Biyolojide katalaz aktivitesini belirleyen laboratuvar çalışması. Organik maddelerin tespiti

Dipnot

Dikkatinize sunulan ders notları öğrencileri hazırlamaya yöneliktir. tıp üniversiteleri Testleri ve sınavları geçmek için. Kitap şunları içerir: tam kurs tarafından yazılan anesteziyoloji ve resüsitasyon üzerine dersler erişilebilir dil sınava hızlı bir şekilde hazırlanmak ve başarılı bir şekilde geçmek isteyenler için vazgeçilmez bir yardımcı olacaktır.

Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Ders No. 1. Resüsitasyon kavramı

Ders No. 2. Yoğun bakımda temel manipülasyonlar

1. Trakeostomi

2. Konikotomi

3. Plevra boşluğunun delinmesi

4. Epidural boşluğun delinmesi ve kateterizasyonu

5. Lomber ponksiyon

Ders No. 3. Akut bilinç bozuklukları

Ders No. 4. Kardiyopulmoner resüsitasyon

Ders No. 5. Pulmonolojide acil durumlar

1. Laringospazm

2. Pulmoner emboli

3. Bronşiyal astım

Ders No. 6. Kardiyolojide acil durumlar

1. Miyokard enfarktüsü

2. Kardiyojenik şok

3. Hipertansif kriz

4. Kalp ritmi bozuklukları, yaşamı tehdit edici

Ders No. 7. Akut böbrek yetmezliği

Ders No. 8. Akut karaciğer yetmezliği

Ders No. 9. Şok

Ders No. 10. Akut zehirlenme

1. Zehirlenme metil alkol

2. Zehirlenme etil alkol

3. Etilen glikol (antifriz) zehirlenmesi

4. Dikloretan zehirlenmesi

5. Zehirli mantarlarla zehirlenme (sinek agarik, sahte mantarlar, kuzugöbeği kuzugöbeği, zehirli mantar)

6. Yılan zehirlenmesi

7. Konsantre asitlerle (nitrik, asetik, sülfürik) zehirlenme

8. Arsenik ve bileşikleriyle zehirlenme

9. Alkali zehirlenmesi

10. Atropin zehirlenmesi

11. Esrar zehirlenmesi (esrar, esrar, esrar, plan)

12. Kokain ve dikain zehirlenmesi

13. Narkotik analjeziklerle (morfin, omnopon, droperidol) zehirlenme

Ders No. 11. Ağrı ve analjezikler

2. Analjezikler ilaçlar

Ders No. 12. Anestezi. Anestezi türleri ve aşamaları

1. Anestezi teorileri

2. Hastayı anesteziye hazırlamak

3. İntravenöz anestezi

4. İnhalasyon anestezisi

5. Anestezinin aşamaları

6. Anestezi izleme yöntemleri

7. Anestezi komplikasyonları

Ders No. 13. Lokal anestezi

1. Yüzeysel anestezi

2. Bölgesel anestezi

3. Servikal pleksus anestezisi (CPA)

4. Brakiyal pleksus anestezisi (BPA)

5. Bilek bölgesindeki periferik sinirlerin anestezisi

6. Alt ekstremitelerin anestezisi

7. Epidural anestezi

8. Lomber anestezi

9. A. V. Vishnevsky'ye göre servikal vagosempatik blokaj

Ders No. 14. Hasta şiddetinin değerlendirilmesi ve izlenmesi

Ders No. 15. Yapay havalandırma

Ders No. 16. İnfüzyon tedavisi

1. Kan nakli

2. Parenteral beslenme

3. Detoksifikasyon tedavisi

Marina Aleksandrovna Kolesnikova

Anesteziyoloji ve resüsitasyon. Ders Notları

Ders No. 1. Resüsitasyon kavramı

Reanimatoloji bir bölümdür klinik ilaç, vücudu canlandırma sorunlarının incelenmesi, ölümcül durumların önlenmesine yönelik ilkeler, resüsitasyon ve yoğun bakım yöntemlerinin geliştirilmesi. Pratik yöntemler Vücudun yeniden canlandırılması “canlandırma” kavramıyla birleştirilir.

Resüsitasyon (Latince "yeniden canlandırma" veya "animasyon" kelimesinden gelir), ciddi şekilde bozulmuş veya kaybedilen hayati değerlerin restorasyonunu amaçlayan bir önlem sistemidir. önemli işlevler organizmanın terminal durumdan çıkarılması ve klinik ölüm. Etkili resüsisitasyon önlemleri arasında göğüs kompresyonları ve yapay ventilasyon yer alır. 30 dakika içinde etkisiz hale gelmeleri halinde biyolojik ölüm ilan edilir.

Yoğun bakım, ciddi, yaşamı tehdit eden durumların tedavisinde kullanılan ve endikasyonlara göre kullanılmasını sağlayan bir dizi önlemdir. büyük kompleks intravenöz infüzyonlar, uzun süreli yapay ventilasyon, kalp pili uygulaması, diyaliz yöntemleri vb. dahil olmak üzere terapötik önlemler.

Kritik bir durum, tıbbi veya donanım-enstrümantal değişim gerektiren bir organ veya sistemin akut fonksiyon bozukluğunun bir sonucu olarak vücut fonksiyonlarının bütünlüğünü korumanın imkansızlığıdır.

Bir terminal durumu, yaşam ve ölüm arasındaki sınırda bir durumdur; ön ızdırap, ıstırap ve klinik ölüm aşamaları da dahil olmak üzere vücut fonksiyonlarının geri dönüşümlü bir şekilde tükenmesidir.

Klinik ölüm, kan dolaşımının ve nefes almanın olmadığı, serebral korteksin aktivitesinin durduğu, ancak metabolik süreçlerin korunduğu terminal bir durumdur. Klinik ölüm durumunda hala mümkün etkili uygulama canlandırma önlemleri. Klinik ölüm süresi 5 ila 6 dakika arasındadır.

Biyolojik ölüm- bu geri dönüşü olmayan bir durmadır fizyolojik süreçler canlandırmanın imkansız olduğu organ ve dokularda. Bir dizi işaretin birleşimiyle belirlenir: spontan hareketlerin olmaması, büyük arterlerde kalp ve nabız kasılmaları, nefes alma, ağrılı uyaranlara tepki, kornea refleksi, göz bebeklerinin maksimum genişlemesi ve tepkilerinin olmaması. ışık. Güvenilir ölüm belirtileri vücut sıcaklığının 20 ° C'ye düşmesi, kadavra lekelerinin ortaya çıkması ve kas sertliğidir.

Ders No. 2. Yoğun bakımda temel manipülasyonlar

Ana damarın (subklavyen) perkütan delinmesi ve kateterizasyonu. Endikasyonları: büyük miktarlarda infüzyon-transfüzyon tedavisi, parenteral beslenme, detoksifikasyon tedavisi, intravenöz antibiyotik tedavisi, kardiyak sondalama ve kontrast, merkezi venöz basınç ölçümü, kalp pili implantasyonu, periferik damarların kateterizasyonunun imkansızlığı. Kontrendikasyonlar: kan pıhtılaşma sisteminin ihlali, delinme ve kateterizasyon bölgesinde inflamatuar ve pürülan süreç, klavikula bölgesinde travma, superior vena kava sendromu, Paget-Schretter sendromu. Delme ve kateterizasyon için alet ve aksesuarlar: delme iğnesi, plastik kateter seti, iletken seti, şırınga kas içi enjeksiyonlar hacim 10 ml, makas, iğne tutucu, cerrahi iğne ve ipek ligatür, yapışkan bant. Teknik. Kateterizasyon asepsi ve antisepsi kurallarına uygun olarak, operatörün ellerinin, cerrahi alanın temizlenmesi ve steril malzeme ile kapatılmasıyla gerçekleştirilir. Hasta sırt üstü yatay olarak kollar vücuda getirilerek ve baş içe döndürülerek konumlandırılır. karşı taraf. Lokal anestezi kullanılır -% 0,5-1 novokain çözeltisi. Delinmeyi sağ tarafta yapmak daha iyidir, çünkü sol subklavyen veni delerken torasik lenfatik kanala zarar verme tehlikesi vardır. Delinme noktası, klavikulanın iç ve orta üçte birlik kısmının sınırında, 2 cm altındadır. İğne köprücük kemiğine 45°, yüzeye 30-40° açıyla yavaşça geçirilir. göğüs Klavikula ile birinci kaburga arasında sternoklaviküler eklemin üst kenarı yönünde. İğne batırılırken, damara girip girmediğini belirlemek için şırınga pistonu periyodik olarak yukarı çekilir ve iğne boyunca novokain enjekte edilir. Bir damar delindiğinde bazen batma hissi olur. Damara girdikten sonra şırınga iğneden ayrılır ve kanül parmakla kapatılır. Daha sonra iğnenin içinden 15-20 cm uzunluğunda bir kılavuz tel geçirilir ve iğne çıkarılır. İletken boyunca uygun çapta bir kateter geçirilir ve iletken ile birlikte 6-8 cm damar içine sokulur, ardından iletken dikkatlice çıkarılır. Kateterin doğru konumlandırıldığını kontrol etmek için üzerine bir şırınga takılır ve içine 2-3 ml kan çekilir, ardından tıkaç takılır veya infüzyon tedavisine geçilir. Kateter ipek bir bağ ile cilde sabitlenir. Bunu yapmak için, kateterin üzerine ipeğin bağlandığı deriden 3-5 mm uzakta yapışkan sıvadan bir manşon yapılır, ardından kateterin kulaklarından geçirilip tekrar bağlanır. Kateter sabitlendikten sonra delinme yeri aseptik bir etiketle kapatılır. Komplikasyonlar: subklavyen arterin delinmesi, hava embolisi, plevral boşluğun delinmesi, brakiyal pleksusta hasar, torasik lenfatik kanalda hasar, trakea, timus ve tiroid bezinde hasar, ponksiyon bölgesinde süpürasyon.

1. Trakeostomi

Endikasyonları: Bir tümör veya yabancı cisim tarafından tıkanmaya bağlı olarak larinks ve üst trakeanın tıkanması, felç ve spazm ses telleri, gırtlakta keskin şişlik, akut solunum sıkıntısı, kusmuk aspirasyonu, ciddi göğüs yaralanmalarında asfiksinin önlenmesi. Aletler: 2 neşter, her biri 2 anatomik ve cerrahi cımbız, birkaç hemostatik kelepçe, bir asansör, bir yivli prob, 2 künt ve 1 tek dişli keskin kanca, bir Trousseau veya Deschamps dilatörü, iğne tutuculu cerrahi iğneler.

Teknik

Hasta sırtüstü yatar, omuzlarının altında bir yastık bulunur ve başı geriye doğru atılır. Hastanın asfiksi durumunda olması durumunda yastık ancak son anda, soluk borusu açılmadan önce yerleştirilir. Lokal infiltrasyon anestezisi, adrenalin ilavesiyle% 0,5-1 novokain çözeltisi ile gerçekleştirilir. Akut asfiksi durumunda anestezi olmadan ameliyat yapılabilir. Tanımlama noktaları: tiroid kıkırdağının açısı ve krikoid kıkırdağın tüberkülü. Deride, deri altı dokuda ve yüzeysel fasyada tiroid kıkırdağının alt kenarından şah çentiğine kadar kesinlikle bir kesi yapılır. orta çizgi boyun. Boynun medyan veni geriye doğru itilir veya bağlanır. Beyaz çizgi, kasların açıkça birbirinden ayrıldığı ve tiroid bezinin isthmusunun açığa çıktığı. Kesi kenarları Trousseau dilatörü ile açılır, yaranın kenarına ligatürler uygulanır ve dikkatlice yerleştirilir...

Laboratuvar işi № 1

HÜCREDEKİ REAKSİYONLARIN HIZLANDIRILMASINDA ENZİMLERİN ROLÜ

(KATALAZ AKTİVİTESİNİN TESPİTİ)

Hedef: bitki ve hayvan hücrelerinde katalaz enziminin etkisini tespit eder, doğal ve kaynatma nedeniyle zarar görmüş hücrelerin enzimatik aktivitesini karşılaştırır.

Teçhizat: %3 hidrojen peroksit çözeltisi, çiğ ve haşlanmış patates parçaları ve et (karaciğer, akciğer), test tüpleri.

Katalaz aktivitesinin tespiti

Katalaz, hidrojen peroksitin ayrışmasını katalize eden bir enzimdir. moleküler oksijen, gaz kabarcıkları şeklinde salınır:

katalaz

2 H 2 Ö 2 _ → 2H 2 Ö + Ö 2

Hidrojen peroksit, bazı bitki ve hayvan hücrelerinde redoks reaksiyonlarının bir yan ürünü olarak üretilir. Bu bileşik hücreler için toksiktir ve katalaz bunun etkili bir şekilde uzaklaştırılmasını sağlar. Katalaz en hızlı çalışan enzimlerden biridir: Bir katalaz molekülü, bir saniyede 200.000 moleküle kadar hidrojen peroksiti ayrıştırır. Katalaz, hücrelerin membran keseciklerinde - mikro cisimler ve peroksizomlarda lokalizedir.

İlerlemek

4 temiz test tüpü alın ve birincisine az miktarda ince rendelenmiş patates, ikincisine biraz haşlanmış patates, üçüncüsüne ince doğranmış et parçaları (karaciğer, akciğer), dördüncüsüne biraz doğranmış koyun. haşlanmış et. Her test tüpüne 3-4 ml ekleyin. %3 hidrojen peroksit çözeltisi. Test tüplerinde neler olduğunu gözlemleyin. Gözlem sonuçlarını tabloya kaydedin.

Doğal ve hasarlı hücrelerin enzimatik aktivitesi

Bir obje İn vitro gözlemlenen olaylar Gözlemlerin açıklaması
Çiğ patates _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
Haşlanmış patatesler _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
Çiğ et _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________
Haşlanmış et _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________ _____________________________

Sonuçlarınızı açıklayın. Canlı ve ölü hücrelerde katalazın katalitik aktivitesi hakkında bir sonuca varın.



Çözüm: ________

_______________

_______________

_____________

Kontrol soruları:

1. Enzimler nelerdir? Proteinlerin hangi yapısı aktivitelerini yaratır?___________

2. Enzimlerin hangi özellikleri vardır?______

3. Ne denir aktif merkez enzim? Bir enzimde bu tür kaç tane merkez olabilir?_

4. Enzimlerin hızlanmasından dolayı kimyasal reaksiyonlar?___________________________

5. *Alkol, fenol, kloramin ve diğer antiseptikler tıpta vücudun patojenik flora ile kirlenmiş bölgelerini tedavi etmek için kullanılır. Sebebini açıkla._____

Gr.___3

2 numaralı laboratuvar çalışması

ORGANİK MADDELERİN TESPİTİ

Hedef: Dokulardaki organik maddeleri (nişasta, protein, yağlar) tanımlar ve özelliklerini inceler.

Teçhizat: gazlı bez torba, öğütülmüş buğday taneleri (buğday unu), %5 iyot çözeltisi, ayçiçeği tohumları (veya diğer yağlı tohum bitkileri: pamuk, keten, yer fıstığı, soya fasulyesi vb.).

Organik bileşikler- Canlı doğanın özelliği olan karbon içeren maddeler, canlı organizmaların hücre kütlesinin ortalama% 20-30'unu oluşturur. Hücrelerin ve organizmaların temel özellikleri şunlarla belirlenir: organik polimerler: proteinler, karbonhidratlar, nükleik asitler ve ayrıca karmaşık bağlantılar– yağlar ve bir dizi hormon molekülü, pigment, bireysel nükleotidler, özellikle ATP. Ayrıca organik madde hücrelerin içerdiği mineraller ve su, ancak organik madde içeriği her zaman daha yüksektir. Organik madde miktarı değişebilir.

Proteinler – Monomerleri amino asit olan düzensiz veya bilgilendirici polimerler.

Bileşimlerine göre proteinler ikiye ayrılır:

- basit– sadece amino asitlerden oluşur. Örneğin bitki proteinleri prolaminlerdir, tahıl tohumlarının gluteninde bulunurlar ve suda çözünmezler;

- karmaşık– Amino asitlere ek olarak diğer organik bileşikleri (nükleik asitler, lipitler, karbonhidratlar), fosfor bileşiklerini ve metalleri içerirler. Buna göre bunlara denir: nükleoproteinler, lipoproteinler, glikoproteinler, fosfo ve metaloproteinler.

Karbonhidratlar - Karbon, hidrojen ve oksijen içeren bileşikler. Mono-, di- ve polisakkaritlere ayrılırlar. Polisakkaritler, aşağıdakilerden oluşan yüksek molekül ağırlıklı karbonhidratlardır: çok sayıda monosakkaritler, bunların moleküler kütle büyükse moleküller doğrusal veya dallanmış bir yapıya sahiptir. Fonksiyonel açıdan, rezerv ve yapısal amaçlara yönelik polisakkaritler ayırt edilir. Suda çözünmez nişasta– ana yedek polisakkarit bitki hücreleri(polimer ά - glikoz); iyota maruz kaldığında maviye döner; içinde bulunan Büyük miktarlar patates yumrularında, meyvelerde, tohumlarda. glikojen- insan ve hayvan vücudunun dokularında, ayrıca mantar ve mayalarda bulunan bir polisakkarit, - oynar önemli rol Hücrelerdeki karbonhidratların dönüşümünde. Lif (selüloz)– ana yapısal polisakkarit hücre zarları bitkiler.

Lipitler ve lipitler– yağlar ve yağ benzeri maddeler – organik bileşikler farklı yapı. Suda çözünmezler ancak organik bileşiklerde iyi çözünürler: eter, benzin, kloroform vb.

İle kimyasal yapı lipitler - gliserol bileşikleri - trihidrik alkol - yüksek moleküler ağırlığa sahip organik asitler(koyu), polimer yapıya sahip değildir.

Tohum bileşimi

Ek No.1.

Laboratuvar çalışmasının yürütülmesine ilişkin talimatlar.

3 numaralı laboratuvar çalışması

Ders:

Hedef: enzimlerin hücrelerdeki rolü hakkında bilgi geliştirmek; protein peroksidazların enzimatik özelliklerini öğrenmek; mikroskopla çalışma yeteneğini güçlendirmek; Deneyler yapar ve çalışmanın sonuçlarını açıklar.

Teçhizat:%3'lük taze hidrojen peroksit çözeltisi, test tüpleri, cımbız, bitki dokusu (çiğ ve haşlanmış patates parçaları) ve hayvan dokusu (çiğ ve haşlanmış et parçaları), kum, harç ve havaneli.

Ek Bilgiler: Hidrojen peroksit metabolizma sırasında hücrede oluşur ve mutajenik etkiye sahiptir. H2O2 kimyasal olarak kararsız bir maddedir ve kararlı bileşiklerin oluşumuyla kendiliğinden ayrışma yeteneğine sahiptir: 2 H2O2 = 2 H2O + O2

İlerlemek.

1. %3'lük taze hidrojen peroksit çözeltisiyle dört test tüpü hazırlayın, ardından ilk test tüpüne bir parça çiğ patates, ikincisine bir parça haşlanmış patates, üçüncüsüne bir parça çiğ et ve üçüncüsüne bir parça çiğ patates koyun. dördüncüde haşlanmış et. Her test tüpünde neler olduğunu gözlemleyin.

2. Her dokunun farklı tedaviler altındaki aktivitesini gösteren bir tablo yapın.

3. Bir parça çiğ patatesi havanda öğütün. küçük bir miktar kum Ezilmiş patatesleri kumla birlikte bir test tüpüne aktarın ve içine biraz hidrojen peroksit damlatın. Ezilmiş ve bütün bitki dokusunun aktivitesini karşılaştırın.

4. Sonuçlarınızı açıklayın.

Soruları cevapla:

Enzim aktivitesi canlı ve ölü dokularda kendini nasıl gösterir?

Bitki ve hayvan dokularında enzim aktivitesi farklılık gösterir mi?

Öğütme dokusu enzim aktivitesini nasıl etkiler?

Hidrojen peroksitin ayrışma hızını nasıl ölçmeyi önerirsiniz?

Tüm canlı organizmaların peroksidaz enzimini içerdiğini düşünüyor musunuz?

hidrojen peroksitin ayrışmasını sağlamak mı?

Örnek laboratuvar raporu

« Katalitik aktivite Canlı dokulardaki enzimler"

Ne yapıyorlardı?

Ne gözlemledin?

1. Bir parça çiğ patates, içinde H2O2 çözeltisi bulunan bir test tüpüne yerleştirildi.

Patates hücreleri H2O2'nin parçalanmasını hızlandıran enzimler içerir:

2 H2O2 = 2 H2O + O2

2. Bir parça haşlanmış patates, içinde H2O2 çözeltisi bulunan bir test tüpüne yerleştirildi.

Enzimler katalitik özelliklerini kaybetti: Pişirme sırasında ısınma nedeniyle protein denatürasyonu meydana geldi.

3. Bir parça çiğ et, içinde H2O2 çözeltisi bulunan bir test tüpüne yerleştirildi.

Oksijen kabarcıklarının şiddetli salınımı.

Hücrelerde kas dokusu hayvanlarda H2O2'nin parçalanmasını hızlandıran enzimler bulunur:

2 H2O2 = 2 H2O + O2

4. Bir parça haşlanmış et, içinde H2O2 çözeltisi bulunan bir test tüpüne yerleştirildi.

Çözümde herhangi bir değişiklik yok. H2O2 ayrışmasına dair hiçbir belirti yok.

Pişirme sırasında protein moleküllerinin denatürasyonu nedeniyle enzimler katalitik aktivitelerini kaybetmişlerdir.

5. Bir parça doğranmış çiğ patates, H2O2 çözeltisi içeren bir test tüpüne yerleştirildi.

Oksijen kabarcıklarının salınımı öğütme öncesine göre daha yoğun hale geldi.

Patates hücrelerini ezerken H2O2'nin parçalanmasını hızlandıran enzimlerin miktarı arttı, dolayısıyla reaksiyon hızı daha hızlı oldu:

2 H2O2 = 2 H2O + O2

Çözüm: Bitki ve hayvan hücrelerinde peroksidaz enzimlerinin etkisinin benzer olması, fizyolojik süreçlerin ortak olması bunun kanıtlarından biridir. aile bağları Bitki ve hayvan organizmaları arasında.



Makaleyi beğendin mi? Arkadaşlarınla ​​paylaş!