérés sous forme de bulles de gaz :

catalase

2 H 2 O 2 _ → 2H 2 O + O 2

Le peroxyde d'hydrogène est produit dans certaines cellules végétales et animales en tant que sous-produit de réactions redox. Ce composé est toxique pour les cellules et la catalase assure son élimination efficace. La catalase est l'une des enzymes les plus rapides : une molécule de catalase décompose jusqu'à 200 000 molécules de peroxyde d'hydrogène en une seconde. La catalase est localisée dans les vésicules membranaires des cellules - microcorps et peroxysomes.

Progrès

Prenez 4 tubes à essai propres et placez dans le premier une petite quantité de pommes de terre finement râpées, dans le deuxième - quelques pommes de terre bouillies, dans le troisième - des morceaux de viande finement hachés (foie, poumon), dans le quatrième - un peu hachés. viande bouillie. Ajoutez 3 à 4 ml dans chaque tube à essai. Solution de peroxyde d'hydrogène à 3%. Observez ce qui se passe dans les tubes à essai. Enregistrez les résultats de l’observation dans le tableau.

Activité enzymatique des cellules naturelles et endommagées

Expliquez vos résultats. Tirez une conclusion sur l'activité catalytique de la catalase dans les cellules vivantes et mortes.

Conclusion: ________

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Questions de contrôle:

1. Que sont les enzymes ? Quelle structure des protéines crée leur activité ?___________

2. Quelles sont les propriétés des enzymes ?______

3. Comment on appelle centre actif enzyme? Combien de ces centres peut-il y avoir dans une enzyme ?_

4. En raison de ce que les enzymes accélèrent réactions chimiques?___________________________

5. *L'alcool, le phénol, la chloramine et d'autres antiseptiques sont utilisés en médecine pour traiter les zones du corps contaminées par une flore pathogène. Expliquer pourquoi._____

Gr.___3

Travail de laboratoire n°2

DÉTECTION DE SUBSTANCES ORGANIQUES

Cible: identifier les substances organiques présentes dans les tissus (amidon, protéines, graisses) et étudier leurs propriétés.

Équipement: sac de gaze, grains de blé moulus (farine de blé), solution d'iode à 5 %, graines de tournesol (ou tout autre oléagineux : coton, lin, arachides, soja, etc.).

Composés organiques– les substances carbonées, caractéristiques de la nature vivante, constituent en moyenne 20 à 30 % de la masse des cellules des organismes vivants. Les principales propriétés des cellules et des organismes sont déterminées par polymères organiques: protéines, glucides, acides nucléiques, ainsi que connexions complexes– les graisses et un certain nombre de molécules d'hormones, de pigments, de nucléotides individuels, notamment l'ATP. En plus matière organique les cellules contiennent minéraux et de l'eau, mais la teneur en substances organiques est toujours plus élevée. La quantité de matière organique peut varier.

Protéines – polymères irréguliers ou informatifs dont les monomères sont des acides aminés.

En fonction de leur composition, les protéines sont divisées en :

- simple– sont constitués uniquement d’acides aminés. Par exemple, les protéines végétales sont des prolamines, elles sont contenues dans le gluten des graines de céréales et ne se dissolvent pas dans l'eau ;

- complexe– en plus des acides aminés, ils contiennent d'autres composés organiques (acides nucléiques, lipides, glucides), des composés du phosphore et des métaux. En conséquence, elles sont appelées : nucléoprotéines, lipoprotéines, glycoprotéines, phospho- et métalloprotéines.

Les glucides - composés contenant du carbone, de l'hydrogène et de l'oxygène. Ils sont divisés en mono-, di- et polysaccharides. Les polysaccharides sont des glucides de haut poids moléculaire constitués de grand nombre monosaccharides, leur masse moléculaire est grande, les molécules ont une structure linéaire ou ramifiée. En termes fonctionnels, on distingue les polysaccharides à des fins de réserve et structurels. Insoluble dans l'eau amidon– polysaccharide de réserve principal cellules végétales(polymère ά - glucose) ; lorsqu'il est exposé à l'iode, il devient bleu ; contenu dans grandes quantités dans les tubercules de pomme de terre, les fruits, les graines. Glycogène- un polysaccharide présent dans les tissus du corps humain et animal, ainsi que dans les champignons et les levures - joue rôle important dans la transformation des glucides dans les cellules. Fibre (cellulose)– principal polysaccharide structurel membranes cellulaires plantes.

Lipides et lipides– les graisses et substances analogues aux graisses – les composés organiques avec structure différente. Ils ne se dissolvent pas dans l'eau, mais se dissolvent bien dans les composés organiques : éther, essence, chloroforme, etc.

Par structure chimique lipides - composés de glycérol - alcool trihydrique - de poids moléculaire élevé acides organiques(gras), n’ont pas de structure polymère.

Composition des graines

Annexe n°1.

Instructions pour effectuer des travaux de laboratoire.

Travail de laboratoire n°3

Sujet:

Cible: développer des connaissances sur le rôle des enzymes dans les cellules ; découvrir les propriétés enzymatiques des protéines peroxydases ; renforcer la capacité de travailler avec un microscope; mener des expériences et expliquer les résultats des travaux.

Équipement: solution fraîche de peroxyde d'hydrogène à 3 %, tubes à essai, pinces, tissus végétaux (morceaux de pommes de terre crues et bouillies) et tissus animaux (morceaux de viande crue et bouillie), sable, mortier et pilon.

Informations Complémentaires: Le peroxyde d'hydrogène se forme dans la cellule au cours du métabolisme et a un effet mutagène. H2O2 est une substance chimiquement instable et est capable de se décomposer spontanément avec formation de composés stables : 2 H2O2 = 2 H2O + O2

Progrès.

1. Préparez quatre tubes à essai avec une solution fraîche de peroxyde d'hydrogène à 3 %, puis placez un morceau de pomme de terre crue dans le premier tube à essai, un morceau de pomme de terre bouillie dans le deuxième, un morceau de viande crue dans le troisième et un morceau de viande bouillie dans le quatrième. Observez ce qui se passe dans chaque tube à essai.

2. Faites un tableau montrant l'activité de chaque tissu sous différents traitements.

3. Broyez un morceau de pomme de terre crue dans un mortier avec une petite quantité sable Transférez les pommes de terre écrasées avec le sable dans un tube à essai et déposez-y un peu de peroxyde d'hydrogène. Comparez l’activité des tissus végétaux broyés et entiers.

4. Expliquez vos résultats.

Répondez aux questions:

Comment l’activité enzymatique se manifeste-t-elle dans les tissus vivants et morts ?

L’activité enzymatique diffère-t-elle dans les tissus végétaux et animaux ?

Comment le broyage des tissus affecte-t-il l’activité enzymatique ?

Comment proposeriez-vous de mesurer la vitesse de décomposition du peroxyde d’hydrogène ?

Pensez-vous que tous les organismes vivants contiennent l’enzyme peroxydase ?

assurer la décomposition du peroxyde d'hydrogène ?

Exemple de rapport de laboratoire

« Activité catalytique enzymes dans les tissus vivants"

Conclusion: l'action des enzymes peroxydase est similaire dans les cellules végétales et animales, la communauté des processus physiologiques en est l'une des preuves les liens familiaux entre les organismes végétaux et animaux.